Protein lysate能放在cold room过夜吗？# Biology - 生物学
d*i
1 楼
以前都是tissue裂解以后lysate放在-80冻着，第二天再拿出来定量，溶解要一些时间
。问一下有没有人把lysate （with inhibitor cocktail）放在cold room过一晚上？
会不会降解？
谢谢！
。问一下有没有人把lysate （with inhibitor cocktail）放在cold room过一晚上？
会不会降解？
谢谢！
j*i
2 楼
我觉得没问题啊。牛奶四度都能放一周呢。
【在 d****i 的大作中提到】
: 以前都是tissue裂解以后lysate放在-80冻着，第二天再拿出来定量，溶解要一些时间
: 。问一下有没有人把lysate （with inhibitor cocktail）放在cold room过一晚上？
: 会不会降解？
: 谢谢！
【在 d****i 的大作中提到】
: 以前都是tissue裂解以后lysate放在-80冻着，第二天再拿出来定量，溶解要一些时间
: 。问一下有没有人把lysate （with inhibitor cocktail）放在cold room过一晚上？
: 会不会降解？
: 谢谢！
s*g
3 楼
应该没有问题。因为裂解液里也有很多化学的inhibitor.
跑完的膜啥的不夜访四度么？要是那么娇气，cell signaling的抗体就别卖了。
跑完的膜啥的不夜访四度么？要是那么娇气，cell signaling的抗体就别卖了。
d*i
4 楼
牛奶里面应该没有细胞内那么多各种protease。。。。。。。
【在 j******i 的大作中提到】
: 我觉得没问题啊。牛奶四度都能放一周呢。
d*i
5 楼
跑完的膜上各种蛋白都分开了，即使与某种protease接触也是极少量的接触，所以比较
安全。
【在 s*****g 的大作中提到】
: 应该没有问题。因为裂解液里也有很多化学的inhibitor.
: 跑完的膜啥的不夜访四度么？要是那么娇气，cell signaling的抗体就别卖了。
s*g
6 楼
我们实验室烙印把裂解液室温过夜。因为是病人样品，不舍得扔，第二天就跑胶了。结
果好好的。(不推荐这么做啊！)
细胞免疫荧光染色不也有放了抗体，4度过夜的么。
另外蛋白离心也是四度啊。如果死度就玩完了，这种提取方法也就不那么robust了
还有IP-WB不也四度过夜么（我也是放了inhibitor cocktail）？
果好好的。(不推荐这么做啊！)
细胞免疫荧光染色不也有放了抗体，4度过夜的么。
另外蛋白离心也是四度啊。如果死度就玩完了，这种提取方法也就不那么robust了
还有IP-WB不也四度过夜么（我也是放了inhibitor cocktail）？
m*g
7 楼
大多数蛋白没有问题,但一些磷酸化蛋白会有问题.
t*l
8 楼
感觉没问题啊。做CHIP, IP的时候 protein都是incubation overnight
d*i
9 楼
非常感谢大家！还是没敢。。。。。打算找一个不重要的lysate对比一下。
相关阅读
ISRN Cell Biology???Seasonal Flows on Warm Martian Slopes气死了--最近半年一直在做别人已经发表的东西迷茫的女生想转行，请过来人指点Are you proud of being a Chinese? (转载)Buffalo.Sucrose ultracentrifugation Q请教：microarray的false negativeneed 2 papers调查 DUANQING PEIcell research 的impact factor 好高啊！9.417.请教一个关于Alternative splicing的问题辛苦两年的工作今天被其他的组先发表了经济危机的深化对找工作负面影响得有多大请教大家 关于显微镜用的moss leaflet 样品请教转mRNA到细胞表达请教如何用Excel做这样的图表？我在SF9表达的kinase为什么没有auto-phosphoration？跪求paper，万分感谢！需要给老板cc一份吗？