各位大神 incubate 磷酸化的抗体一定要用BSA吗？# Biology - 生物学
f*e
1 楼
用的BOA的billpay。但是忘了AmexSPG的卡号两个月前已经换了。结果付到了旧的卡好
上。BOA显示19号payment complete。Amex上还没有动静。
应该没问题吧。
上。BOA显示19号payment complete。Amex上还没有动静。
应该没问题吧。
r*k
2 楼
各位大神 请教个问题，
小弟要要check一个蛋白的磷酸化水平，
1. block 膜的时候 能用5%的milk 吗？ 还是必须要用5%的BSA？
2. incubate 一抗的时候 还需要dilute在5%的BSA吗？ 还是直接TBST也行？
多谢！！
小弟要要check一个蛋白的磷酸化水平，
1. block 膜的时候 能用5%的milk 吗？ 还是必须要用5%的BSA？
2. incubate 一抗的时候 还需要dilute在5%的BSA吗？ 还是直接TBST也行？
多谢！！
D*E
3 楼
站内信给AMEX，当天就可以帮你调整过来
如果不站内信的话，最后也会调整过来，可能要多花几天。
【在 f*****e 的大作中提到】
: 用的BOA的billpay。但是忘了AmexSPG的卡号两个月前已经换了。结果付到了旧的卡好
: 上。BOA显示19号payment complete。Amex上还没有动静。
: 应该没问题吧。
如果不站内信的话，最后也会调整过来，可能要多花几天。
【在 f*****e 的大作中提到】
: 用的BOA的billpay。但是忘了AmexSPG的卡号两个月前已经换了。结果付到了旧的卡好
: 上。BOA显示19号payment complete。Amex上还没有动静。
: 应该没问题吧。
h*o
4 楼
个人经验不是
cell signal的抗体一般product sheet上面都建议BSA
我一直都用 pierce的superblock 目前为止还没有遇到做不出来而BSA做出来的情况
in cu ba te的时候建议用block 的配 直接用tbst 杂带可能会多
一些
cell signal的抗体一般product sheet上面都建议BSA
我一直都用 pierce的superblock 目前为止还没有遇到做不出来而BSA做出来的情况
in cu ba te的时候建议用block 的配 直接用tbst 杂带可能会多
一些
y*i
5 楼
hard to say
It may go through, may be returned
I've seen both
【在 f*****e 的大作中提到】
: 用的BOA的billpay。但是忘了AmexSPG的卡号两个月前已经换了。结果付到了旧的卡好
: 上。BOA显示19号payment complete。Amex上还没有动静。
: 应该没问题吧。
It may go through, may be returned
I've seen both
【在 f*****e 的大作中提到】
: 用的BOA的billpay。但是忘了AmexSPG的卡号两个月前已经换了。结果付到了旧的卡好
: 上。BOA显示19号payment complete。Amex上还没有动静。
: 应该没问题吧。
B*l
6 楼
看你什么抗体， cell signal一般建议BSA， sigma 一般建议milk， SC都是milk， 我
一般懒都直接用milk， 个别background 比较高， 别的一般无所谓， 就incubate 在
blocking buffer 里面， milk 也好， bsa 也好， 和这些关系没有那么大， 主要磷
酸化的是sample为主， 你sample处理／冻融上面处理不当， 或者本身表达就就问题的
话， bsa界的hermes 也木有用阿
一般懒都直接用milk， 个别background 比较高， 别的一般无所谓， 就incubate 在
blocking buffer 里面， milk 也好， bsa 也好， 和这些关系没有那么大， 主要磷
酸化的是sample为主， 你sample处理／冻融上面处理不当， 或者本身表达就就问题的
话， bsa界的hermes 也木有用阿
s*y
7 楼
至少买过30个磷酸化抗体。牛奶和BSA都用过，一般都没啥问题
碰到过一个磷酸化抗体可以和结合牛奶里面的蛋白，杂出来一张黑膜。这种情况下只能
用BSA
【在 r******k 的大作中提到】
: 各位大神 请教个问题，
: 小弟要要check一个蛋白的磷酸化水平，
: 1. block 膜的时候 能用5%的milk 吗？ 还是必须要用5%的BSA？
: 2. incubate 一抗的时候 还需要dilute在5%的BSA吗？ 还是直接TBST也行？
: 多谢！！
碰到过一个磷酸化抗体可以和结合牛奶里面的蛋白，杂出来一张黑膜。这种情况下只能
用BSA
【在 r******k 的大作中提到】
: 各位大神 请教个问题，
: 小弟要要check一个蛋白的磷酸化水平，
: 1. block 膜的时候 能用5%的milk 吗？ 还是必须要用5%的BSA？
: 2. incubate 一抗的时候 还需要dilute在5%的BSA吗？ 还是直接TBST也行？
: 多谢！！
s*i
8 楼
pTyr的抗体必须用bsa block 和 bsa做1抗buffer, 二抗可以用milk
其他的，特别是特异蛋白特异位点的抗体，可以用milk，milk的背景低
★ 发自iPhone App: ChineseWeb 8.7
【在 r******k 的大作中提到】
: 各位大神 请教个问题，
: 小弟要要check一个蛋白的磷酸化水平，
: 1. block 膜的时候 能用5%的milk 吗？ 还是必须要用5%的BSA？
: 2. incubate 一抗的时候 还需要dilute在5%的BSA吗？ 还是直接TBST也行？
: 多谢！！
其他的，特别是特异蛋白特异位点的抗体，可以用milk，milk的背景低
★ 发自iPhone App: ChineseWeb 8.7
【在 r******k 的大作中提到】
: 各位大神 请教个问题，
: 小弟要要check一个蛋白的磷酸化水平，
: 1. block 膜的时候 能用5%的milk 吗？ 还是必须要用5%的BSA？
: 2. incubate 一抗的时候 还需要dilute在5%的BSA吗？ 还是直接TBST也行？
: 多谢！！
r*k
9 楼
好 谢谢
我做了 我的抗体是识别特异位点的一个tyr磷酸化抗体，用牛奶block， 然后直接
tbst incubate一抗，没啥问题。
【在 s*****i 的大作中提到】
: pTyr的抗体必须用bsa block 和 bsa做1抗buffer, 二抗可以用milk
: 其他的，特别是特异蛋白特异位点的抗体，可以用milk，milk的背景低
:
: ★ 发自iPhone App: ChineseWeb 8.7
我做了 我的抗体是识别特异位点的一个tyr磷酸化抗体，用牛奶block， 然后直接
tbst incubate一抗，没啥问题。
【在 s*****i 的大作中提到】
: pTyr的抗体必须用bsa block 和 bsa做1抗buffer, 二抗可以用milk
: 其他的，特别是特异蛋白特异位点的抗体，可以用milk，milk的背景低
:
: ★ 发自iPhone App: ChineseWeb 8.7
g*5
10 楼
would you please talk about "sample处理／冻融上面处理"? thanks
在
【在 B*****l 的大作中提到】
: 看你什么抗体， cell signal一般建议BSA， sigma 一般建议milk， SC都是milk， 我
: 一般懒都直接用milk， 个别background 比较高， 别的一般无所谓， 就incubate 在
: blocking buffer 里面， milk 也好， bsa 也好， 和这些关系没有那么大， 主要磷
: 酸化的是sample为主， 你sample处理／冻融上面处理不当， 或者本身表达就就问题的
: 话， bsa界的hermes 也木有用阿
在
【在 B*****l 的大作中提到】
: 看你什么抗体， cell signal一般建议BSA， sigma 一般建议milk， SC都是milk， 我
: 一般懒都直接用milk， 个别background 比较高， 别的一般无所谓， 就incubate 在
: blocking buffer 里面， milk 也好， bsa 也好， 和这些关系没有那么大， 主要磷
: 酸化的是sample为主， 你sample处理／冻融上面处理不当， 或者本身表达就就问题的
: 话， bsa界的hermes 也木有用阿
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