c*e
2 楼
很多paper说用了各种autophagy inducer,然后看到了p62 upregulation, LC3-II
upregulation, induced autophagy, 也有很多paper说抑制了autophagy看到p62的
accumulation。这个p62上调到底是说induced还是suppressed autophagy。越看越糊涂
。
upregulation, induced autophagy, 也有很多paper说抑制了autophagy看到p62的
accumulation。这个p62上调到底是说induced还是suppressed autophagy。越看越糊涂
。
B*n
3 楼
有一种可以在煤气上烧的
叫stovetop smoker,买大概50刀左右
但是,
用家里现成的可以自制的,不花钱
只需要有点铝箔纸,一个可以干烧的锅子
一个镂空的rack就可以了
我抛给你2个link,你领会下就好了
https://www.youtube.com/watch?v=WbpyFrE3s4o
https://www.youtube.com/watch?v=57rlEXfpt5c
叫stovetop smoker,买大概50刀左右
但是,
用家里现成的可以自制的,不花钱
只需要有点铝箔纸,一个可以干烧的锅子
一个镂空的rack就可以了
我抛给你2个link,你领会下就好了
https://www.youtube.com/watch?v=WbpyFrE3s4o
https://www.youtube.com/watch?v=57rlEXfpt5c
c*e
4 楼
我自己做发现用某一种东西induce了autophagy以后,increased LC3-II for sure, 但
也有很明显的p62 upregulation.
也有很明显的p62 upregulation.
l*3
5 楼
谢谢!我慢慢领会领会。
现在不方便看youtube,但感觉你给的方法都是熏小批量的。我打算做2,30磅香肠,想
买个大点的,一,两次就可以熏完。
【在 B********n 的大作中提到】
: 有一种可以在煤气上烧的
: 叫stovetop smoker,买大概50刀左右
: 但是,
: 用家里现成的可以自制的,不花钱
: 只需要有点铝箔纸,一个可以干烧的锅子
: 一个镂空的rack就可以了
: 我抛给你2个link,你领会下就好了
: https://www.youtube.com/watch?v=WbpyFrE3s4o
: https://www.youtube.com/watch?v=57rlEXfpt5c
现在不方便看youtube,但感觉你给的方法都是熏小批量的。我打算做2,30磅香肠,想
买个大点的,一,两次就可以熏完。
【在 B********n 的大作中提到】
: 有一种可以在煤气上烧的
: 叫stovetop smoker,买大概50刀左右
: 但是,
: 用家里现成的可以自制的,不花钱
: 只需要有点铝箔纸,一个可以干烧的锅子
: 一个镂空的rack就可以了
: 我抛给你2个link,你领会下就好了
: https://www.youtube.com/watch?v=WbpyFrE3s4o
: https://www.youtube.com/watch?v=57rlEXfpt5c
c*g
6 楼
p62可以结合ubiquitinated cargo,同时又结合LC3,所以autophagy inducation 可能
看到p62 upregulation。如果autophagosome-lysosome 被抑制,可以看到p62
accumulation.
【在 c********e 的大作中提到】
: 很多paper说用了各种autophagy inducer,然后看到了p62 upregulation, LC3-II
: upregulation, induced autophagy, 也有很多paper说抑制了autophagy看到p62的
: accumulation。这个p62上调到底是说induced还是suppressed autophagy。越看越糊涂
: 。
c*e
8 楼
如果我in vitro看到加了药A,有LC3-II conversion, p62 upregulation, 在in vivo
的实验中做了p62的IHC,也看到了处理后的upregulation,我可以说in vivo也证明药A
induce autophagy吗?
的实验中做了p62的IHC,也看到了处理后的upregulation,我可以说in vivo也证明药A
induce autophagy吗?
t*e
9 楼
那种wood chips 能从公园捡些来吗?
【在 B********n 的大作中提到】
: 有一种可以在煤气上烧的
: 叫stovetop smoker,买大概50刀左右
: 但是,
: 用家里现成的可以自制的,不花钱
: 只需要有点铝箔纸,一个可以干烧的锅子
: 一个镂空的rack就可以了
: 我抛给你2个link,你领会下就好了
: https://www.youtube.com/watch?v=WbpyFrE3s4o
: https://www.youtube.com/watch?v=57rlEXfpt5c
【在 B********n 的大作中提到】
: 有一种可以在煤气上烧的
: 叫stovetop smoker,买大概50刀左右
: 但是,
: 用家里现成的可以自制的,不花钱
: 只需要有点铝箔纸,一个可以干烧的锅子
: 一个镂空的rack就可以了
: 我抛给你2个link,你领会下就好了
: https://www.youtube.com/watch?v=WbpyFrE3s4o
: https://www.youtube.com/watch?v=57rlEXfpt5c
x*e
10 楼
你这情况好像是autophagy flux blockage. chloroquine CQ是溶酶体抑制剂,你可以
处理的时候加CQ, 如果cq能够增强你的处理引起的LC3II 增加,那就是诱导autophagy,
如果没什么变化,那就可能是LC3II的降解受抑制导致LC3II增加,就可能是autophagy
flux blockage:fusion of autophagosome and lysosome is inhibited。p62是
autophagy的特异性受体,自噬增加会导致p62降解增加,减少p62蛋白量;flux受抑制
则会降低p62的降解,增加p62的蛋白量,所以你的情况看着像是flux blockage。 另外
,检测的时间点很关键的,没有记错的话饥饿2小时的时候LC3II 上升,4小时之后则
降低。 推荐:Guidelines for the use and interpretation of assays for
monitoring autophagy
处理的时候加CQ, 如果cq能够增强你的处理引起的LC3II 增加,那就是诱导autophagy,
如果没什么变化,那就可能是LC3II的降解受抑制导致LC3II增加,就可能是autophagy
flux blockage:fusion of autophagosome and lysosome is inhibited。p62是
autophagy的特异性受体,自噬增加会导致p62降解增加,减少p62蛋白量;flux受抑制
则会降低p62的降解,增加p62的蛋白量,所以你的情况看着像是flux blockage。 另外
,检测的时间点很关键的,没有记错的话饥饿2小时的时候LC3II 上升,4小时之后则
降低。 推荐:Guidelines for the use and interpretation of assays for
monitoring autophagy
c*e
12 楼
这也是我confuse的地方,in vitro的data很clear, in vivo p62 IHC upregulation是
处理了好多次,一个月以后收的sample。有这个paper说,很多人只用p62做autophagy
flux的底物,实际上,多等一段时间,p62表达又自己恢复了
https://www.landesbioscience.com/journals/autophagy/2012AUTO0626R1.pdf
【在 x*****e 的大作中提到】
: 你这情况好像是autophagy flux blockage. chloroquine CQ是溶酶体抑制剂,你可以
: 处理的时候加CQ, 如果cq能够增强你的处理引起的LC3II 增加,那就是诱导autophagy,
: 如果没什么变化,那就可能是LC3II的降解受抑制导致LC3II增加,就可能是autophagy
: flux blockage:fusion of autophagosome and lysosome is inhibited。p62是
: autophagy的特异性受体,自噬增加会导致p62降解增加,减少p62蛋白量;flux受抑制
: 则会降低p62的降解,增加p62的蛋白量,所以你的情况看着像是flux blockage。 另外
: ,检测的时间点很关键的,没有记错的话饥饿2小时的时候LC3II 上升,4小时之后则
: 降低。 推荐:Guidelines for the use and interpretation of assays for
: monitoring autophagy
处理了好多次,一个月以后收的sample。有这个paper说,很多人只用p62做autophagy
flux的底物,实际上,多等一段时间,p62表达又自己恢复了
https://www.landesbioscience.com/journals/autophagy/2012AUTO0626R1.pdf
【在 x*****e 的大作中提到】
: 你这情况好像是autophagy flux blockage. chloroquine CQ是溶酶体抑制剂,你可以
: 处理的时候加CQ, 如果cq能够增强你的处理引起的LC3II 增加,那就是诱导autophagy,
: 如果没什么变化,那就可能是LC3II的降解受抑制导致LC3II增加,就可能是autophagy
: flux blockage:fusion of autophagosome and lysosome is inhibited。p62是
: autophagy的特异性受体,自噬增加会导致p62降解增加,减少p62蛋白量;flux受抑制
: 则会降低p62的降解,增加p62的蛋白量,所以你的情况看着像是flux blockage。 另外
: ,检测的时间点很关键的,没有记错的话饥饿2小时的时候LC3II 上升,4小时之后则
: 降低。 推荐:Guidelines for the use and interpretation of assays for
: monitoring autophagy
d*2
14 楼
根据多年的经验,p62不consistent,很多时候跟lc3-ii共进退。用lc3的wb和gfp-lc3
就行了。
就行了。
d*2
17 楼
1. 首先看GFP-LC3, LC3-II,这个你做过了
2. In vitro 处理Bafilomycin或者Chloroquine,然后再看GFP-LC3, LC-II,这个
可以知道Flux
3. 或者用RFP-GFP-LC3看Flux
4. In vivo,染色看LC-3,如果可以的话,注射Bafilomycin,再看LC-3II的WB。或
者找reporter小鼠。P62可看可不看,毕竟能提供的信息量不多。
【在 c********e 的大作中提到】
: 谢谢,我也发现是这样,GFP-LC3, LC3-II,p62 in vitro都有上调,但我需要(老板
: 非要)看下in
: vivo的IHC,很明显处理后p62的IHC表达增强。我可以说in vivo的finding也支持这个
: 要induce autophagy吗?
:
: lc3
2. In vitro 处理Bafilomycin或者Chloroquine,然后再看GFP-LC3, LC-II,这个
可以知道Flux
3. 或者用RFP-GFP-LC3看Flux
4. In vivo,染色看LC-3,如果可以的话,注射Bafilomycin,再看LC-3II的WB。或
者找reporter小鼠。P62可看可不看,毕竟能提供的信息量不多。
【在 c********e 的大作中提到】
: 谢谢,我也发现是这样,GFP-LC3, LC3-II,p62 in vitro都有上调,但我需要(老板
: 非要)看下in
: vivo的IHC,很明显处理后p62的IHC表达增强。我可以说in vivo的finding也支持这个
: 要induce autophagy吗?
:
: lc3
相关阅读
米饭miRNA进体内的文章被指名打脸了什么才是最简单的方法测XISTRe: 看了眼生物版,很平静 (转载)用Ala作为不可磷酸化的mimic有什么问题吗?这回知道以后要买谁的试剂了!--NeoBiolab on Jimmy Kimmel (转 (转载)求篇全文 - got!Good Artists Copy; Great Artists Steal问一个数据图片再用的问题推荐一个RACE kit吧BGI NGS service 好不好?请教个endnote的问题, 怎么在reference list加描述求pape 包子答谢Drug discovery 的high throughput screening data怎么分析呢? (转载)Looking for【Principal Scientist/AD,Molcecular Biology&Mammalian Cell Culture】for a leading CRO in SH包子求文献Gene expression数据做GSEA的问题原来施一公高中就发表第一作者文章了ZZ想审稿的朋友请进最近讨论转基因很热,我也爆一些“笑料”,无意侵犯他人版权或冒犯他人。New Science Parody :-)