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transfection 的问题

transfection 的问题# Biology - 生物学

s*t2014-05-17 07:05

1 楼

在网上看到去年刚建的新房，大小和价钱还都不错，准备周末去看看model room。
只是这个价钱，比去年同小区里的房子便宜了不少，而且周边4年旧的房子也要这个价
钱，那么，我们要是真的看上了这个房子，真的能以这个listing 的价钱买到么？请明
白人过来指点下。

r*k2014-05-17 07:05

2 楼

如果按着lipo2000说明书上写的在90%左右 cell confluence的时候做transfection，
那第二天细胞就长的满满的了，这能行吗？是不是有contact inhibition？等细胞长
的很满了，我可否trypsinize 然后转到更大的dish里面养？

i*a2014-05-17 07:05

3 楼

why not
but don't count on it being as nice as the model.
if it's already built, can't you see the actual unit instead of the model?

【在 s*******t 的大作中提到】

: 在网上看到去年刚建的新房，大小和价钱还都不错，准备周末去看看model room。
: 只是这个价钱，比去年同小区里的房子便宜了不少，而且周边4年旧的房子也要这个价
: 钱，那么，我们要是真的看上了这个房子，真的能以这个listing 的价钱买到么？请明
: 白人过来指点下。

j*t2014-05-17 07:05

4 楼

我一般是70-80%confluence的时候做transfection，这个也要看什么样的细胞，有些细
胞分裂速度慢，多铺一些细胞应该也没有关系。
如果你已经用lipo2000做了transfection，我觉得第二天就trypsinize不太好。
建议你下次转一个带荧光的质粒，看看转染效率，这样你就知道铺多少细胞最好了。

d*s2014-05-17 07:05

5 楼

新房价格调整快，在房价下跌时候，能拿到很好的deal。

r*k2014-05-17 07:05

6 楼

Hi thx! 我带了一个RFP。用的293t, 长的太快了。果然是even water 也 growth的
293t. 但是现在细胞长的太满了，第一天也就80% confluence的样子。现在传染的
efficiency也就40%。

【在 j****t 的大作中提到】

: 我一般是70-80%confluence的时候做transfection，这个也要看什么样的细胞，有些细
: 胞分裂速度慢，多铺一些细胞应该也没有关系。
: 如果你已经用lipo2000做了transfection，我觉得第二天就trypsinize不太好。
: 建议你下次转一个带荧光的质粒，看看转染效率，这样你就知道铺多少细胞最好了。

f*82014-05-17 07:05

7 楼

实地看很重要
我和老公也很喜欢一个小区的样板房，结果实地看那个房子左边是高压线，不远处就
是本市最忙的高速。。

j*t2014-05-17 07:05

8 楼

恩，293是长得比较快。下次铺细胞是计一下数，确定你铺的是70-80%confluence
另外，还有你也可以试试其他的transfection reagents 来提高转染效率，例如CaCl2
， PEI (Polyethylenimine），Turbofect from Thermo-Fermentas

s*t2014-05-17 07:05

9 楼

还有，这种新房有讲价的空间么？还是就是那么多钱了呢？
买这样的新房是不是就没有buyer/seller agent了，还是selling office就是agent了
？谢谢

r*k2014-05-17 07:05

10 楼

非常感谢！

CaCl2

【在 j****t 的大作中提到】

: 恩，293是长得比较快。下次铺细胞是计一下数，确定你铺的是70-80%confluence
: 另外，还有你也可以试试其他的transfection reagents 来提高转染效率，例如CaCl2
: ， PEI (Polyethylenimine），Turbofect from Thermo-Fermentas

B*n2014-05-17 07:05

11 楼

讲价空间要看当地的房市，到网上问不靠谱，有的builder能降很多，有的不降。
buyer/seller agent也要看，如果builder已经找了listing agent放到市场上卖，
即使你没有buyer agent也可能要求让listing agent做duel，那你还不如找个能
拿rebate的buyer agent合算。

【在 s*******t 的大作中提到】

: 还有，这种新房有讲价的空间么？还是就是那么多钱了呢？
: 买这样的新房是不是就没有buyer/seller agent了，还是selling office就是agent了
: ？谢谢

f*82014-05-17 07:05

12 楼

先看看房子再说嘛