RNAscope 请教# Biology - 生物学
M*C
1 楼
最近在试RNAscope，ACDbio,用的是RNAscope® 2.5 HD Detection Reagent-RED
老鼠的皮肤石蜡切片。用了Kit里的Positive Probe, Negative Probe, 我的target
probe, 还有以前同事的一个已知work的probe也做阳性对照。试了4次了，
用同样的片子试几种probe，现在的情况是：
positive probe 看到强的signal，dots,就算work了。
target probe 也看到些红色signal,算work。
但negative probe 也出现一些紫红，虽然明显比target probe 弱，理论上Negative只
应该有Hematoxylin的蓝色。
用同事的probe的片子，很强的信号在皮肤的真皮位置（是期待的结果），但问题是我
的片子在皮肤的表皮，也看到一些信号，这个不是期待的，同事以前用这个probe做老
鼠的片子，表皮只有Hematoxylin的蓝色。
感觉Negative和同事probe的结果，出现的不想要的信号，可能是同样的原因引起的，
但不知道是什么原因？做这个的同事已经离开lab。
另外还有一些常规问题，这家公司说要在一个专门的HybEZ™ Oven 里做，40C。
我们没有这个oven，现在是用平时的digital incubator做，incubator setting 40C
显示40C的情况下，但片子在的塑料盒里温度竟然才28C。所以不知道是否应该升高
incubator的setting直到盒子里达到40C？
谢谢！
老鼠的皮肤石蜡切片。用了Kit里的Positive Probe, Negative Probe, 我的target
probe, 还有以前同事的一个已知work的probe也做阳性对照。试了4次了，
用同样的片子试几种probe，现在的情况是：
positive probe 看到强的signal，dots,就算work了。
target probe 也看到些红色signal,算work。
但negative probe 也出现一些紫红，虽然明显比target probe 弱，理论上Negative只
应该有Hematoxylin的蓝色。
用同事的probe的片子，很强的信号在皮肤的真皮位置（是期待的结果），但问题是我
的片子在皮肤的表皮，也看到一些信号，这个不是期待的，同事以前用这个probe做老
鼠的片子，表皮只有Hematoxylin的蓝色。
感觉Negative和同事probe的结果，出现的不想要的信号，可能是同样的原因引起的，
但不知道是什么原因？做这个的同事已经离开lab。
另外还有一些常规问题，这家公司说要在一个专门的HybEZ™ Oven 里做，40C。
我们没有这个oven，现在是用平时的digital incubator做，incubator setting 40C
显示40C的情况下，但片子在的塑料盒里温度竟然才28C。所以不知道是否应该升高
incubator的setting直到盒子里达到40C？
谢谢！