求教：dsRNA不高温变性，能够被反转录成cDNA么？？？# Biology - 生物学
f*n
1 楼
使用dsRNA注射昆虫进行RNAi，然后qPCR检测，
dsRNA高温变性后可以反转录成cDNA，
我提取total RNA后不高温变性，直接反转录成cDNA，
不知道注入昆虫体内的dsRNA，会不会影响qPCR的结果。
dsRNA高温变性后可以反转录成cDNA，
我提取total RNA后不高温变性，直接反转录成cDNA，
不知道注入昆虫体内的dsRNA，会不会影响qPCR的结果。
i*l
2 楼
所以设计RNAI的引物要和QPCR的引物分开，二者的位置不能OverlaP
你问的这个，可以自己试试，不过你的单个Case也不一定应用到所有的Case。问题在引
物设计的时候就可以避免了。
【在 f****n 的大作中提到】
: 使用dsRNA注射昆虫进行RNAi，然后qPCR检测，
: dsRNA高温变性后可以反转录成cDNA，
: 我提取total RNA后不高温变性，直接反转录成cDNA，
: 不知道注入昆虫体内的dsRNA，会不会影响qPCR的结果。
你问的这个，可以自己试试，不过你的单个Case也不一定应用到所有的Case。问题在引
物设计的时候就可以避免了。
【在 f****n 的大作中提到】
: 使用dsRNA注射昆虫进行RNAi，然后qPCR检测，
: dsRNA高温变性后可以反转录成cDNA，
: 我提取total RNA后不高温变性，直接反转录成cDNA，
: 不知道注入昆虫体内的dsRNA，会不会影响qPCR的结果。
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