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请教冰冻切片组织中如何避免裂痕的问题
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请教冰冻切片组织中如何避免裂痕的问题# Biology - 生物学
h*g
1
我在切胚胎脑组织,很小。我是先4%PFA固定overnight,然后PBS wash 3 times, then
put in 30%sucrose overnight。Then put the tissue in OCT. Then quick freeze
by putting the cryomold in isopentane with dry ice.Cryosection at -20 degree
, cut 10um.切过后发现组织中总有裂痕,空洞,有时象是被撕开一样。请问怎么避免
这类问题?谢谢。
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D*a
2
你确定你切的没问题么,感觉这么小不应该出这种情况啊,刀片角度不对或者过快过慢
也有可能这样
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c*r
3
温度降低一点试试
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z*6
4
包的时候确定没有泡泡吧?... 这个会导致有洞...
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H*N
5
切厚点,14-16 um
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