D*H
2 楼
http://www.moley.com/
这机器人,只要把橱柜换成hood那就可以做大多数的分子实验了吧?
这机器人,只要把橱柜换成hood那就可以做大多数的分子实验了吧?
b*e
4 楼
完全有希望,而且也是趋势,现在靠培养低层次的从业人员的模式已经破产,以后只需
要设计课题的就可以了,还有的工作是软件设计
要设计课题的就可以了,还有的工作是软件设计
j*n
6 楼
千老也不要太悲观
很多看似简单的步骤 机器人反而搞不定
如切胶回收 是目前做克隆自动化的瓶颈之一
很多看似简单的步骤 机器人反而搞不定
如切胶回收 是目前做克隆自动化的瓶颈之一
n*d
11 楼
大肠菌神教克隆大法:
参照in-fusion克隆的原理设计引物,不用买in-fusion试剂盒。
将vector和insert分别pcr出来,混合,用dpnI消化一下去掉原载体,接着无需其他操
作。然后trans的dh5a转化,
转化时请祈祷大肠杆菌神能顺利将这两个片段重组!
然后,colony pcr,菌神将保佑你得到正确的阳性克隆。
:不切胶怎么做克隆?
:真心请教 可以解决困恼我们实验室好几年的难题
参照in-fusion克隆的原理设计引物,不用买in-fusion试剂盒。
将vector和insert分别pcr出来,混合,用dpnI消化一下去掉原载体,接着无需其他操
作。然后trans的dh5a转化,
转化时请祈祷大肠杆菌神能顺利将这两个片段重组!
然后,colony pcr,菌神将保佑你得到正确的阳性克隆。
:不切胶怎么做克隆?
:真心请教 可以解决困恼我们实验室好几年的难题
S*5
12 楼
I NEED TO TAKE A SHOWER AND BE FRESH..
d*n
16 楼
身材不错
【在 D***H 的大作中提到】
: http://www.moley.com/
: 这机器人,只要把橱柜换成hood那就可以做大多数的分子实验了吧?
【在 D***H 的大作中提到】
: http://www.moley.com/
: 这机器人,只要把橱柜换成hood那就可以做大多数的分子实验了吧?
j*n
17 楼
隔壁实验室也有人这么操作 以前一直觉得大部分cloning host都是recA敲除,重组的
效率会很低
这个最多可以搞几个片段?我们实验室的一般都会有3个及以上片段
另外就是PCR,如果不是单一条带,克隆的准确性有多高?尤其是有好几个片段的情况下
【在 n*******d 的大作中提到】
: 大肠菌神教克隆大法:
: 参照in-fusion克隆的原理设计引物,不用买in-fusion试剂盒。
: 将vector和insert分别pcr出来,混合,用dpnI消化一下去掉原载体,接着无需其他操
: 作。然后trans的dh5a转化,
: 转化时请祈祷大肠杆菌神能顺利将这两个片段重组!
: 然后,colony pcr,菌神将保佑你得到正确的阳性克隆。
:
: :不切胶怎么做克隆?
: :真心请教 可以解决困恼我们实验室好几年的难题
效率会很低
这个最多可以搞几个片段?我们实验室的一般都会有3个及以上片段
另外就是PCR,如果不是单一条带,克隆的准确性有多高?尤其是有好几个片段的情况下
【在 n*******d 的大作中提到】
: 大肠菌神教克隆大法:
: 参照in-fusion克隆的原理设计引物,不用买in-fusion试剂盒。
: 将vector和insert分别pcr出来,混合,用dpnI消化一下去掉原载体,接着无需其他操
: 作。然后trans的dh5a转化,
: 转化时请祈祷大肠杆菌神能顺利将这两个片段重组!
: 然后,colony pcr,菌神将保佑你得到正确的阳性克隆。
:
: :不切胶怎么做克隆?
: :真心请教 可以解决困恼我们实验室好几年的难题
n*d
19 楼
能p的很亮就基本都能做出来,本教教徒最长插入八九k的片段
可以同时插入好几个片段,可能insert越多,越难?本教教徒貌似有人做过三个片段
确实不是每个牌子的菌都能出,不同公司的菌敲得基因可能有差别,目前,目前本教采
用trans5a
只有是高保真的酶应该都可以吧,载体一般也没多大,30来个循环突变还可以吧?p载
体时模板浓度我一般只加200pg,这样dpnI能切干净
要么你还酶切胶回收,主要是保证你转化的片段是线性的就可以
欢迎入我教自娱自乐
:这方法成功率怎么样?
:【 在 nodvodnod (大肠菌神教) 的大作中提到: 】
可以同时插入好几个片段,可能insert越多,越难?本教教徒貌似有人做过三个片段
确实不是每个牌子的菌都能出,不同公司的菌敲得基因可能有差别,目前,目前本教采
用trans5a
只有是高保真的酶应该都可以吧,载体一般也没多大,30来个循环突变还可以吧?p载
体时模板浓度我一般只加200pg,这样dpnI能切干净
要么你还酶切胶回收,主要是保证你转化的片段是线性的就可以
欢迎入我教自娱自乐
:这方法成功率怎么样?
:【 在 nodvodnod (大肠菌神教) 的大作中提到: 】
N*6
20 楼
8,9k片段??
怎么跟神话一样。。。我是totally out of touch 了。。
【在 n*******d 的大作中提到】
: 能p的很亮就基本都能做出来,本教教徒最长插入八九k的片段
: 可以同时插入好几个片段,可能insert越多,越难?本教教徒貌似有人做过三个片段
: 确实不是每个牌子的菌都能出,不同公司的菌敲得基因可能有差别,目前,目前本教采
: 用trans5a
: 只有是高保真的酶应该都可以吧,载体一般也没多大,30来个循环突变还可以吧?p载
: 体时模板浓度我一般只加200pg,这样dpnI能切干净
: 要么你还酶切胶回收,主要是保证你转化的片段是线性的就可以
: 欢迎入我教自娱自乐
:
: :这方法成功率怎么样?
怎么跟神话一样。。。我是totally out of touch 了。。
【在 n*******d 的大作中提到】
: 能p的很亮就基本都能做出来,本教教徒最长插入八九k的片段
: 可以同时插入好几个片段,可能insert越多,越难?本教教徒貌似有人做过三个片段
: 确实不是每个牌子的菌都能出,不同公司的菌敲得基因可能有差别,目前,目前本教采
: 用trans5a
: 只有是高保真的酶应该都可以吧,载体一般也没多大,30来个循环突变还可以吧?p载
: 体时模板浓度我一般只加200pg,这样dpnI能切干净
: 要么你还酶切胶回收,主要是保证你转化的片段是线性的就可以
: 欢迎入我教自娱自乐
:
: :这方法成功率怎么样?
n*7
21 楼
也不错,蛋糕做大了的话,钱老以后就是现在的PI了
设计解释实验就好
设计解释实验就好
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