有没有一种kit可以提取纯化细胞上清液中的蛋白，谢谢！# Biology - 生物学
n*y
1 楼
c*h
2 楼
交485时，需要交工资单和tax return表吗？
工资单不再是Pay-Check, 是电子pay-Stubs 可以吗？
谢谢。
工资单不再是Pay-Check, 是电子pay-Stubs 可以吗？
谢谢。
g*n
3 楼
主席：
前天，（八月一日）我第四次同全体职工一块，听了关于林彪反党反革命集团阴谋
叛乱的罪证，和关于陈伯达反共份子、托派、叛徒、特务、修正主义份子的历史材料，
使我更加感到，如果不是文化大革命和广大深入的群众运动这面无比巨大的照妖镜，这
样迅速地把这帮牛鬼蛇神的原形显照出来，特别是如果不是主席这样从他们的世界观以
及他们的政治观点和阴谋活动，及时地查觉出他们的反动本质和极大的危害性，并迅速
地把他们暴露于光天化日之下，如果一旦他们完全掌握了党和国家的最高权力，那不但
我们的社会主义祖国会变到资本主义复辟，而且会使我们的国家重新沦入半殖民地的地
步，更不知会有多少人头落地。没有疑问的，那时，革命的人民和真正的共产党人最终
会起来把他们打倒，恢复无产阶级专政和社会主义制度，但是这要经过多长的痛苦的历
史反复啊！言念及此，真是不寒而栗。伟大的无产阶级文化大革命，在打倒了刘少奇反
革命的资产阶级司令部之后，又打倒了林彪、陈伯达这个反革命集团，再一次为党和国
家消除了最大的危险，使我不禁欢呼文化大革命的伟大胜利，毛泽东思想的伟大胜利。
对于林彪和陈伯达，我没有什么重要材料可揭发，特别是对于他们的历史我一无所
知，只能回忆一下平时对他们的感觉。
对林彪，我过去觉得他很会打仗，我不相信什么百胜将军，不打败仗的将军是没有
的，事实上他也不是每战必胜的，但认为他毕竟是一个军事能手。他的沉默寡言，我也
觉得是一个长处。在历史上，我知道他犯了两个错误，一次是在长征时，他同彭德怀搞
在一块，反对毛主席的领导，他历来标榜自己是反对彭德怀的，但在这样非常困难的关
头，却同彭德怀结成同盟，搞秘密串连，如果没有主席的威望和坚强的领导，不知会成
什么局面。再一次是抗美援朝，这也是一个严重的政治关头，他又出面反对主席的极端
重要的政治决策，并且拒绝到朝鲜作战，按说他是比彭德怀要适当的人选，而他竟拒绝
了，在实质上说，他是怕美国，不相信会打败美帝，不相信自己的正义立场和自己的力
量。这两件事，一直到八届十一中全会，在大家的自我批评的空气中，他才轻描淡写地
说了一下。
在全国解放后，我从一些事情中，逐渐觉得他是一个怀有嫉妒心和不大容人的人。
这我是从他对罗荣桓、刘伯承等同志的态度中看出的。刘伯承同志在军事学院的教学方
针中是有缺点和错误的，批判是应该的，但是林彪和彭德怀一块，对刘的批评不是与人
为善的，林在军委扩大会议上的讲话更是声色俱厉的，他们甚至说刘在二野没起什么作
用，似乎只有我在那里起作用，当时我曾为此说过，没有那样能够很好合作的司令员，
我这个政治委员也起不了什么作用的（我记得在常委也说过），对我这个态度，林彪当
然是不高兴的。罗荣桓同志同林彪是老战友，按说他们应该是很好的，罗荣桓同志为人
的朴实、诚恳和厚道，是大家所知道的，罗在干部中是很有威信的，林彪就说过，四野
干部有事都找罗，不找他。记不得是在一九五几年，罗荣桓同志曾指出林彪在宣传毛泽
东思想中，只强调老三篇，是把毛泽东思想庸俗化，林彪非常不高兴，从此对罗的关系
很坏。至于对贺龙的关系，大家是知道的。
对于罗瑞卿问题的处理，我是有错误的。在罗瑞卿问题出来前，我一直认为罗瑞卿
同林彪的关系是不会坏的，我一直觉得罗是林的老部下，罗当总长又是林推荐的，应该
没有问题，所以，当一九六六年初（一九六五年十二月）林彪提出罗瑞卿问题时，性质
是那样严重，我的感觉是很突然的。而在叶群向我叙述罗瑞卿如何反对林彪，如何企图
夺权时，又夹着一些罗如何轻视我的话，我听了并不舒服，我总觉得其中包含了一些个
人的东西，在方式上多少带一些突然袭击的性质，这多少影响我在处理罗的问题犯下那
样不容宽恕的错误。
对于林彪高举毛泽东思想伟大红旗，现在看来，他的确是为的打着红旗反红旗，是
准备夺权、颠覆无产阶级专政、复辟资本主义的步骤，但是过去我一直认为他抓得对，
抓得好，比我好得多。我过去的最大错误之一，就是没有高举毛泽东思想的伟大红旗。
但是，过去在两点上我一直是不同意的，一是林彪只强调老三篇，多次说只要老三篇就
够用了，我认为毛泽东思想是在一切领域中全面的发展了马克思列宁主义，只讲老三篇
，不从一切领域中阐述和运用毛泽东思想，就等于贬低毛泽东思想，把毛泽东思想庸俗
化；一是总感觉林彪的提法是把毛泽东思想同马列主义割裂开来，这同样是贬低了毛泽
东思想的意义，特别是损害了毛泽东思想在国际共产主义运动和反对国际修正主义运动
中的作用，我从阿尔巴尼亚同志的态度了解到这一点，我是赞成强调毛泽东思想对于马
列主义的继承、捍卫和发展作用的。
对于军队建设，我过去一直肯定林彪在这方面的作用。过去我只觉得他在强调人的
决定因素的时候，忽略了军事技术和战术的训练。林彪多次说，只要人不怕死就会打胜
仗，这是正确的，又是片面的。在文化大革命中，我见到"毛主席缔造的、林副主席直
接指挥的"这样的提法，觉得有点刺眼，只觉得这是提高林彪威信的提法，不敢有别的
想法，现在原形毕露，才恍然大悟了。
对于陈伯达，他的历史我一无所知，甚至在延安写的三民主义概论我也不知道。我
对陈的印象是，这个人很自负，很虚伪，从来没有自我批评。他会写东西，我从来没有
听到他赞扬过别人写的好东西。对于能写的别人，他是嫉妒的，例如对胡乔木。他经常
的口头禅是"我是个书生，不行"，这就是他唯一的自我批评。他看不起没有他参与过的
文章或文件。如果他提出过什么不正确的意见，而后来被批判了，他不再说就是，从来
没听他说他在那件事搞错了。例如，他对工业七十条说过不好，他究竟对哪些不同意呢
？没听他说过。我只知道他在工业方面提出了两个主张，一个是搞托拉斯，一个是要搞
计件工资制。搞托拉斯，我们试验过，这意味着工业的更加集中，对于发挥地方积极性
的方针是有很大矛盾的。搞计件工资制（他为此专门在天津搞了个调查材料）是意味要
进一步地搞物质刺激，这肯定不如"计时工资与计件工资相结合"的制度好。以后他不说
这两个东西了。因为他提出七十条不好，中央曾指定他负责修改，后来我还催问过他几
次，他始终迟迟不搞，不知他葫芦里卖的什么药。写批判苏联修正主义一批文章时，由
于是在康生同志那一个班子写的，陈伯达一直没有兴趣参加。只在搞国际共产主义运动
二十五条时，由于指定他主持修改，才积极起来。总之，这类的事，还有不少，只是细
节记不起来了。陈伯达多年没有主持过什么工作，对他这样一个握笔杆子的人，总要原
谅些，所以我对他的印象只是一般的。至于他在主持文化大革命中的事情，特别是九届
二中全会的事情，只是在听了中央文件的传达后，才知道像他这样一个坏蛋，以往那种
表露不是什么奇怪的。
主席知道，林彪、陈伯达对我，是要置之死地而后快的。如果不是主席的保护，我
不知会变成什么样子的了。
我同全党全国人民一道，热情地庆祝在摧毁了刘少奇反革命资产阶级司令部之后，
又摧毁了林彪反党反革命集团的伟大胜利！
关于我自己，我的错误和罪过，在一九六八年六七月间写的"我的自述"中，就我自
己认识到的，作了检讨。到现在，我仍然承认我所检讨的全部内容，并且再次肯定我对
中央的保证，永不翻案。
我历史上最大的错误之一，是在一九三一年初不该离开红七军，尽管这个行为
在组织上是合法的，但在政治上是极端错误的。
在抗日战争时期和解放战争时期，我基本上执行了毛主席的正确路线，当然也犯过
一些个别的错误。
我另一个最大的错误，是在到北京工作以后，特别是在我担任党中央总书记之后，
犯了一系列的错误，一直发展到同刘少奇一块推行了一条反革命的资产阶级反动路线。
总书记的工作，我作得很不好，没有及时地经常地向主席请示报告，犯了搞独立王国的
错误。在六○、六一年困难时期，我没有抵制三自一包四大自由等资本主义的歪风，没
有遵照主席指示抓好三线的基本建设，使不该下马的也下了马，推延了具有十分重大的
战略意义的三线建设。在工业建设方面，我主持搞的工业七十条，没有政治挂帅，没有
把主席的鞍钢宪法作为指针，因而是一个错误的东西。在组织上，我看错了和信任了彭
真、罗瑞卿、杨尚昆这些人。特别重大的是我长期没有高举毛泽东思想的伟大红旗。无
产阶级文化大革命揭露我和批判我，是完全应该的，它对于我本人也是一个挽救。我完
全拥护主席的话：
无产阶级文化大革命是完全必要的、非常及时的。
我犯的错误很多，在"我的自述"中交代了，这里不再一一列举。我的错误的根源是
资产阶级世界观没有得到根本改造和脱离群众脱离实际的结果。
在去年（一九七一年）十一月我在呈给主席的信中，曾经提出要求工作的请求。我
是这样认识的：我在犯错误之后，完全脱离工作，脱离社会接触已经五年多快六年了，
我总想有一个机会，从工作中改正自己的错误，回到主席的无产阶级革命路线上来。我
完全知道，像我这样一个犯了很大错误和罪过的人，在社会上批臭了的人，不可能再得
到群众的信任，不可能再作什么重要的工作。但是，我觉得自己身体还好，虽然已经六
十八岁了，还可以作些技术性质的工作（例如调查研究工作），还可以为党、为人民作
七八年的工作，以求补过于万一。我没有别的要求，我静候主席和中央的指示。
衷心地敬祝
主席万寿无疆！
邓小平
一九七二年八月三日
（这封信是邓小平委托江青递交毛泽东的）
前天，（八月一日）我第四次同全体职工一块，听了关于林彪反党反革命集团阴谋
叛乱的罪证，和关于陈伯达反共份子、托派、叛徒、特务、修正主义份子的历史材料，
使我更加感到，如果不是文化大革命和广大深入的群众运动这面无比巨大的照妖镜，这
样迅速地把这帮牛鬼蛇神的原形显照出来，特别是如果不是主席这样从他们的世界观以
及他们的政治观点和阴谋活动，及时地查觉出他们的反动本质和极大的危害性，并迅速
地把他们暴露于光天化日之下，如果一旦他们完全掌握了党和国家的最高权力，那不但
我们的社会主义祖国会变到资本主义复辟，而且会使我们的国家重新沦入半殖民地的地
步，更不知会有多少人头落地。没有疑问的，那时，革命的人民和真正的共产党人最终
会起来把他们打倒，恢复无产阶级专政和社会主义制度，但是这要经过多长的痛苦的历
史反复啊！言念及此，真是不寒而栗。伟大的无产阶级文化大革命，在打倒了刘少奇反
革命的资产阶级司令部之后，又打倒了林彪、陈伯达这个反革命集团，再一次为党和国
家消除了最大的危险，使我不禁欢呼文化大革命的伟大胜利，毛泽东思想的伟大胜利。
对于林彪和陈伯达，我没有什么重要材料可揭发，特别是对于他们的历史我一无所
知，只能回忆一下平时对他们的感觉。
对林彪，我过去觉得他很会打仗，我不相信什么百胜将军，不打败仗的将军是没有
的，事实上他也不是每战必胜的，但认为他毕竟是一个军事能手。他的沉默寡言，我也
觉得是一个长处。在历史上，我知道他犯了两个错误，一次是在长征时，他同彭德怀搞
在一块，反对毛主席的领导，他历来标榜自己是反对彭德怀的，但在这样非常困难的关
头，却同彭德怀结成同盟，搞秘密串连，如果没有主席的威望和坚强的领导，不知会成
什么局面。再一次是抗美援朝，这也是一个严重的政治关头，他又出面反对主席的极端
重要的政治决策，并且拒绝到朝鲜作战，按说他是比彭德怀要适当的人选，而他竟拒绝
了，在实质上说，他是怕美国，不相信会打败美帝，不相信自己的正义立场和自己的力
量。这两件事，一直到八届十一中全会，在大家的自我批评的空气中，他才轻描淡写地
说了一下。
在全国解放后，我从一些事情中，逐渐觉得他是一个怀有嫉妒心和不大容人的人。
这我是从他对罗荣桓、刘伯承等同志的态度中看出的。刘伯承同志在军事学院的教学方
针中是有缺点和错误的，批判是应该的，但是林彪和彭德怀一块，对刘的批评不是与人
为善的，林在军委扩大会议上的讲话更是声色俱厉的，他们甚至说刘在二野没起什么作
用，似乎只有我在那里起作用，当时我曾为此说过，没有那样能够很好合作的司令员，
我这个政治委员也起不了什么作用的（我记得在常委也说过），对我这个态度，林彪当
然是不高兴的。罗荣桓同志同林彪是老战友，按说他们应该是很好的，罗荣桓同志为人
的朴实、诚恳和厚道，是大家所知道的，罗在干部中是很有威信的，林彪就说过，四野
干部有事都找罗，不找他。记不得是在一九五几年，罗荣桓同志曾指出林彪在宣传毛泽
东思想中，只强调老三篇，是把毛泽东思想庸俗化，林彪非常不高兴，从此对罗的关系
很坏。至于对贺龙的关系，大家是知道的。
对于罗瑞卿问题的处理，我是有错误的。在罗瑞卿问题出来前，我一直认为罗瑞卿
同林彪的关系是不会坏的，我一直觉得罗是林的老部下，罗当总长又是林推荐的，应该
没有问题，所以，当一九六六年初（一九六五年十二月）林彪提出罗瑞卿问题时，性质
是那样严重，我的感觉是很突然的。而在叶群向我叙述罗瑞卿如何反对林彪，如何企图
夺权时，又夹着一些罗如何轻视我的话，我听了并不舒服，我总觉得其中包含了一些个
人的东西，在方式上多少带一些突然袭击的性质，这多少影响我在处理罗的问题犯下那
样不容宽恕的错误。
对于林彪高举毛泽东思想伟大红旗，现在看来，他的确是为的打着红旗反红旗，是
准备夺权、颠覆无产阶级专政、复辟资本主义的步骤，但是过去我一直认为他抓得对，
抓得好，比我好得多。我过去的最大错误之一，就是没有高举毛泽东思想的伟大红旗。
但是，过去在两点上我一直是不同意的，一是林彪只强调老三篇，多次说只要老三篇就
够用了，我认为毛泽东思想是在一切领域中全面的发展了马克思列宁主义，只讲老三篇
，不从一切领域中阐述和运用毛泽东思想，就等于贬低毛泽东思想，把毛泽东思想庸俗
化；一是总感觉林彪的提法是把毛泽东思想同马列主义割裂开来，这同样是贬低了毛泽
东思想的意义，特别是损害了毛泽东思想在国际共产主义运动和反对国际修正主义运动
中的作用，我从阿尔巴尼亚同志的态度了解到这一点，我是赞成强调毛泽东思想对于马
列主义的继承、捍卫和发展作用的。
对于军队建设，我过去一直肯定林彪在这方面的作用。过去我只觉得他在强调人的
决定因素的时候，忽略了军事技术和战术的训练。林彪多次说，只要人不怕死就会打胜
仗，这是正确的，又是片面的。在文化大革命中，我见到"毛主席缔造的、林副主席直
接指挥的"这样的提法，觉得有点刺眼，只觉得这是提高林彪威信的提法，不敢有别的
想法，现在原形毕露，才恍然大悟了。
对于陈伯达，他的历史我一无所知，甚至在延安写的三民主义概论我也不知道。我
对陈的印象是，这个人很自负，很虚伪，从来没有自我批评。他会写东西，我从来没有
听到他赞扬过别人写的好东西。对于能写的别人，他是嫉妒的，例如对胡乔木。他经常
的口头禅是"我是个书生，不行"，这就是他唯一的自我批评。他看不起没有他参与过的
文章或文件。如果他提出过什么不正确的意见，而后来被批判了，他不再说就是，从来
没听他说他在那件事搞错了。例如，他对工业七十条说过不好，他究竟对哪些不同意呢
？没听他说过。我只知道他在工业方面提出了两个主张，一个是搞托拉斯，一个是要搞
计件工资制。搞托拉斯，我们试验过，这意味着工业的更加集中，对于发挥地方积极性
的方针是有很大矛盾的。搞计件工资制（他为此专门在天津搞了个调查材料）是意味要
进一步地搞物质刺激，这肯定不如"计时工资与计件工资相结合"的制度好。以后他不说
这两个东西了。因为他提出七十条不好，中央曾指定他负责修改，后来我还催问过他几
次，他始终迟迟不搞，不知他葫芦里卖的什么药。写批判苏联修正主义一批文章时，由
于是在康生同志那一个班子写的，陈伯达一直没有兴趣参加。只在搞国际共产主义运动
二十五条时，由于指定他主持修改，才积极起来。总之，这类的事，还有不少，只是细
节记不起来了。陈伯达多年没有主持过什么工作，对他这样一个握笔杆子的人，总要原
谅些，所以我对他的印象只是一般的。至于他在主持文化大革命中的事情，特别是九届
二中全会的事情，只是在听了中央文件的传达后，才知道像他这样一个坏蛋，以往那种
表露不是什么奇怪的。
主席知道，林彪、陈伯达对我，是要置之死地而后快的。如果不是主席的保护，我
不知会变成什么样子的了。
我同全党全国人民一道，热情地庆祝在摧毁了刘少奇反革命资产阶级司令部之后，
又摧毁了林彪反党反革命集团的伟大胜利！
关于我自己，我的错误和罪过，在一九六八年六七月间写的"我的自述"中，就我自
己认识到的，作了检讨。到现在，我仍然承认我所检讨的全部内容，并且再次肯定我对
中央的保证，永不翻案。
我历史上最大的错误之一，是在一九三一年初不该离开红七军，尽管这个行为
在组织上是合法的，但在政治上是极端错误的。
在抗日战争时期和解放战争时期，我基本上执行了毛主席的正确路线，当然也犯过
一些个别的错误。
我另一个最大的错误，是在到北京工作以后，特别是在我担任党中央总书记之后，
犯了一系列的错误，一直发展到同刘少奇一块推行了一条反革命的资产阶级反动路线。
总书记的工作，我作得很不好，没有及时地经常地向主席请示报告，犯了搞独立王国的
错误。在六○、六一年困难时期，我没有抵制三自一包四大自由等资本主义的歪风，没
有遵照主席指示抓好三线的基本建设，使不该下马的也下了马，推延了具有十分重大的
战略意义的三线建设。在工业建设方面，我主持搞的工业七十条，没有政治挂帅，没有
把主席的鞍钢宪法作为指针，因而是一个错误的东西。在组织上，我看错了和信任了彭
真、罗瑞卿、杨尚昆这些人。特别重大的是我长期没有高举毛泽东思想的伟大红旗。无
产阶级文化大革命揭露我和批判我，是完全应该的，它对于我本人也是一个挽救。我完
全拥护主席的话：
无产阶级文化大革命是完全必要的、非常及时的。
我犯的错误很多，在"我的自述"中交代了，这里不再一一列举。我的错误的根源是
资产阶级世界观没有得到根本改造和脱离群众脱离实际的结果。
在去年（一九七一年）十一月我在呈给主席的信中，曾经提出要求工作的请求。我
是这样认识的：我在犯错误之后，完全脱离工作，脱离社会接触已经五年多快六年了，
我总想有一个机会，从工作中改正自己的错误，回到主席的无产阶级革命路线上来。我
完全知道，像我这样一个犯了很大错误和罪过的人，在社会上批臭了的人，不可能再得
到群众的信任，不可能再作什么重要的工作。但是，我觉得自己身体还好，虽然已经六
十八岁了，还可以作些技术性质的工作（例如调查研究工作），还可以为党、为人民作
七八年的工作，以求补过于万一。我没有别的要求，我静候主席和中央的指示。
衷心地敬祝
主席万寿无疆！
邓小平
一九七二年八月三日
（这封信是邓小平委托江青递交毛泽东的）
s*a
4 楼
就是先处理细胞一段时间，然后纯化上清液，通过蛋白质谱等方法鉴定出都有哪些分泌
物。
大家做过类似的实验么？用的什么方法？
不纯化直接取点上清液做质谱是不是不靠谱？
谢谢！
ps: NgAgo有点玄（悬）！
物。
大家做过类似的实验么？用的什么方法？
不纯化直接取点上清液做质谱是不是不靠谱？
谢谢！
ps: NgAgo有点玄（悬）！
n*y
5 楼
60*0.0185=1.11
$1=$1.11 ?
$1=$1.11 ?
b*r
6 楼
联邦退税的表和W2就足够了
【在 c****h 的大作中提到】
: 交485时，需要交工资单和tax return表吗？
: 工资单不再是Pay-Check, 是电子pay-Stubs 可以吗？
: 谢谢。
【在 c****h 的大作中提到】
: 交485时，需要交工资单和tax return表吗？
: 工资单不再是Pay-Check, 是电子pay-Stubs 可以吗？
: 谢谢。
T*e
7 楼
比同时代的很多认错信写得要有尊严的多，至少没乱咬人。
g*x
8 楼
上清液是啥？lysate还是泡过细胞的PBS？
【在 s**********a 的大作中提到】
: 就是先处理细胞一段时间，然后纯化上清液，通过蛋白质谱等方法鉴定出都有哪些分泌
: 物。
: 大家做过类似的实验么？用的什么方法？
: 不纯化直接取点上清液做质谱是不是不靠谱？
: 谢谢！
: ps: NgAgo有点玄（悬）！
【在 s**********a 的大作中提到】
: 就是先处理细胞一段时间，然后纯化上清液，通过蛋白质谱等方法鉴定出都有哪些分泌
: 物。
: 大家做过类似的实验么？用的什么方法？
: 不纯化直接取点上清液做质谱是不是不靠谱？
: 谢谢！
: ps: NgAgo有点玄（悬）！
f*i
9 楼
all in .hehe
【在 n*******y 的大作中提到】
: 60*0.0185=1.11
: $1=$1.11 ?
【在 n*******y 的大作中提到】
: 60*0.0185=1.11
: $1=$1.11 ?
c*h
10 楼
我手上没有联邦退税的表。
是委托会计报的，退的税款是Direct-Deposit 进入银行账户上。
没有从国税局寄来的纸信啊。
是1040报税表吗？
谢谢。
是委托会计报的，退的税款是Direct-Deposit 进入银行账户上。
没有从国税局寄来的纸信啊。
是1040报税表吗？
谢谢。
d*f
11 楼
1972年已经没有人可以咬了，老同志没被打倒的只有主席了
【在 T**********e 的大作中提到】
: 比同时代的很多认错信写得要有尊严的多，至少没乱咬人。
【在 T**********e 的大作中提到】
: 比同时代的很多认错信写得要有尊严的多，至少没乱咬人。
i*9
12 楼
他说的应该是conditioanl medium，就是细胞在serum free的纯medium里面培养一段时
间（24-72小时），然后分析有什么cytokine or ligand被secret到medium里面了。
我也想知道有什么比较好的办法，浓缩，分离，过柱子。
Millipore的ultrafiltration似乎可以，不知道效率怎么样？
【在 g*****x 的大作中提到】
: 上清液是啥？lysate还是泡过细胞的PBS？
间（24-72小时），然后分析有什么cytokine or ligand被secret到medium里面了。
我也想知道有什么比较好的办法，浓缩，分离，过柱子。
Millipore的ultrafiltration似乎可以，不知道效率怎么样？
【在 g*****x 的大作中提到】
: 上清液是啥？lysate还是泡过细胞的PBS？
f*3
13 楼
这个没怎么看明白 求大神指导
o*1
14 楼
不能单纯当笑话看。这是求生存的技术，不然就是刘少奇的下场，死无葬身之地。对手
是毛主席呀，尼麻！估计就是成吉思汗在，也不是主席的对手。
【在 g*********n 的大作中提到】
: 主席：
: 前天，（八月一日）我第四次同全体职工一块，听了关于林彪反党反革命集团阴谋
: 叛乱的罪证，和关于陈伯达反共份子、托派、叛徒、特务、修正主义份子的历史材料，
: 使我更加感到，如果不是文化大革命和广大深入的群众运动这面无比巨大的照妖镜，这
: 样迅速地把这帮牛鬼蛇神的原形显照出来，特别是如果不是主席这样从他们的世界观以
: 及他们的政治观点和阴谋活动，及时地查觉出他们的反动本质和极大的危害性，并迅速
: 地把他们暴露于光天化日之下，如果一旦他们完全掌握了党和国家的最高权力，那不但
: 我们的社会主义祖国会变到资本主义复辟，而且会使我们的国家重新沦入半殖民地的地
: 步，更不知会有多少人头落地。没有疑问的，那时，革命的人民和真正的共产党人最终
: 会起来把他们打倒，恢复无产阶级专政和社会主义制度，但是这要经过多长的痛苦的历
是毛主席呀，尼麻！估计就是成吉思汗在，也不是主席的对手。
【在 g*********n 的大作中提到】
: 主席：
: 前天，（八月一日）我第四次同全体职工一块，听了关于林彪反党反革命集团阴谋
: 叛乱的罪证，和关于陈伯达反共份子、托派、叛徒、特务、修正主义份子的历史材料，
: 使我更加感到，如果不是文化大革命和广大深入的群众运动这面无比巨大的照妖镜，这
: 样迅速地把这帮牛鬼蛇神的原形显照出来，特别是如果不是主席这样从他们的世界观以
: 及他们的政治观点和阴谋活动，及时地查觉出他们的反动本质和极大的危害性，并迅速
: 地把他们暴露于光天化日之下，如果一旦他们完全掌握了党和国家的最高权力，那不但
: 我们的社会主义祖国会变到资本主义复辟，而且会使我们的国家重新沦入半殖民地的地
: 步，更不知会有多少人头落地。没有疑问的，那时，革命的人民和真正的共产党人最终
: 会起来把他们打倒，恢复无产阶级专政和社会主义制度，但是这要经过多长的痛苦的历
g*x
15 楼
那样的话我猜蛋白数量应该不算太多？
先试试直接digest然后SPE纯化一下peptide做质谱
【在 i***9 的大作中提到】
: 他说的应该是conditioanl medium，就是细胞在serum free的纯medium里面培养一段时
: 间（24-72小时），然后分析有什么cytokine or ligand被secret到medium里面了。
: 我也想知道有什么比较好的办法，浓缩，分离，过柱子。
: Millipore的ultrafiltration似乎可以，不知道效率怎么样？
先试试直接digest然后SPE纯化一下peptide做质谱
【在 i***9 的大作中提到】
: 他说的应该是conditioanl medium，就是细胞在serum free的纯medium里面培养一段时
: 间（24-72小时），然后分析有什么cytokine or ligand被secret到medium里面了。
: 我也想知道有什么比较好的办法，浓缩，分离，过柱子。
: Millipore的ultrafiltration似乎可以，不知道效率怎么样？
G*s
16 楼
maybe 0.016 not 0.0185
【在 n*******y 的大作中提到】
: 60*0.0185=1.11
: $1=$1.11 ?
【在 n*******y 的大作中提到】
: 60*0.0185=1.11
: $1=$1.11 ?
s*a
17 楼
直接拿培养细胞的medium来digest？您这么做过么？谢谢！
另外我们也打算先做个mRNA microarray看看。
【在 g*****x 的大作中提到】
: 那样的话我猜蛋白数量应该不算太多？
: 先试试直接digest然后SPE纯化一下peptide做质谱
另外我们也打算先做个mRNA microarray看看。
【在 g*****x 的大作中提到】
: 那样的话我猜蛋白数量应该不算太多？
: 先试试直接digest然后SPE纯化一下peptide做质谱
n*y
18 楼
your aa 0.019. will be aa soon.
【在 G*s 的大作中提到】
: maybe 0.016 not 0.0185
【在 G*s 的大作中提到】
: maybe 0.016 not 0.0185
Z*5
19 楼
三氯乙酸沉淀
n*y
20 楼
you can donate the software. save 30% tax
【在 G*s 的大作中提到】
: maybe 0.016 not 0.0185
【在 G*s 的大作中提到】
: maybe 0.016 not 0.0185
s*y
21 楼
绝大部分培养的细胞分泌的cytokine都是做elisa，或者类似于elisa的方法
G*s
22 楼
1-800flower shipping 又贵又不算miles
g*x
23 楼
当然要提蛋白了啊，这个用MWCO浓缩一下TCA沉淀就搞定了
【在 s**********a 的大作中提到】
: 直接拿培养细胞的medium来digest？您这么做过么？谢谢！
: 另外我们也打算先做个mRNA microarray看看。
【在 s**********a 的大作中提到】
: 直接拿培养细胞的medium来digest？您这么做过么？谢谢！
: 另外我们也打算先做个mRNA microarray看看。
w*n
24 楼
浓缩，二维电泳，扣胶测序。
【在 s**********a 的大作中提到】
: 就是先处理细胞一段时间，然后纯化上清液，通过蛋白质谱等方法鉴定出都有哪些分泌
: 物。
: 大家做过类似的实验么？用的什么方法？
: 不纯化直接取点上清液做质谱是不是不靠谱？
: 谢谢！
: ps: NgAgo有点玄（悬）！
【在 s**********a 的大作中提到】
: 就是先处理细胞一段时间，然后纯化上清液，通过蛋白质谱等方法鉴定出都有哪些分泌
: 物。
: 大家做过类似的实验么？用的什么方法？
: 不纯化直接取点上清液做质谱是不是不靠谱？
: 谢谢！
: ps: NgAgo有点玄（悬）！
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有个问题想听听大家的意见。谢谢。cells clump老板投文章为什么不通知我诡异的cell death assay这种情况，我可以争取第一作者吗？学校没买F1000怎么办？现在不支持个人注册了你见过最顺眼的生物女是什么发型的？为什么HSC不能同源重组？got an email this morningpaper help, Thanks a lot各位觉得taqman probe的specificity如何请教成绩更改的问题请教这种情况大修后有多大可能性ACCEPT？一个月后离开实验室，都要做些什么？gateway helpa lab manager & Research scientist position at NIBSpaper helpgenotyping.有哪些grant，不需要绿卡也可以申请的啊？请知情人介绍下东海岸biotech 公司？