求问非常high fidelity的DNA polymerase# Biology - 生物学m*g2014-03-08 08:031 楼暂时觉得PfuUltra High-Fidelity还不错,基本打算用这个。不知道大家有没有其他比较推荐的。fidelity第一,efficiency第二。谢谢大家的回答!
x*e2014-03-08 08:032 楼phusion【在 m******g 的大作中提到】: 暂时觉得PfuUltra High-Fidelity还不错,基本打算用这个。不知道大家有没有其他比: 较推荐的。: fidelity第一,efficiency第二。谢谢大家的回答!
s*r2014-03-08 08:034 楼kapa hifi【在 m******g 的大作中提到】: 暂时觉得PfuUltra High-Fidelity还不错,基本打算用这个。不知道大家有没有其他比: 较推荐的。: fidelity第一,efficiency第二。谢谢大家的回答!
l*y2014-03-08 08:0310 楼普通100bp的cloning随便用个渣taq都没啥问题,长片段或者高GC的才考虑搞个好酶【在 m******g 的大作中提到】: Product 是100bp左右。: 感谢大家的回答!
x*e2014-03-08 08:0313 楼100bp内突变率很低的 就算Taq精确度也差不到哪去说到底fidelity都是看概率,你才100个碱基,要p多少个cycle才出一个错啊【在 m******g 的大作中提到】: 不是P不P得出来的问题,我是有很多100BP的片段,需要PCR之后测序看看序列,所以希: 望精确度很好,不然就容易弄不清实际的序列。
j*x2014-03-08 08:0314 楼phusion号称>50,Q5号称>100【在 b*****s 的大作中提到】: Pfx50, 是Taq的50x,是我见到最高的。: 常用的pfu 是Taq的6x
p*t2014-03-08 08:0315 楼PCR的时候尽量减少cycle number,extension temperature不用72度,用65度,也可以增加fidelity的。还有,如果你用的是non-model organism有些high fidelity的酶会莫名其妙地不work。最好要一小管sample试试再说【在 m******g 的大作中提到】: 暂时觉得PfuUltra High-Fidelity还不错,基本打算用这个。不知道大家有没有其他比: 较推荐的。: fidelity第一,efficiency第二。谢谢大家的回答!