请教qPCR cycle 的问题# Biology - 生物学
j*l
1 楼
我用google scholar, 没有发现有中文的citation. 昨天晚上无聊，用baidu 搜了一下
，发现有被中文的文章引用。baidu 肯定不全，有什么地方比较全呢？
，发现有被中文的文章引用。baidu 肯定不全，有什么地方比较全呢？
a*n
2 楼
正在填表申请一公寓，申请表上关于employer一栏，除了地址、电话外，还要求给出
Capacity。有人能告诉我这是什么意思么？是说单位员工数量？资金？
多谢！
Capacity。有人能告诉我这是什么意思么？是说单位员工数量？资金？
多谢！
b*n
3 楼
这个值不值得搞一个玩玩？Lumia 900 $220 on ebay.
http://www.ebay.com/itm/New-Nokia-Lumia-900-16GB-Unlocked-GSM-P
http://www.ebay.com/itm/New-Nokia-Lumia-900-16GB-Unlocked-GSM-P
h*g
4 楼
我作的qPCR，一个基因的cycles在control条件是36 or 37 cycles，在刺激下的cycles
是 30 cycles。请问这是否表明此基因表达升高很多倍？好像35个cycles以上就不准了
？多谢！
是 30 cycles。请问这是否表明此基因表达升高很多倍？好像35个cycles以上就不准了
？多谢！
g*r
5 楼
co-ask
e*t
6 楼
不知道的地方不填。
【在 a***n 的大作中提到】
: 正在填表申请一公寓，申请表上关于employer一栏，除了地址、电话外，还要求给出
: Capacity。有人能告诉我这是什么意思么？是说单位员工数量？资金？
: 多谢！
【在 a***n 的大作中提到】
: 正在填表申请一公寓，申请表上关于employer一栏，除了地址、电话外，还要求给出
: Capacity。有人能告诉我这是什么意思么？是说单位员工数量？资金？
: 多谢！
u*d
7 楼
100%不能；还是别搞了。
至少分辨率已经拿不出手了。
【在 b*********n 的大作中提到】
: 这个值不值得搞一个玩玩？Lumia 900 $220 on ebay.
: http://www.ebay.com/itm/New-Nokia-Lumia-900-16GB-Unlocked-GSM-P
至少分辨率已经拿不出手了。
【在 b*********n 的大作中提到】
: 这个值不值得搞一个玩玩？Lumia 900 $220 on ebay.
: http://www.ebay.com/itm/New-Nokia-Lumia-900-16GB-Unlocked-GSM-P
t*k
8 楼
看melting curve是不是expectedproduct，ddCt的话，37到30是2^7倍，dramatic
change.
change.
e*r
9 楼
知网+google,一般比较全了
【在 j**l 的大作中提到】
: 我用google scholar, 没有发现有中文的citation. 昨天晚上无聊，用baidu 搜了一下
: ，发现有被中文的文章引用。baidu 肯定不全，有什么地方比较全呢？
【在 j**l 的大作中提到】
: 我用google scholar, 没有发现有中文的citation. 昨天晚上无聊，用baidu 搜了一下
: ，发现有被中文的文章引用。baidu 肯定不全，有什么地方比较全呢？
l*s
10 楼
几个人住？
l*e
11 楼
想来很多人都看到了，我自己看是想给老人买个大屏幕打电话
方便的手机回国用。觉得这个价格之类的都还不错，特别是对
NOKIA有感情，就打电话去问了一下，是不是真四频的。
结果一问问出了一点儿新的内容，
那里说他们是从AT&T进的货，从NOKIA进的解锁码，之后解码的。
也就是说机器已经被开过包了，是EBAY商家解的锁。他们的主页
上特别没有提频率这件事儿，很怪。
不知大家觉得这个消息有没有用。又去看了他们的主页，这句是
什么意思不太明白。看来以后在EBAY上买东西要仔细一些。
This is an UNLOCKED branded phone, we are not responsible
for configuring the data or picture messaging.
方便的手机回国用。觉得这个价格之类的都还不错，特别是对
NOKIA有感情，就打电话去问了一下，是不是真四频的。
结果一问问出了一点儿新的内容，
那里说他们是从AT&T进的货，从NOKIA进的解锁码，之后解码的。
也就是说机器已经被开过包了，是EBAY商家解的锁。他们的主页
上特别没有提频率这件事儿，很怪。
不知大家觉得这个消息有没有用。又去看了他们的主页，这句是
什么意思不太明白。看来以后在EBAY上买东西要仔细一些。
This is an UNLOCKED branded phone, we are not responsible
for configuring the data or picture messaging.
A*y
12 楼
Not only that, is your primers still linear at cycle 30-36? Did you check
the linearity of the primers? I know a lot of people don't do qPCR
correctly.
the linearity of the primers? I know a lot of people don't do qPCR
correctly.
M*I
13 楼
Scopia
p*i
14 楼
不能
【在 l*******e 的大作中提到】
: 想来很多人都看到了，我自己看是想给老人买个大屏幕打电话
: 方便的手机回国用。觉得这个价格之类的都还不错，特别是对
: NOKIA有感情，就打电话去问了一下，是不是真四频的。
: 结果一问问出了一点儿新的内容，
: 那里说他们是从AT&T进的货，从NOKIA进的解锁码，之后解码的。
: 也就是说机器已经被开过包了，是EBAY商家解的锁。他们的主页
: 上特别没有提频率这件事儿，很怪。
: 不知大家觉得这个消息有没有用。又去看了他们的主页，这句是
: 什么意思不太明白。看来以后在EBAY上买东西要仔细一些。
: This is an UNLOCKED branded phone, we are not responsible
【在 l*******e 的大作中提到】
: 想来很多人都看到了，我自己看是想给老人买个大屏幕打电话
: 方便的手机回国用。觉得这个价格之类的都还不错，特别是对
: NOKIA有感情，就打电话去问了一下，是不是真四频的。
: 结果一问问出了一点儿新的内容，
: 那里说他们是从AT&T进的货，从NOKIA进的解锁码，之后解码的。
: 也就是说机器已经被开过包了，是EBAY商家解的锁。他们的主页
: 上特别没有提频率这件事儿，很怪。
: 不知大家觉得这个消息有没有用。又去看了他们的主页，这句是
: 什么意思不太明白。看来以后在EBAY上买东西要仔细一些。
: This is an UNLOCKED branded phone, we are not responsible
h*g
15 楼
I am using Taqman primer. Do you think there are some problems? Thanks.
cycles
【在 h*********g 的大作中提到】
: 我作的qPCR，一个基因的cycles在control条件是36 or 37 cycles，在刺激下的cycles
: 是 30 cycles。请问这是否表明此基因表达升高很多倍？好像35个cycles以上就不准了
: ？多谢！
cycles
【在 h*********g 的大作中提到】
: 我作的qPCR，一个基因的cycles在control条件是36 or 37 cycles，在刺激下的cycles
: 是 30 cycles。请问这是否表明此基因表达升高很多倍？好像35个cycles以上就不准了
: ？多谢！
e*r
16 楼
嗯,是的.忘了提了,这个更全,不过很多人没有access
【在 M**I 的大作中提到】
: Scopia
【在 M**I 的大作中提到】
: Scopia
s*a
17 楼
别折腾了，直接上unlcoked iphone 5, 什么都不用调也不用刷，回国直接就能用。
【在 l*******e 的大作中提到】
: 想来很多人都看到了，我自己看是想给老人买个大屏幕打电话
: 方便的手机回国用。觉得这个价格之类的都还不错，特别是对
: NOKIA有感情，就打电话去问了一下，是不是真四频的。
: 结果一问问出了一点儿新的内容，
: 那里说他们是从AT&T进的货，从NOKIA进的解锁码，之后解码的。
: 也就是说机器已经被开过包了，是EBAY商家解的锁。他们的主页
: 上特别没有提频率这件事儿，很怪。
: 不知大家觉得这个消息有没有用。又去看了他们的主页，这句是
: 什么意思不太明白。看来以后在EBAY上买东西要仔细一些。
: This is an UNLOCKED branded phone, we are not responsible
【在 l*******e 的大作中提到】
: 想来很多人都看到了，我自己看是想给老人买个大屏幕打电话
: 方便的手机回国用。觉得这个价格之类的都还不错，特别是对
: NOKIA有感情，就打电话去问了一下，是不是真四频的。
: 结果一问问出了一点儿新的内容，
: 那里说他们是从AT&T进的货，从NOKIA进的解锁码，之后解码的。
: 也就是说机器已经被开过包了，是EBAY商家解的锁。他们的主页
: 上特别没有提频率这件事儿，很怪。
: 不知大家觉得这个消息有没有用。又去看了他们的主页，这句是
: 什么意思不太明白。看来以后在EBAY上买东西要仔细一些。
: This is an UNLOCKED branded phone, we are not responsible
A*y
18 楼
I don't care what primers that you are using. It never hurt to check the
linearity of your primers!
【在 h*********g 的大作中提到】
: I am using Taqman primer. Do you think there are some problems? Thanks.
:
: cycles
linearity of your primers!
【在 h*********g 的大作中提到】
: I am using Taqman primer. Do you think there are some problems? Thanks.
:
: cycles
l*e
19 楼
看了他们的服务条款，还是别从他家进手机吧。
h*g
20 楼
Could you tell me how to check primer linearity? I did not find it on google.
Thanks!
【在 A******y 的大作中提到】
: I don't care what primers that you are using. It never hurt to check the
: linearity of your primers!
Thanks!
【在 A******y 的大作中提到】
: I don't care what primers that you are using. It never hurt to check the
: linearity of your primers!
f*5
21 楼
就是没法对付国内的垃圾电话
【在 s*******a 的大作中提到】
: 别折腾了，直接上unlcoked iphone 5, 什么都不用调也不用刷，回国直接就能用。
【在 s*******a 的大作中提到】
: 别折腾了，直接上unlcoked iphone 5, 什么都不用调也不用刷，回国直接就能用。
A*y
22 楼
So how much RNA or cDNA sample do you add to your qPCR? What you do is take
a sample (usually control), do a x2 serial dilution and see if your cycle
is close to a single cycle per dilution and if it is linear. It is call PCR
amplification efficiency. It doesn't have to 100% but I think you should
have >90% and linear.
a sample (usually control), do a x2 serial dilution and see if your cycle
is close to a single cycle per dilution and if it is linear. It is call PCR
amplification efficiency. It doesn't have to 100% but I think you should
have >90% and linear.
b*n
23 楼
thx.
【在 u****d 的大作中提到】
: 100%不能；还是别搞了。
: 至少分辨率已经拿不出手了。
【在 u****d 的大作中提到】
: 100%不能；还是别搞了。
: 至少分辨率已经拿不出手了。
h*g
24 楼
I am using 10 ng cDNA in 10 ul. Thanks. I will try.
take
PCR
【在 A******y 的大作中提到】
: So how much RNA or cDNA sample do you add to your qPCR? What you do is take
: a sample (usually control), do a x2 serial dilution and see if your cycle
: is close to a single cycle per dilution and if it is linear. It is call PCR
: amplification efficiency. It doesn't have to 100% but I think you should
: have >90% and linear.
take
PCR
【在 A******y 的大作中提到】
: So how much RNA or cDNA sample do you add to your qPCR? What you do is take
: a sample (usually control), do a x2 serial dilution and see if your cycle
: is close to a single cycle per dilution and if it is linear. It is call PCR
: amplification efficiency. It doesn't have to 100% but I think you should
: have >90% and linear.
u*d
25 楼
那还不如上N4, 更便宜。
爱疯5那个样子太丑，容易掉漆，国人看不上吧；再说爱疯5在公交车或地铁里挤扁了、
弯了怎么办。
【在 s*******a 的大作中提到】
: 别折腾了，直接上unlcoked iphone 5, 什么都不用调也不用刷，回国直接就能用。
爱疯5那个样子太丑，容易掉漆，国人看不上吧；再说爱疯5在公交车或地铁里挤扁了、
弯了怎么办。
【在 s*******a 的大作中提到】
: 别折腾了，直接上unlcoked iphone 5, 什么都不用调也不用刷，回国直接就能用。
h*g
26 楼
Here is my cycle numbers corresponding to 2X dilution. How do you think?
Thanks.
28.8, 30.13, 31, 32.74, 33.86
I do not have positive control and can only use my sample.
take
PCR
【在 A******y 的大作中提到】
: So how much RNA or cDNA sample do you add to your qPCR? What you do is take
: a sample (usually control), do a x2 serial dilution and see if your cycle
: is close to a single cycle per dilution and if it is linear. It is call PCR
: amplification efficiency. It doesn't have to 100% but I think you should
: have >90% and linear.
Thanks.
28.8, 30.13, 31, 32.74, 33.86
I do not have positive control and can only use my sample.
take
PCR
【在 A******y 的大作中提到】
: So how much RNA or cDNA sample do you add to your qPCR? What you do is take
: a sample (usually control), do a x2 serial dilution and see if your cycle
: is close to a single cycle per dilution and if it is linear. It is call PCR
: amplification efficiency. It doesn't have to 100% but I think you should
: have >90% and linear.
s*a
27 楼
上N4，回国跟路边要饭的，贴小广告的撞系统了怎么办？？
再说那些个google服务回国了也就是个摆设了，还在后台空耗电。
【在 u****d 的大作中提到】
: 那还不如上N4, 更便宜。
: 爱疯5那个样子太丑，容易掉漆，国人看不上吧；再说爱疯5在公交车或地铁里挤扁了、
: 弯了怎么办。
再说那些个google服务回国了也就是个摆设了，还在后台空耗电。
【在 u****d 的大作中提到】
: 那还不如上N4, 更便宜。
: 爱疯5那个样子太丑，容易掉漆，国人看不上吧；再说爱疯5在公交车或地铁里挤扁了、
: 弯了怎么办。
A*y
28 楼
How about you tell me. If you draw a standard curve, is it linear? from 31
to 32.74, you have about 2 cycle difference and you only diluted by x2.
Unless you skip a point. You should also do more points.
【在 h*********g 的大作中提到】
: Here is my cycle numbers corresponding to 2X dilution. How do you think?
: Thanks.
: 28.8, 30.13, 31, 32.74, 33.86
: I do not have positive control and can only use my sample.
:
: take
: PCR
to 32.74, you have about 2 cycle difference and you only diluted by x2.
Unless you skip a point. You should also do more points.
【在 h*********g 的大作中提到】
: Here is my cycle numbers corresponding to 2X dilution. How do you think?
: Thanks.
: 28.8, 30.13, 31, 32.74, 33.86
: I do not have positive control and can only use my sample.
:
: take
: PCR
s*y
29 楼
Why not buy from Hua wei in China, it has big screen, and relatively cheap.
Warranty as well.
【在 l*******e 的大作中提到】
: 想来很多人都看到了，我自己看是想给老人买个大屏幕打电话
: 方便的手机回国用。觉得这个价格之类的都还不错，特别是对
: NOKIA有感情，就打电话去问了一下，是不是真四频的。
: 结果一问问出了一点儿新的内容，
: 那里说他们是从AT&T进的货，从NOKIA进的解锁码，之后解码的。
: 也就是说机器已经被开过包了，是EBAY商家解的锁。他们的主页
: 上特别没有提频率这件事儿，很怪。
: 不知大家觉得这个消息有没有用。又去看了他们的主页，这句是
: 什么意思不太明白。看来以后在EBAY上买东西要仔细一些。
: This is an UNLOCKED branded phone, we are not responsible
Warranty as well.
【在 l*******e 的大作中提到】
: 想来很多人都看到了，我自己看是想给老人买个大屏幕打电话
: 方便的手机回国用。觉得这个价格之类的都还不错，特别是对
: NOKIA有感情，就打电话去问了一下，是不是真四频的。
: 结果一问问出了一点儿新的内容，
: 那里说他们是从AT&T进的货，从NOKIA进的解锁码，之后解码的。
: 也就是说机器已经被开过包了，是EBAY商家解的锁。他们的主页
: 上特别没有提频率这件事儿，很怪。
: 不知大家觉得这个消息有没有用。又去看了他们的主页，这句是
: 什么意思不太明白。看来以后在EBAY上买东西要仔细一些。
: This is an UNLOCKED branded phone, we are not responsible
f*e
30 楼
通常 qPCR 会 report PCR efficiency. taqman 通常 efficiency 应该接近 100%. 如
果持续低于 95%， 说明 primer/probe design 有问题。
Ct大于30之后基本上就不太reliable了。做了no template control么? 离你的sample
的 Ct远么？
果持续低于 95%， 说明 primer/probe design 有问题。
Ct大于30之后基本上就不太reliable了。做了no template control么? 离你的sample
的 Ct远么？
w*t
31 楼
can install android on it?
F*p
32 楼
>32 is not reliable.
I suspect you were using 2 primers qPCR. Try 2 primers and probe based qPCR
, that is way more reliable.
cycles
【在 h*********g 的大作中提到】
: 我作的qPCR，一个基因的cycles在control条件是36 or 37 cycles，在刺激下的cycles
: 是 30 cycles。请问这是否表明此基因表达升高很多倍？好像35个cycles以上就不准了
: ？多谢！
I suspect you were using 2 primers qPCR. Try 2 primers and probe based qPCR
, that is way more reliable.
cycles
【在 h*********g 的大作中提到】
: 我作的qPCR，一个基因的cycles在control条件是36 or 37 cycles，在刺激下的cycles
: 是 30 cycles。请问这是否表明此基因表达升高很多倍？好像35个cycles以上就不准了
: ？多谢！
u*d
33 楼
国内路边要饭的，贴小广告的不是用的爱疯吗。
当然是玩笑；不过N4总共才几十万的销量，比爱疯更难撞吧。
【在 s*******a 的大作中提到】
: 上N4，回国跟路边要饭的，贴小广告的撞系统了怎么办？？
: 再说那些个google服务回国了也就是个摆设了，还在后台空耗电。
当然是玩笑；不过N4总共才几十万的销量，比爱疯更难撞吧。
【在 s*******a 的大作中提到】
: 上N4，回国跟路边要饭的，贴小广告的撞系统了怎么办？？
: 再说那些个google服务回国了也就是个摆设了，还在后台空耗电。
A*y
34 楼
I am just sad that the PI don't train people properly, you should always
validate your primer regardless what people told you. If you have controls,
high cycle range is not a problem.
validate your primer regardless what people told you. If you have controls,
high cycle range is not a problem.
s*a
35 楼
不是撞机，是撞系统（android)
【在 u****d 的大作中提到】
: 国内路边要饭的，贴小广告的不是用的爱疯吗。
: 当然是玩笑；不过N4总共才几十万的销量，比爱疯更难撞吧。
【在 u****d 的大作中提到】
: 国内路边要饭的，贴小广告的不是用的爱疯吗。
: 当然是玩笑；不过N4总共才几十万的销量，比爱疯更难撞吧。
m*t
36 楼
我现在就在国内，用蓝色的900，只撞衫过一次。
不能上wp8，问题也不大，能上网，收email，上微信,qq，就够了
。
用联通的3g卡，速度很快。
关键是拿出去很炫。
不能上wp8，问题也不大，能上网，收email，上微信,qq，就够了
。
用联通的3g卡，速度很快。
关键是拿出去很炫。
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