求助： Make humanized mice# Biology - 生物学
a*l
1 楼
准备用crispr技术在小鼠knock in人的基因。请教大牛：donor vector里人的基因仅有
cDNA序列可以吗？需要加polyA signal吗？需要加3’UTR吗？多谢！
cDNA序列可以吗？需要加polyA signal吗？需要加3’UTR吗？多谢！
v*m
2 楼
转录翻译机器元件难道不是得在小鼠中有功能的才行？
我觉得看插入的位置，如果该插入点的老鼠基因组中已经有了这些元件，那没必要。如
果没有，转录翻译如何进行？
【在 a****l 的大作中提到】
: 准备用crispr技术在小鼠knock in人的基因。请教大牛：donor vector里人的基因仅有
: cDNA序列可以吗？需要加polyA signal吗？需要加3’UTR吗？多谢！
我觉得看插入的位置，如果该插入点的老鼠基因组中已经有了这些元件，那没必要。如
果没有，转录翻译如何进行？
【在 a****l 的大作中提到】
: 准备用crispr技术在小鼠knock in人的基因。请教大牛：donor vector里人的基因仅有
: cDNA序列可以吗？需要加polyA signal吗？需要加3’UTR吗？多谢！
a*l
3 楼
谢谢！是准备插入在小鼠同源基因的ATG之后。小鼠基因自身会因为插入外源基因造成
frame shift。
frame shift。
d*n
4 楼
双手沾满小鼠的鲜血，还期待小鼠人性？
v*m
5 楼
大问题不会有，老鼠原蛋白的转录翻译profile应该会继续对插入基因有效。
留着原先老鼠的基因，阅读框内的序列可能太长，用原先的poly A.转录效率可能有些
影响。
【在 a****l 的大作中提到】
: 谢谢！是准备插入在小鼠同源基因的ATG之后。小鼠基因自身会因为插入外源基因造成
: frame shift。
留着原先老鼠的基因，阅读框内的序列可能太长，用原先的poly A.转录效率可能有些
影响。
【在 a****l 的大作中提到】
: 谢谢！是准备插入在小鼠同源基因的ATG之后。小鼠基因自身会因为插入外源基因造成
: frame shift。
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