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求问非常high fidelity的DNA polymerase
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求问非常high fidelity的DNA polymerase# Biology - 生物学
m*g
1
暂时觉得PfuUltra High-Fidelity还不错,基本打算用这个。不知道大家有没有其他比
较推荐的。
fidelity第一,efficiency第二。谢谢大家的回答!
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x*e
2
phusion

【在 m******g 的大作中提到】
: 暂时觉得PfuUltra High-Fidelity还不错,基本打算用这个。不知道大家有没有其他比
: 较推荐的。
: fidelity第一,efficiency第二。谢谢大家的回答!

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w*e
3
Q5

【在 x********e 的大作中提到】
: phusion
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s*r
4
kapa hifi

【在 m******g 的大作中提到】
: 暂时觉得PfuUltra High-Fidelity还不错,基本打算用这个。不知道大家有没有其他比
: 较推荐的。
: fidelity第一,efficiency第二。谢谢大家的回答!

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r*g
5
PCR produce有多大?
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m*g
6
Product 是100bp左右。
感谢大家的回答!

【在 r******g 的大作中提到】
: PCR produce有多大?
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r*g
7
platinum hifi taq works really well in my 260bp cloning
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b*s
8
Pfx50, 是Taq的50x,是我见到最高的。
常用的pfu 是Taq的6x
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b*s
9
Pfu ultra 是Taq的17x
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l*y
10
普通100bp的cloning随便用个渣taq都没啥问题,长片段或者高GC的才考虑搞个好酶

【在 m******g 的大作中提到】
: Product 是100bp左右。
: 感谢大家的回答!

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o*4
11
100bp 吐口口水就P出来了
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m*g
12
不是P不P得出来的问题,我是有很多100BP的片段,需要PCR之后测序看看序列,所以希
望精确度很好,不然就容易弄不清实际的序列。
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x*e
13
100bp内突变率很低的 就算Taq精确度也差不到哪去
说到底fidelity都是看概率,你才100个碱基,要p多少个cycle才出一个错啊

【在 m******g 的大作中提到】
: 不是P不P得出来的问题,我是有很多100BP的片段,需要PCR之后测序看看序列,所以希
: 望精确度很好,不然就容易弄不清实际的序列。

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j*x
14
phusion号称>50,Q5号称>100

【在 b*****s 的大作中提到】
: Pfx50, 是Taq的50x,是我见到最高的。
: 常用的pfu 是Taq的6x

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p*t
15
PCR的时候尽量减少cycle number,extension temperature不用72度,用65度,也可以
增加fidelity的。
还有,如果你用的是non-model organism有些high fidelity的酶会莫名其妙地不work
。最好要一小管sample试试再说

【在 m******g 的大作中提到】
: 暂时觉得PfuUltra High-Fidelity还不错,基本打算用这个。不知道大家有没有其他比
: 较推荐的。
: fidelity第一,efficiency第二。谢谢大家的回答!

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M*g
16
Q5
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