a*7
2 楼
板上的朋友们一定记得我去年刚来时,奔的我家的侧院,一片荒地,种了一年的玫瑰,
果树等等等等,这个春天终于有些颜色了,上片片了
今年准备在这里弄个玫瑰园
果树等等等等,这个春天终于有些颜色了,上片片了
今年准备在这里弄个玫瑰园
M*C
3 楼
不知道在大家手上work的怎么样?买过好几种抗体。
在我手里,trouble很多啊,要么一堆杂带,没有特异带;要么背景很脏很黑,也看不
到特异带;要么带是白色的,并且结果也不是想要的。而类似的问题,我handle其他公
司的,失败率没这么高。测同一个蛋白,abcam的很好用,clean,结果正确。cell sig
的乱七八糟。trouble呢,公司都宣称在他们手里好用。
他们的western protocol是这样的,很不一般,大家觉得合理吗
Block: 5% Milk TBST (他们说不能用BSA)
一抗: 5% BSA TBST 稀释
二抗: 5% Milk TBST
平时我们要么是block/一抗都BSA. 要么是牛奶block, 一抗直接在TBST. 二抗从来只
是TBST. work的抗体总是work了。
而cell sig 的, 有的抗体,即使完全按照他们的说法,甚至他们寄来 positive ctrl
, 也不work, 而他们的positive ctrl, 我用 abcam的抗体轻易检测出。 abcam 的
问题是现在卖的太贵。而cell sig的花了钱不work很不爽。
还有,每次troubleshooting他们几乎都是要颠覆别人所有的东西,我们用PVDF,他们说
要用nitrocellulose; 我们用AP二抗,他们说要用 HRP;我们用ECF,他们说用ECL. 而
事实上我们多年一直用PVDF AP ECF , 无数抗体都是work的。 糟糕的是, 即使你改
用 HRP,ECL,并不解决问题。
他们的抗体完全不像我曾经印象中的那么权威。 他们的的技术服务总是当别人不会做
western的样子,并且要颠覆别人work多年的方法,全部照他们的。浪费很多时间
trouble shooting。 而santa cruz我们一说不work,经常二话不说寄另外一个来。
在我手里,trouble很多啊,要么一堆杂带,没有特异带;要么背景很脏很黑,也看不
到特异带;要么带是白色的,并且结果也不是想要的。而类似的问题,我handle其他公
司的,失败率没这么高。测同一个蛋白,abcam的很好用,clean,结果正确。cell sig
的乱七八糟。trouble呢,公司都宣称在他们手里好用。
他们的western protocol是这样的,很不一般,大家觉得合理吗
Block: 5% Milk TBST (他们说不能用BSA)
一抗: 5% BSA TBST 稀释
二抗: 5% Milk TBST
平时我们要么是block/一抗都BSA. 要么是牛奶block, 一抗直接在TBST. 二抗从来只
是TBST. work的抗体总是work了。
而cell sig 的, 有的抗体,即使完全按照他们的说法,甚至他们寄来 positive ctrl
, 也不work, 而他们的positive ctrl, 我用 abcam的抗体轻易检测出。 abcam 的
问题是现在卖的太贵。而cell sig的花了钱不work很不爽。
还有,每次troubleshooting他们几乎都是要颠覆别人所有的东西,我们用PVDF,他们说
要用nitrocellulose; 我们用AP二抗,他们说要用 HRP;我们用ECF,他们说用ECL. 而
事实上我们多年一直用PVDF AP ECF , 无数抗体都是work的。 糟糕的是, 即使你改
用 HRP,ECL,并不解决问题。
他们的抗体完全不像我曾经印象中的那么权威。 他们的的技术服务总是当别人不会做
western的样子,并且要颠覆别人work多年的方法,全部照他们的。浪费很多时间
trouble shooting。 而santa cruz我们一说不work,经常二话不说寄另外一个来。
H*5
4 楼
哈哈,是EB1来看笑话了吗
大概就是以前一直EB2比EB3快两三年,所以世界各国人民能申EB2就申EB2(要求硕士学
位或5年工作经验等要求)。
由于中国人的个体都很优秀,申EB2的人太多EB3太少,从去年起,EB3C的排期飞速前进
,甚至超过EB2C两三年。
这时美国移民律师协会发信说,可以给EB2C的人申请另一个EB3的I-140,同时保留EB2
的I-140,于是EB2C不少人就开始这样做。
EB3C本来要等“六七年”,在排期大幅前进后只要等“两年左右”,但EB2C降级为EB3
的人数会使得“两年左右”变长,于是EB3C就开骂EB2C了。
大概就是以前一直EB2比EB3快两三年,所以世界各国人民能申EB2就申EB2(要求硕士学
位或5年工作经验等要求)。
由于中国人的个体都很优秀,申EB2的人太多EB3太少,从去年起,EB3C的排期飞速前进
,甚至超过EB2C两三年。
这时美国移民律师协会发信说,可以给EB2C的人申请另一个EB3的I-140,同时保留EB2
的I-140,于是EB2C不少人就开始这样做。
EB3C本来要等“六七年”,在排期大幅前进后只要等“两年左右”,但EB2C降级为EB3
的人数会使得“两年左右”变长,于是EB3C就开骂EB2C了。
n*1
5 楼
好漂亮。第二张是牡丹么?话说这是什么地方啊,坡度这么大?
e*s
6 楼
我最近也有两个从Cell signaling抗体不好.
我一直蛮喜欢Cell signaling抗体的,总体非常Reliable.
不知道怎么,最近买了两个,一个Phospho抗体对Phosphorylated over un-
phosphorylated sample的选择性几乎没有。另一个,就是没有检测到我的蛋白。
sig
【在 M*******C 的大作中提到】
: 不知道在大家手上work的怎么样?买过好几种抗体。
: 在我手里,trouble很多啊,要么一堆杂带,没有特异带;要么背景很脏很黑,也看不
: 到特异带;要么带是白色的,并且结果也不是想要的。而类似的问题,我handle其他公
: 司的,失败率没这么高。测同一个蛋白,abcam的很好用,clean,结果正确。cell sig
: 的乱七八糟。trouble呢,公司都宣称在他们手里好用。
: 他们的western protocol是这样的,很不一般,大家觉得合理吗
: Block: 5% Milk TBST (他们说不能用BSA)
: 一抗: 5% BSA TBST 稀释
: 二抗: 5% Milk TBST
: 平时我们要么是block/一抗都BSA. 要么是牛奶block, 一抗直接在TBST. 二抗从来只
我一直蛮喜欢Cell signaling抗体的,总体非常Reliable.
不知道怎么,最近买了两个,一个Phospho抗体对Phosphorylated over un-
phosphorylated sample的选择性几乎没有。另一个,就是没有检测到我的蛋白。
sig
【在 M*******C 的大作中提到】
: 不知道在大家手上work的怎么样?买过好几种抗体。
: 在我手里,trouble很多啊,要么一堆杂带,没有特异带;要么背景很脏很黑,也看不
: 到特异带;要么带是白色的,并且结果也不是想要的。而类似的问题,我handle其他公
: 司的,失败率没这么高。测同一个蛋白,abcam的很好用,clean,结果正确。cell sig
: 的乱七八糟。trouble呢,公司都宣称在他们手里好用。
: 他们的western protocol是这样的,很不一般,大家觉得合理吗
: Block: 5% Milk TBST (他们说不能用BSA)
: 一抗: 5% BSA TBST 稀释
: 二抗: 5% Milk TBST
: 平时我们要么是block/一抗都BSA. 要么是牛奶block, 一抗直接在TBST. 二抗从来只
n*y
7 楼
因为eb3排期远快于eb2,不少eb2降级到eb3以求早绿或者早拿ead/ap。
于是,有个别sb不爽,开始各种吓唬,造谣,道德压制,最奇葩的就是跑去请愿。一两
个月前,他们说不能免perm降级,这样违法且缺德,当时也搞了个请愿,想禁止降级。
结果,事实证明,降级可行,残酷地现实狠狠抽了这群人的嘴巴。
现在,他们见阻挠降级不行,改了新的理由,说同时占两条队是fraud,又是一轮吓唬
,造谣,道德压制,又有了一个新的请愿。。。
包括很多eb3在内的人们都看不过去这几个内斗积极分子,纷纷出来抽他们嘴巴,这就
是事情经过。。
于是,有个别sb不爽,开始各种吓唬,造谣,道德压制,最奇葩的就是跑去请愿。一两
个月前,他们说不能免perm降级,这样违法且缺德,当时也搞了个请愿,想禁止降级。
结果,事实证明,降级可行,残酷地现实狠狠抽了这群人的嘴巴。
现在,他们见阻挠降级不行,改了新的理由,说同时占两条队是fraud,又是一轮吓唬
,造谣,道德压制,又有了一个新的请愿。。。
包括很多eb3在内的人们都看不过去这几个内斗积极分子,纷纷出来抽他们嘴巴,这就
是事情经过。。
w*m
8 楼
一看就是豪宅啊
H*5
10 楼
换个说法,EB1是超级联赛,EB2和EB3分别是甲乙级
本来在甲级踢球更好,所以大家都去,不行的再去踢乙级,如果在乙级踢得好,也可以
升级。
有个国家很奇怪,乙级竟然比甲级受到的优待更多,于是甲级球队纷纷降级,降级后的
排名在不少乙级球队的前面。而且如果哪天甲级受到的待遇更好,这些球队还能升级回
去,但普通的乙级就不行,于是乙级球队就开始骂这些降级的了。
本来在甲级踢球更好,所以大家都去,不行的再去踢乙级,如果在乙级踢得好,也可以
升级。
有个国家很奇怪,乙级竟然比甲级受到的优待更多,于是甲级球队纷纷降级,降级后的
排名在不少乙级球队的前面。而且如果哪天甲级受到的待遇更好,这些球队还能升级回
去,但普通的乙级就不行,于是乙级球队就开始骂这些降级的了。
M*C
12 楼
#9520 P-smad3, 这几年买过好多次,偶尔work,多数时候不work。
对了,他们的技术服务,总是叫你回答各种细节问题,完全无视别人用别的公司抗体可
以做出来,完全无视别人长期做各种抗体的western。
连cell lysate等方法。。。, 已经告诉他们,同样的sample,用abcam做出来了,他
们不管,还叫你sonication lysate之类。。
【在 e****s 的大作中提到】
: 我最近也有两个从Cell signaling抗体不好.
: 我一直蛮喜欢Cell signaling抗体的,总体非常Reliable.
: 不知道怎么,最近买了两个,一个Phospho抗体对Phosphorylated over un-
: phosphorylated sample的选择性几乎没有。另一个,就是没有检测到我的蛋白。
:
: sig
对了,他们的技术服务,总是叫你回答各种细节问题,完全无视别人用别的公司抗体可
以做出来,完全无视别人长期做各种抗体的western。
连cell lysate等方法。。。, 已经告诉他们,同样的sample,用abcam做出来了,他
们不管,还叫你sonication lysate之类。。
【在 e****s 的大作中提到】
: 我最近也有两个从Cell signaling抗体不好.
: 我一直蛮喜欢Cell signaling抗体的,总体非常Reliable.
: 不知道怎么,最近买了两个,一个Phospho抗体对Phosphorylated over un-
: phosphorylated sample的选择性几乎没有。另一个,就是没有检测到我的蛋白。
:
: sig
t*g
13 楼
你的总结真好,清晰简洁。语文肯定很好。
EB2
EB3
【在 H***5 的大作中提到】
: 哈哈,是EB1来看笑话了吗
: 大概就是以前一直EB2比EB3快两三年,所以世界各国人民能申EB2就申EB2(要求硕士学
: 位或5年工作经验等要求)。
: 由于中国人的个体都很优秀,申EB2的人太多EB3太少,从去年起,EB3C的排期飞速前进
: ,甚至超过EB2C两三年。
: 这时美国移民律师协会发信说,可以给EB2C的人申请另一个EB3的I-140,同时保留EB2
: 的I-140,于是EB2C不少人就开始这样做。
: EB3C本来要等“六七年”,在排期大幅前进后只要等“两年左右”,但EB2C降级为EB3
: 的人数会使得“两年左右”变长,于是EB3C就开骂EB2C了。
EB2
EB3
【在 H***5 的大作中提到】
: 哈哈,是EB1来看笑话了吗
: 大概就是以前一直EB2比EB3快两三年,所以世界各国人民能申EB2就申EB2(要求硕士学
: 位或5年工作经验等要求)。
: 由于中国人的个体都很优秀,申EB2的人太多EB3太少,从去年起,EB3C的排期飞速前进
: ,甚至超过EB2C两三年。
: 这时美国移民律师协会发信说,可以给EB2C的人申请另一个EB3的I-140,同时保留EB2
: 的I-140,于是EB2C不少人就开始这样做。
: EB3C本来要等“六七年”,在排期大幅前进后只要等“两年左右”,但EB2C降级为EB3
: 的人数会使得“两年左右”变长,于是EB3C就开骂EB2C了。
s*o
15 楼
我用的感觉也不好,买了一个抗体,非特异性条带紧挨着目的条带,然后我又订了他们
该蛋白另外一个货号的抗体,结果给的是分子量差不多大的非特异条带。
sig
【在 M*******C 的大作中提到】
: 不知道在大家手上work的怎么样?买过好几种抗体。
: 在我手里,trouble很多啊,要么一堆杂带,没有特异带;要么背景很脏很黑,也看不
: 到特异带;要么带是白色的,并且结果也不是想要的。而类似的问题,我handle其他公
: 司的,失败率没这么高。测同一个蛋白,abcam的很好用,clean,结果正确。cell sig
: 的乱七八糟。trouble呢,公司都宣称在他们手里好用。
: 他们的western protocol是这样的,很不一般,大家觉得合理吗
: Block: 5% Milk TBST (他们说不能用BSA)
: 一抗: 5% BSA TBST 稀释
: 二抗: 5% Milk TBST
: 平时我们要么是block/一抗都BSA. 要么是牛奶block, 一抗直接在TBST. 二抗从来只
该蛋白另外一个货号的抗体,结果给的是分子量差不多大的非特异条带。
sig
【在 M*******C 的大作中提到】
: 不知道在大家手上work的怎么样?买过好几种抗体。
: 在我手里,trouble很多啊,要么一堆杂带,没有特异带;要么背景很脏很黑,也看不
: 到特异带;要么带是白色的,并且结果也不是想要的。而类似的问题,我handle其他公
: 司的,失败率没这么高。测同一个蛋白,abcam的很好用,clean,结果正确。cell sig
: 的乱七八糟。trouble呢,公司都宣称在他们手里好用。
: 他们的western protocol是这样的,很不一般,大家觉得合理吗
: Block: 5% Milk TBST (他们说不能用BSA)
: 一抗: 5% BSA TBST 稀释
: 二抗: 5% Milk TBST
: 平时我们要么是block/一抗都BSA. 要么是牛奶block, 一抗直接在TBST. 二抗从来只
H*5
16 楼
b*7
17 楼
太有钱了。
s*y
18 楼
我比较喜欢Santa Cruz, 虽然他们的产品质量很差,但是你只要吱一声说某某批产品不
好使,他们立刻会光速的给你送另外一批过来。根本就不会这么折腾你。
Cell Signaling 以及Sigma 都有这个坏毛病,就是你如果说东西不好用,他们不折磨
你个一两个月,是不会给你退换的。有一次我买了一个Sigma 的试剂,不好使就和他们
抱怨。然后他们源源不断的让我送各种证据,各种照片,各种Western blot, 我忍了两
个多星期,在第四次和他们通话的时候他们又要我做更多的对照试验,我终于忍不住就
失控了,骂他们说,这个实验我做了十几年了,试剂到底好不好使我是知道的,我买了
你们公司那么多产品,你看光是上个月我就买了3,4千的东西,我如果是想骗你们的钱
的话用得着等这么久么?骂了一通之后我说,你再不给我换的话我要和你们上司说。于
是他们就软了。
【在 M*******C 的大作中提到】
: #9520 P-smad3, 这几年买过好多次,偶尔work,多数时候不work。
: 对了,他们的技术服务,总是叫你回答各种细节问题,完全无视别人用别的公司抗体可
: 以做出来,完全无视别人长期做各种抗体的western。
: 连cell lysate等方法。。。, 已经告诉他们,同样的sample,用abcam做出来了,他
: 们不管,还叫你sonication lysate之类。。
好使,他们立刻会光速的给你送另外一批过来。根本就不会这么折腾你。
Cell Signaling 以及Sigma 都有这个坏毛病,就是你如果说东西不好用,他们不折磨
你个一两个月,是不会给你退换的。有一次我买了一个Sigma 的试剂,不好使就和他们
抱怨。然后他们源源不断的让我送各种证据,各种照片,各种Western blot, 我忍了两
个多星期,在第四次和他们通话的时候他们又要我做更多的对照试验,我终于忍不住就
失控了,骂他们说,这个实验我做了十几年了,试剂到底好不好使我是知道的,我买了
你们公司那么多产品,你看光是上个月我就买了3,4千的东西,我如果是想骗你们的钱
的话用得着等这么久么?骂了一通之后我说,你再不给我换的话我要和你们上司说。于
是他们就软了。
【在 M*******C 的大作中提到】
: #9520 P-smad3, 这几年买过好多次,偶尔work,多数时候不work。
: 对了,他们的技术服务,总是叫你回答各种细节问题,完全无视别人用别的公司抗体可
: 以做出来,完全无视别人长期做各种抗体的western。
: 连cell lysate等方法。。。, 已经告诉他们,同样的sample,用abcam做出来了,他
: 们不管,还叫你sonication lysate之类。。
h*y
21 楼
cell signaling的抗体大部分还是不错滴,重复性比较好。
Santa Cruz质量实在不敢恭维,您可多花钱也不远多费时间,不过实在找不到抗体,就
会试他们家的,种类还是多,换货的确很麻利。
Santa Cruz质量实在不敢恭维,您可多花钱也不远多费时间,不过实在找不到抗体,就
会试他们家的,种类还是多,换货的确很麻利。
j*1
24 楼
直接说那些抗体在什么样品上不work比抒情半天更有意义吧?
g*y
25 楼
赞。太能干了.顺便赞豪宅
r*k
26 楼
没错 经常出毛病 而且只是在一些细胞里面work。 而且要不就只work在human细胞。。
。
。
p*y
27 楼
太能干了。!
r*n
29 楼
漂亮。好大的院子。狗狗是gsd吗?
r*n
30 楼
是要新辟一片玫瑰园吗?一定先上fence, 看你这大house 在山里,像有鹿出没的地方
。鹿最爱吃玫瑰嫩叶和花苞了,我的惨痛教训
。鹿最爱吃玫瑰嫩叶和花苞了,我的惨痛教训
r*s
44 楼
地大,阳光多,羡慕!赞能干!
m*e
45 楼
豪宅
这张看着很舒服
这张看着很舒服
y*8
46 楼
好出彩啊,房子花花狗狗都很豪很靓很帅!
你的城堡菜园子咋样了?
你的城堡菜园子咋样了?
r*7
51 楼
Nice pic
k*s
52 楼
好漂亮的花,好豪的宅
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