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大牛们,请推荐个提rna的kit,要做Rna-seq
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大牛们,请推荐个提rna的kit,要做Rna-seq# Biology - 生物学
g*l
1
rt.
现在美国,请问从F1转换到F2需要多长时间?
不太想回国再过来,在美国办这种身份转换需要哪些文件呢?通过难度大么?
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h*d
2
Fifi肚子最小面,像人小腹那里有两‘陀’像很肥的肉,用手伸去摸会有点垂,侧卧的
时候能鼓出来。。。以前爸爸一直嘲笑Fifi胖。今天特地摸了一下Coco小腹,完全没有。
请教一下这个正常吗,希望不是病了
两个猫都11个月左右,10磅出头
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B8
3
最近准备做rnaseq看基因表达的差别,
小鼠的组织样品。
请问各位哪个kit比较好用?
Qiagen的Rneasy kit如何?
提完rna是否还需要dnase处理?还是直接就可以做library了?
谢谢!
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y*g
4
1-4个月不等。转的过程中可以合法呆在美国。
难度不大。 要银行证明,539表,护照,I20等,去学校ISS一问就知道,反正你也是通
过学校办的。
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i*e
5
母猫么?该不会是mimi吧。。。我瞎说的,没有根据
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l*e
6
Rneasy Kits worked fine for us.
You do need to remove DNA as they can be incorporated into the sequencing
library.
However, DO NOT perform the standard on-column DNase treatment as it lead to
dramatic sample loss and often times not complete. I would just Dnase the
sample after purification and heat inactivate.
Please note that the regular Rneasy columns do not work well with RNA <
200bp. Therefore, if you want to look at small RNA, you might need a special
kit.
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z*e
7
公猫?
KC了?
据说是普遍现象?
我家Fluffy肚子上也垂下一坨肉。。
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D*a
8
找哪个facility做就问他们不就行了
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h*d
9
是母猫,kc了
肚子最下面,但Coco就一点没有,普遍现象我就放心了,最近Fifi体重已经反超过Coco
了,八成就是那陀肉。。
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B8
10
facility说的很不清楚。

【在 D*a 的大作中提到】
: 找哪个facility做就问他们不就行了
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m*n
11
我猫猫也有,就是靠近neuter的地方,医生跟我说要换猫粮,加控制饮食。

Coco

【在 h**********d 的大作中提到】
: 是母猫,kc了
: 肚子最下面,但Coco就一点没有,普遍现象我就放心了,最近Fifi体重已经反超过Coco
: 了,八成就是那陀肉。。

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n*w
12
We work with tiny mouse tissues and we use RNeasy plus micro kit.
Just followed the instructions and worked fine for RNA-seq.
Qiagen has so many kits designed for so many tissue types. Check their
website.
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c*t
13
我们家的可真苗条。。上次KC医生说她实际10个月了,体重也不过7磅多
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v*a
14

The RNeasy Plus Mini Kit purifies up to 100 μg total RNA (>200 nt) from a
single extraction with efficient gDNA removal.
RNAs over 200nt are eligible for RNA-seq?

【在 n***w 的大作中提到】
: We work with tiny mouse tissues and we use RNeasy plus micro kit.
: Just followed the instructions and worked fine for RNA-seq.
: Qiagen has so many kits designed for so many tissue types. Check their
: website.

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h*d
15
好吧,Fifi吃的是比coco要多,她不挑食,sign,再过一个月一岁了就开始控制

【在 m*******n 的大作中提到】
: 我猫猫也有,就是靠近neuter的地方,医生跟我说要换猫粮,加控制饮食。
:
: Coco

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B8
16
提完RNA后,做dnase treatment吗?
kit说一般不需要,
网上一些信息和前面的一个大侠都做的。
谢谢。

【在 n***w 的大作中提到】
: We work with tiny mouse tissues and we use RNeasy plus micro kit.
: Just followed the instructions and worked fine for RNA-seq.
: Qiagen has so many kits designed for so many tissue types. Check their
: website.

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y*o
17
嗯,应该就是有点点小胖……

【在 h**********d 的大作中提到】
: 好吧,Fifi吃的是比coco要多,她不挑食,sign,再过一个月一岁了就开始控制
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D*a
18
那就问问都给谁做过,过去问问。

【在 B8 的大作中提到】
: facility说的很不清楚。
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B8
19
这个KIT主要是不能bind小的RNA

【在 v********a 的大作中提到】
:
: The RNeasy Plus Mini Kit purifies up to 100 μg total RNA (>200 nt) from a
: single extraction with efficient gDNA removal.
: RNAs over 200nt are eligible for RNA-seq?

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i*0
20
如果不是微量的组织的话,可以考虑用,Tri-reagent.
RNA 抽提完了以后,跑个 胶看看有没有明显的降解,如果没有的话,可以直接交给
facility了。
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B8
21
谢谢,我们自己做library的,
给facility都是马上就可以测序的。

【在 i*********0 的大作中提到】
: 如果不是微量的组织的话,可以考虑用,Tri-reagent.
: RNA 抽提完了以后,跑个 胶看看有没有明显的降解,如果没有的话,可以直接交给
: facility了。

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a*n
22
如果RNA量大的话, trizol 》DNase I treatment 》Qiagen RNeasy Mini Kit
purify。 量小的话,RNeasy plus micro kit或者Life Arcturus Picopure RNA
isolation Kit, on column DNase digestion。不要直接用trizol提的RNA做library
,纯度不够。
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B8
23
我们量小,那就准备用rneasy micro kit.
前面一位大侠不建议做on column digestion. 想知道有没办法看一下是否把DNA除了?
我们可以跑bioanalyzer.
谢谢

library

【在 a******n 的大作中提到】
: 如果RNA量大的话, trizol 》DNase I treatment 》Qiagen RNeasy Mini Kit
: purify。 量小的话,RNeasy plus micro kit或者Life Arcturus Picopure RNA
: isolation Kit, on column DNase digestion。不要直接用trizol提的RNA做library
: ,纯度不够。

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