弱弱问一个6x SDS protein sample buffer的问题# Biology - 生物学
m*y
1 楼
以前都是买来用，现在想自己配一点。看配方很简单，但是自己配的时候发现60C的时
候溶解很好，一旦凉下来到室温就成了凝胶一样。哪位自己配制过给分享一点技巧？谢
谢!
候溶解很好，一旦凉下来到室温就成了凝胶一样。哪位自己配制过给分享一点技巧？谢
谢!
g*x
2 楼
老板是嫌你工资太高了，让你花时间在这种问题上？
N*n
3 楼
不加热应该就能溶解。
SDS在冬天低温沉淀后就再也不是原来的性质了，加热后很容易重新沉淀。
SDS在冬天低温沉淀后就再也不是原来的性质了，加热后很容易重新沉淀。
c*i
4 楼
十几块钱能跑2000条lane的东西还要自己配？这也太闲了。
【在 g*****x 的大作中提到】
: 老板是嫌你工资太高了，让你花时间在这种问题上？
【在 g*****x 的大作中提到】
: 老板是嫌你工资太高了，让你花时间在这种问题上？
m*y
5 楼
哈哈，果然有人说我闲的这话。。。。。。买起来是很便宜，我就是想知道为什么，不
行吗？说我闲的其实是跟我一样不知道为什么。
行吗？说我闲的其实是跟我一样不知道为什么。
m*y
6 楼
现在看版上没几个技术问题了，各种八卦倒是层出不穷。
非常感谢@Noahgen！
非常感谢@Noahgen！
d*m
7 楼
能用小钱买的，都不算技术问题
【在 m******y 的大作中提到】
: 现在看版上没几个技术问题了，各种八卦倒是层出不穷。
: 非常感谢@Noahgen！
【在 m******y 的大作中提到】
: 现在看版上没几个技术问题了，各种八卦倒是层出不穷。
: 非常感谢@Noahgen！
g*n
8 楼
现在什么都是现成的，从溶液，胶，到试剂盒，大家都不关心技术问题了。
你的问题有两种可能：1. Tris。为什么？说不清。你换一个公司的试试。2. SDS和甘
油一起加热（60度？）会有问题。后加甘油试试。
你的问题有两种可能：1. Tris。为什么？说不清。你换一个公司的试试。2. SDS和甘
油一起加热（60度？）会有问题。后加甘油试试。
m*y
9 楼
一起加热会有啥问题？蛋白变性的时候就是在一起加热的啊。
【在 g*****n 的大作中提到】
: 现在什么都是现成的，从溶液，胶，到试剂盒，大家都不关心技术问题了。
: 你的问题有两种可能：1. Tris。为什么？说不清。你换一个公司的试试。2. SDS和甘
: 油一起加热（60度？）会有问题。后加甘油试试。
g*n
10 楼
加了蛋白就变成1x了。可能跟浓度有关。
y*i
11 楼
我自己配过，说说看，供你参考。因为6X的SDS和甘油浓度都太高，不好溶解，所以这
两种要分开配，用少量水，都溶解后再混匀，特别是溴酚蓝要最后加，不然就是一团浆
糊，怎么混都混不匀了。我第一次配就遇到你那种情况。后来自己摸索明白了。我不觉
得自己配有什么无聊的，因为我想用的与商业卖的有点不同
两种要分开配，用少量水，都溶解后再混匀，特别是溴酚蓝要最后加，不然就是一团浆
糊，怎么混都混不匀了。我第一次配就遇到你那种情况。后来自己摸索明白了。我不觉
得自己配有什么无聊的，因为我想用的与商业卖的有点不同
m*y
12 楼
太感谢了!我也是觉得公司卖的不是SDS浓度低一点就是glycerol浓度低一点。
我是用Tris 配的SDS，然后和glycerol混在一起的。你的意思是SDS充分溶解在Tris里
面以后再混合？Tri-HCl和glycerol的体积加起来就已经占99%了。
【在 y***i 的大作中提到】
: 我自己配过，说说看，供你参考。因为6X的SDS和甘油浓度都太高，不好溶解，所以这
: 两种要分开配，用少量水，都溶解后再混匀，特别是溴酚蓝要最后加，不然就是一团浆
: 糊，怎么混都混不匀了。我第一次配就遇到你那种情况。后来自己摸索明白了。我不觉
: 得自己配有什么无聊的，因为我想用的与商业卖的有点不同
y*i
13 楼
一定要保证SDS溶了，不能靠混合后加热再溶。甘油可以适当少点，只要不影响样品沉
下来就行，不然水太少了很难溶
【在 m******y 的大作中提到】
:
: 太感谢了!我也是觉得公司卖的不是SDS浓度低一点就是glycerol浓度低一点。
: 我是用Tris 配的SDS，然后和glycerol混在一起的。你的意思是SDS充分溶解在Tris里
: 面以后再混合？Tri-HCl和glycerol的体积加起来就已经占99%了。
下来就行，不然水太少了很难溶
【在 m******y 的大作中提到】
:
: 太感谢了!我也是觉得公司卖的不是SDS浓度低一点就是glycerol浓度低一点。
: 我是用Tris 配的SDS，然后和glycerol混在一起的。你的意思是SDS充分溶解在Tris里
: 面以后再混合？Tri-HCl和glycerol的体积加起来就已经占99%了。
m*y
14 楼
好的，非常感谢！有时间了再试试看。
【在 y***i 的大作中提到】
: 一定要保证SDS溶了，不能靠混合后加热再溶。甘油可以适当少点，只要不影响样品沉
: 下来就行，不然水太少了很难溶
D*g
15 楼
从来都是自己配。省钱又方便，配也用不了多少时间，一次可以用几年。从公司定，时
间花的可能更多。
低温沉淀是正常的，放到常温或37c,几分钟就溶解了。
间花的可能更多。
低温沉淀是正常的，放到常温或37c,几分钟就溶解了。
m*y
16 楼
我配好了，但是在室温18C的时候就形成沉淀，37C的时候就溶解。
【在 D****g 的大作中提到】
: 从来都是自己配。省钱又方便，配也用不了多少时间，一次可以用几年。从公司定，时
: 间花的可能更多。
: 低温沉淀是正常的，放到常温或37c,几分钟就溶解了。
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