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请教一个建高表达细胞系的问题
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请教一个建高表达细胞系的问题# Biology - 生物学
h*h
1
Update: got more than 10 resumes when I was out for lunch, will let you know whether you are one of first 10.
目的:1. 回馈本版, 帮助同胞 2. Potential $4K referral bonus :-)
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l*3
2
请教各位一个问题
我之前转了特定的shRNA,然后建了一个基因knockdown的细胞系。现在我需要在这个细
胞系上转同一个基因的一个mutation,但是之前的shRNA应该会对这个mutation有影响
吧,是不是要先把这个mutation先做个突变然后再转?
有类似经验的朋友吗?请指教
多谢
有好建议的朋友注定有好运:-)
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c*l
3
已经发站内信给您 感激不尽
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s*r
4
如果你的shRNA是target CDS的话,再转那个基因就要把位点突变掉,如果是target
UTR的话问题不大。
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d*r
5
zan

【在 h****h 的大作中提到】
: Update: got more than 10 resumes when I was out for lunch, will let you know whether you are one of first 10.
: 目的:1. 回馈本版, 帮助同胞 2. Potential $4K referral bonus :-)

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l*3
6
是靶向UTR的,确定不用突变就可以直接转吗?
谢谢楼上的朋友
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y*0
7
发到你的gmail了,非常感谢!
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l*3
8
我的shRNA是靶向3'UTR的,但是我发现我做过表达要转的质粒也含有这段3'UTR
这样是不是不能直接转了?必须先做突变
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s*r
9
我们做的转的基因都是直接克隆cDNA序列,不带UTR的。你这个情况可能要突变吧
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