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还是有大腿抱比什么都给力

还是有大腿抱比什么都给力# Chemistry - 化学

a92013-12-04 08:12

1 楼

猪老师问：bt的adhoc比wifi的adhoc有啥好处？
wavelets答：bt的配置比wifi的容易
第三者:掌机上只要开一个开关就行了
wavelets:iphone上两者都有
猪老师：bt的adhoc比wifi的adhoc有啥好处？
wavelets答：bt的配置比wifi的容易
第三者:掌机上只要开一个开关就行了
wavelets:iphone上两者都有
猪老师问：bt的adhoc比wifi的adhoc有啥好处？
wavelets答：bt的配置比wifi的容易
第三者:掌机上只要开一个开关就行了
猪老师问：bt的adhoc比wifi的adhoc有啥好处？
wavelets答：bt的配置比wifi的容易
第三者:掌机上只要开一个开关就行了
猪老师问：bt的adhoc比wifi的adhoc有啥好处？
wavelets答：bt的配置比wifi的容易
第三者:掌机上只要开一个开关就行了
转了一天了，李大师也被转晕了

m*a2013-12-04 08:12

2 楼

我的NookColor有以下问题，请问大家遇见过吗？
1. 触摸屏会‘粘’，手离开后就好像还有个手指点着，如果再点就好像两个手在点了
（放大/缩小）。重启后问题消失。
2. 网页打不开（hotmail.com). 点了那个叉显示“stoping”，其实没用。重启解决。
3. 杂志和报纸点了“download”后没有用。
出场设置，买来后什么都没有变过。

w*e2013-12-04 08:12

3 楼

怀疑自己的RT yield太低，有什么好方法测吗？PCR的话，可以dilute product直接
跟template比，RT之后要想定量只能qPCR，变数太多。
请指点。//bow

p*n2013-12-04 08:12

4 楼

http://news.sina.com.cn/c/p/2013-12-04/113828883915.shtml
2009年6月，胡娟获得了中国人民大学的理学博士学位。1年以后，被学校评聘为教授。
2013年，成为博士生导师。
2011年4月6日，中国人民大学正式发文组建教育学院，胡娟任执行院长，全面负责学院
学科建设、教学、科研、行政等工作。在当时的中国人民大学20多个学院中，胡娟是唯
一的一名1970年以后出生的院长，这使得39岁的胡娟成为当时学校里最年轻的院长。
09年博士毕业，10年评为教授，11年当上院长

c*k2013-12-04 08:12

5 楼

我是看晕了。。

【在 a9 的大作中提到】

: 猪老师问：bt的adhoc比wifi的adhoc有啥好处？
: wavelets答：bt的配置比wifi的容易
: 第三者:掌机上只要开一个开关就行了
: wavelets:iphone上两者都有
: 猪老师：bt的adhoc比wifi的adhoc有啥好处？
: wavelets答：bt的配置比wifi的容易
: 第三者:掌机上只要开一个开关就行了
: wavelets:iphone上两者都有
: 猪老师问：bt的adhoc比wifi的adhoc有啥好处？
: wavelets答：bt的配置比wifi的容易

a*a2013-12-04 08:12

6 楼

1。贴膜
2
3
不知道，我们都是用rooted，用dolphinHD browser，从来没你这些问题
ms本版没有用原厂Nookcolor系统的吧

【在 m**a 的大作中提到】

: 我的NookColor有以下问题，请问大家遇见过吗？
: 1. 触摸屏会‘粘’，手离开后就好像还有个手指点着，如果再点就好像两个手在点了
: （放大/缩小）。重启后问题消失。
: 2. 网页打不开（hotmail.com). 点了那个叉显示“stoping”，其实没用。重启解决。
: 3. 杂志和报纸点了“download”后没有用。
: 出场设置，买来后什么都没有变过。

T*t2013-12-04 08:12

7 楼

我也只知道qPCR。

b*s2013-12-04 08:12

8 楼

真牛逼

【在 p*******n 的大作中提到】

: http://news.sina.com.cn/c/p/2013-12-04/113828883915.shtml
: 2009年6月，胡娟获得了中国人民大学的理学博士学位。1年以后，被学校评聘为教授。
: 2013年，成为博士生导师。
: 2011年4月6日，中国人民大学正式发文组建教育学院，胡娟任执行院长，全面负责学院
: 学科建设、教学、科研、行政等工作。在当时的中国人民大学20多个学院中，胡娟是唯
: 一的一名1970年以后出生的院长，这使得39岁的胡娟成为当时学校里最年轻的院长。
: 09年博士毕业，10年评为教授，11年当上院长

w*e2013-12-04 08:12

9 楼

用qPCR的话，RNA template定量，DNA standard curve point定量，RT,qPCR
都会引进误差，比较头疼。。。我现在用这种方法将就着，测出来的RT
yield只有10~20%:(

【在 T**********t 的大作中提到】

: 我也只知道qPCR。

U*m2013-12-04 08:12

10 楼

不是真牛逼，而是逼真牛！

T*t2013-12-04 08:12

11 楼

用picogreen assay呢？我没用过，不过我知道有用picogreen代替qPCR定量的。

【在 w******e 的大作中提到】

: 用qPCR的话，RNA template定量，DNA standard curve point定量，RT,qPCR
: 都会引进误差，比较头疼。。。我现在用这种方法将就着，测出来的RT
: yield只有10~20%:(

f*y2013-12-04 08:12

12 楼

这。。。。抱得不是大腿，是中间的小腿吧

【在 p*******n 的大作中提到】

a*g2013-12-04 08:12

13 楼

If the primer is okay, whey not q PCR anyway?
take a housekeeping gene, compare your RT product with others from the lab.
The Ct value shouldn't vary that much(less than 2 cycles if same amount and
quality of RNA are used as RT template)

【在 w******e 的大作中提到】

: 怀疑自己的RT yield太低，有什么好方法测吗？PCR的话，可以dilute product直接
: 跟template比，RT之后要想定量只能qPCR，变数太多。
: 请指点。//bow

w*e2013-12-04 08:12

14 楼

it's mainly because my template is weird (a library of short random
sequences), so gene xcript won't be a good standard...

.
and

【在 a*****g 的大作中提到】

:
: If the primer is okay, whey not q PCR anyway?
: take a housekeeping gene, compare your RT product with others from the lab.
: The Ct value shouldn't vary that much(less than 2 cycles if same amount and
: quality of RNA are used as RT template)

a*g2013-12-04 08:12

15 楼

I see.
One time I did try to use the PCR products as standard curve, it's not that
bad if you run a gel and purify the product. It's better to have lots of PCR
products though ( I used 160ul). what do you plan to use to measure the co
ncentration? Nanodrop or picogreen?

【在 w******e 的大作中提到】

: it's mainly because my template is weird (a library of short random
: sequences), so gene xcript won't be a good standard...
:
: .
: and

w*e2013-12-04 08:12

16 楼

thank you for your suggestion. I do have some sort of standard points
for my PCR (i.e., I can quantitate my PCR product reasonablly well).
However, if I don't have a way to accurately measure the amount of starting
RNA template, the whole thing wouldn't make sense.
right now, I use nanodrop to measure the template (which is short ssRNA),
and the standard points (which is short ssDNA). do you have any suggestion
on quantifying the amount more accurately? If I can nail these two,
the yield is easy

【在 a*****g 的大作中提到】

: I see.
: One time I did try to use the PCR products as standard curve, it's not that
: bad if you run a gel and purify the product. It's better to have lots of PCR
: products though ( I used 160ul). what do you plan to use to measure the co
: ncentration? Nanodrop or picogreen?

w*e2013-12-04 08:12

17 楼

多谢信息。我看了眼picogreen，可惜不能用在ssRNA上。最初的template定量
始终是个问题。

【在 T**********t 的大作中提到】

: 用picogreen assay呢？我没用过，不过我知道有用picogreen代替qPCR定量的。

T*t2013-12-04 08:12

18 楼

qRT-PCR？google到的，没用过：
http://www.promega.com/guides/rna_guide/quantifyingrna_qpcr.pdf

【在 w******e 的大作中提到】

: 多谢信息。我看了眼picogreen，可惜不能用在ssRNA上。最初的template定量
: 始终是个问题。

w*e2013-12-04 08:12

19 楼

感觉要做这个就得知道RT的yield，chicken and egg...

【在 T**********t 的大作中提到】

: qRT-PCR？google到的，没用过：
: http://www.promega.com/guides/rna_guide/quantifyingrna_qpcr.pdf

T*t2013-12-04 08:12

20 楼

最初的模板量用nanodrop定量不够么？

【在 w******e 的大作中提到】

: 感觉要做这个就得知道RT的yield，chicken and egg...

w*e2013-12-04 08:12

21 楼

总还是觉得心理别扭。。。或者说是鸵鸟心理，因为如果假设：1.nanodrop定量
RNA/DNA library没问题；2.qPCR efficiency没问题（这个应该没问题，从
standard上来看）；那我的RT yield就铁定是10～20％了。。。

【在 T**********t 的大作中提到】

: 最初的模板量用nanodrop定量不够么？

T*t2013-12-04 08:12

22 楼

呵呵，原来是这么回事。确实如果不用其他方法double check一下是不甘心的。
我自己没做过RNA library，我们实验室有人做的，改天我帮你问一下好了。不过我很
怀疑他们估计都不去算yield的。

【在 w******e 的大作中提到】

: 总还是觉得心理别扭。。。或者说是鸵鸟心理，因为如果假设：1.nanodrop定量
: RNA/DNA library没问题；2.qPCR efficiency没问题（这个应该没问题，从
: standard上来看）；那我的RT yield就铁定是10～20％了。。。

w*e2013-12-04 08:12

23 楼

可不是嘛。。。多谢啦！

【在 T**********t 的大作中提到】

: 呵呵，原来是这么回事。确实如果不用其他方法double check一下是不甘心的。
: 我自己没做过RNA library，我们实验室有人做的，改天我帮你问一下好了。不过我很
: 怀疑他们估计都不去算yield的。