请教一个信号通路的问题# Biology - 生物学f*o2014-02-25 08:021 楼有的paper引用的时候, 先说"a 做了什么什么贡献", 然后马上接着说"however, 他们没有考虑到xxx和yyy情况, 我们这篇文章可以避免这些问题"这样的引用应该怎么处理? 要把引用的部分highlight出来么?感觉不是很合适啊....
d*i2014-02-25 08:022 楼我们发现化合物A能够上调B,继而下调C。为了验证,KO B以后发现C还是降低。于是推测A---B---C是一条pathway,但是可能还有一条我们不知道的pathway同时起作用促使A下调C,也就是不依赖B的pathway。现在比较迷茫的是,那么多的信号通路里面,怎么找到第二条pathway。实验到这里停住了。大家给指点一下吧。非常感谢!
T*u2014-02-25 08:023 楼描述非常不清。1. 我看不出A---B---C是一条pathwayA---->B 上调A---->C 降低明显可以没关系。2.你所谓的上调下调是transcript的呢,还是signaling,如磷酸化 etc你要找的是A下调C的mechanism而已。使A【在 d****i 的大作中提到】: 我们发现化合物A能够上调B,继而下调C。为了验证,KO B以后发现C还是降低。于是推: 测A---B---C是一条pathway,但是可能还有一条我们不知道的pathway同时起作用促使A: 下调C,也就是不依赖B的pathway。: 现在比较迷茫的是,那么多的信号通路里面,怎么找到第二条pathway。实验到这里停: 住了。大家给指点一下吧。: 非常感谢!
d*i2014-02-25 08:024 楼感谢您的回复!很抱歉,可能我脑子有点乱。。。。1) 加入A, B的mRNA增高,C是细胞因子mRNA下降。正在做protein。2) 敲除B后加入A,C还是下降的,但是比敲除以前高一点。3)文献已有报道B敲除,C增高。4)目前初步结论是 A---B增高---C降低。根据2)的结果推测可能还有不经过B的通路,也就是A经过其他通路调节C,但是不知道怎么去寻找那条未知的路。
d*i2014-02-25 08:025 楼真诚请教!请指点!谢谢!【在 T****u 的大作中提到】: 描述非常不清。: 1. 我看不出A---B---C是一条pathway: A---->B 上调: A---->C 降低: 明显可以没关系。: 2.你所谓的上调下调是transcript的呢,还是signaling,如磷酸化 etc: 你要找的是A下调C的mechanism而已。: : 使A
d*i2014-02-25 08:026 楼是的,确实是。【在 T****u 的大作中提到】: 描述非常不清。: 1. 我看不出A---B---C是一条pathway: A---->B 上调: A---->C 降低: 明显可以没关系。: 2.你所谓的上调下调是transcript的呢,还是signaling,如磷酸化 etc: 你要找的是A下调C的mechanism而已。: : 使A
d*i2014-02-25 08:029 楼B无,C上。这个是已报道的。我的结果是,B无+A,C下。推测是C有依赖和非依赖B两种。【在 g*****n 的大作中提到】: B上,C下;B无,C还是下。这不已经表明C不依赖于B吗?怎么推出的A---B---C是一条: pathway?
d*i2014-02-25 08:0210 楼C的promoter不难,但是做了reporter以后呢?只检测报告基因不能说明什么,顶多就是转录水平调控,但是还是不知道中间分子。BKO是啥细胞?【在 y****y 的大作中提到】: C的promoter切段在BKO细胞里做reporter?: 工作量略大啊没有特别凶残的phenotype就算了
d*i2014-02-25 08:0212 楼非常感谢!这个工作量确实太大了。可能最多在B的KO细胞里面realtime高通量筛一下。。。。。。array?【在 y****y 的大作中提到】: B的KO细胞...: 找到序列了就提transcription factor啊: 有现成的更好: 需要提的话进度怎么也得按年算了
d*i2014-02-25 08:0214 楼非常感谢您的帮助!array估计老板不乐意做,老板的意思是实验到这里就结束了,可以发文章了。但是我特别想找到那个旁路,唉。。。。【在 y****y 的大作中提到】: 能走高通量的话用reporter的细胞做个siRNA array就可以了吧
d*i2014-02-25 08:0215 楼非常感谢楼上回复的各位!目前看来我只能再看看文献然后在有限范围盲目的筛一下,实在筛不到就算了。我一直好奇,那些文章怎么样把两个本来领域很远的分子拉在一起的。
T*u2014-02-25 08:0216 楼1. candidate based主要是看文献猜2.要找新东西基本还是screen.if B是NF-KB的话,取决于C降低有多重要,如果是TNF, IL1/6这种。也许机理还是有意思的。现在可以做siRNA,shRNA/KO screen.这种都是很大的工作量。且off-target占了90%.所以没有老板的财力支持还是不要做。靠猜的有1。瞎猜,或者2.是否有可能的transcription factor.看看USCS Genomebrowser里面上游的序列。一句话,还是看有多值得做,投入相应的efforts and resource.Good luck.【在 d****i 的大作中提到】: 非常感谢楼上回复的各位!目前看来我只能再看看文献然后在有限范围盲目的筛一下,: 实在筛不到就算了。我一直好奇,那些文章怎么样把两个本来领域很远的分子拉在一起: 的。
d*i2014-02-25 08:0217 楼受教了!非常感谢!【在 T****u 的大作中提到】: 1. candidate based: 主要是看文献猜: 2.要找新东西基本还是screen.: if B是NF-KB的话,: 取决于C降低有多重要,如果是TNF, IL1/6这种。: 也许机理还是有意思的。: 现在可以做siRNA,shRNA/KO screen.这种都是很大的工作量。且off-target占了90%.: 所以没有老板的财力支持还是不要做。: 靠猜的有1。瞎猜,或者2.是否有可能的transcription factor.看看USCS Genome: browser里面上游的序列。
t*22014-02-25 08:0218 楼楼主应该敲出A,再用B 做rescue,看C的变化。你说敲b再加a,c只上调一点点,那就说明没有直接关系。而且是不是直接的靶基因有那么重要吗?做的话工作量不小啊,楼主可以先做个chip-qpcr看看再说。
d*i2014-02-25 08:0219 楼A是化合物, compound。【在 t*****2 的大作中提到】: 楼主应该敲出A,再用B 做rescue,看C的变化。: 你说敲b再加a,c只上调一点点,那就说明没有直接关系。: 而且是不是直接的靶基因有那么重要吗?做的话工作量不小啊,楼主可以先做个chip-: qpcr看看再说。
b*12014-02-25 08:0220 楼其实最重要的是,A 的直接靶点不清楚,不管是B 上还是C下。找到化合物的直接靶点,才可以把这个故事讲清楚。你可以设计该化合物的分子探针,钓出它的直接结合蛋白, 然后鉴定此蛋白, 确定作用蛋白。使A【在 d****i 的大作中提到】: 我们发现化合物A能够上调B,继而下调C。为了验证,KO B以后发现C还是降低。于是推: 测A---B---C是一条pathway,但是可能还有一条我们不知道的pathway同时起作用促使A: 下调C,也就是不依赖B的pathway。: 现在比较迷茫的是,那么多的信号通路里面,怎么找到第二条pathway。实验到这里停: 住了。大家给指点一下吧。: 非常感谢!
d*i2014-02-25 08:0221 楼A的receptor是知道的。然后就只知道中间经过B调控了C。其余未知。【在 b*********1 的大作中提到】: 其实最重要的是,A 的直接靶点不清楚,不管是B 上还是C下。找到化合物的直接靶点: ,才可以把这个故事讲清楚。你可以设计该化合物的分子探针,钓出它的直接结合蛋白: , 然后鉴定此蛋白, 确定作用蛋白。: : 使A