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新鲜出炉的4+单基因文章,几个数据库全搞定!

新鲜出炉的4+单基因文章,几个数据库全搞定!

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今天给大家带来一篇于2022年10月最新发表在Frontiers in Genetics(影响因子4.772)的一篇纯生信文章,本篇文章套路为铜稳态相关的单基因泛癌,抓住了热点,而且结合了单细胞水平的分析,值得大家学习。


一、期刊介绍


二、文章概要

题目:A pan-cancer analysis of copper homeostasis-related gene lipoyltransferase 1: Its potential biological functions and prognosis values

套路:单基因泛癌分析

基因:lipoyltransferase 1 (LIPT1)

数据来源:TCGA

分析策略:表达差异+临床意义+功能富集+交互网络

分析工具:

  • TIMER2.0(http://timer.cistrome.org/) :

分析LIPT1在泛癌中的表达(表达差异)

  • UALCAN数据库(http://ualcan.path.uab.edu/index.html):

分析LIPT1在正常和肿瘤组织中的表达

  • the National Cancer Institute’s CPTAC 数据库(http://ualcan.path.uab.edu/analysis-prot.html

评估LIPT1在总蛋白水平的表达

  • GEPIA2.0 (http://gepia2.cancer-pku.cn/#index

对TCGA和GTEx项目肿瘤样本和正常样本的RNA-seq表达数据进行分析(表达差异),生存分析

  • The Human Protein Atlas (HPA数据库)(https://www.proteinatlas.org/

收录了肿瘤组织,用于查询免疫正常和病理组织切片图

  • cBioPortal (https://www.cbioportal.org/

与突变相关的各种分析及其可视化

  • CancerSEA(http://biocc.hrbmu.edu.cn/CancerSEA/

用于破译癌症单细胞功能状态

  • BioGRID website (https://thebiogrid.org/

分析蛋白质相互作用

  • 仙桃学术(https://www.xiantao.love/

各种生信分析工具


三、文章复现

图1  LIPT1在泛癌组织中的表达。

图1A复现:进入TIMER2.0数据库→点击“Gene_DE”→进入差异分析界面后输入基因名称(LIPT1)→点击“Submit”→得到图1A的结果。

图1B复现:进入仙桃学术(https://www.xiantao.love/)(新版)→生信工具→表达差异[云]疾病vs非疾病→选择云端数据(ACC数据集)→输入并选择分子(LIPT1)→点击确认→得到图1B中ACC的小图,其他几张图片同理可得(选择不同的癌种)。



图1C评估了LIPT1在癌组织和正常组织中总蛋白表达的差异。图1C复现:进入UALCAN数据库(http://ualcan.path.uab.edu/index.html )→点击“CPTAC” →输入分子名称(LIPT1) →选择”Breast Cancer”→点击”Explore” →点击“Total Protein” →得到图1C的乳腺癌的小图,其他几张小图同理可得(选择不同癌种)。


图1D分析了LIPT1和患者病理分期的关系。图1D复现:进入GEPIA2.0数据库(http://gepia2.cancer-pku.cn/#index)

→输入基因名(LIPT1)→点击“Stage Plot” →点击“GoPIA!”→选择癌种BRCA→点击“Add” →选择“Plot Color”→点击“Plot”。重复操作就可以得到图1D的结果图。

图2:LIPT1在正常组织和肿瘤组织的表达差异情况。

图2A-2C比较了LIPT1在肾透明细胞癌(KIRC)、乳腺浸润癌(BRCA)和子宫内膜样癌(UCEC)中和正常组织中的表达差异并在HPA数据库比较了免疫组化,进一步确认LIPT1在肿瘤组织中表达的降低。

LIPT1在肿瘤和正常组织中的表达差异复现:进入UALCAN数据库(http://ualcan.path.uab.edu/index.html)→点击“TCGA”→输入基因名称(LIPT1)→选择肾癌(kidney renal clear cell carcinoma)→点击“Explore” →选择“Expression”。其他小图同理可得(选择不同癌种)。

HPA数据库比较了免疫组化:进入HPA数据库(https://www.proteinatlas.org/)→输入基因名称(LIPT1)→点击“Search” →选择“Tissue“→选择”Kidney“→挑选正常组织免疫组化图→回到第二张图的界面选择”Pathology“→选择”RENAL CANCER“→挑选病理组织免疫组化图

图3:LIPT1基因在泛癌中的预后价值。


图3:LIPT1在泛癌中的预后价值。图3复现:进入仙桃学术(https://www.xiantao.love/)→工具首页→临床意义→[云]生存曲线(KM图)→选择“BLCA数据集”→输入分子(LIPT1)→选择预后参数OS→点击确认。如果想要得到DSS的生存曲线,只需在“预后参数”中选择即可。可以选择其他癌症的数据集,得到多种癌症的生存曲线。


图4:LIPT1在不同癌症中的突变情况

图4A和4B是LIPT1在泛癌中不同甲基化类型在样本中出现频率的列表(图4A)和甲基化位点(图4B)。图4C是3D蛋白结构表现的K123sf*8 甲基化位点。


图4复现:进入cBioPortal数据库(https://www.cbioportal.org/)→输入基因名称(LIPT1)→结果界面中可以看到图4A。

切换至Mutation界面,可以看到图4B


左侧下拉界面点击3D structure,就可以得到图4C(右侧3D结构)。

图5:LIPT1在癌症中启动子甲基化水平分析。

图5复现:进入UALCAN数据库(http://ualcan.path.uab.edu/index.html)→点击“TCGA”分析工具→输入基因名称(LIPT1)→选择“Breast invasive carcinoma”→点击“Explore”→选择“Methylation” →得到箱式图。选择不同的癌症种类可以得到其他箱式图。

图6 LIPT1基因的免疫浸润相关性

图6是免疫细胞和LIPT1在癌症中表达的相关性分析。图6复现:进入TIMER2.0数据库(http://timer.cistrome.org/)→Immune Association栏目的Gene选项→输入基因名称(LIPT1)→选择感兴趣的免疫细胞→点击“Submit” →得到原文的相关性热图。

图7: LIPT1在单细胞水平的表达情况。

进入CancerSEA数据库(http://biocc.hrbmu.edu.cn/CancerSEA/)→

输入基因名称(LIPT1)→点击“Search” 。结果界面可以得到图7的相关性热图(图7A)→分别在“Functional relevance”选项框中选择UM和RB可以得到LIPT1在单细胞水平有显著差异的细胞功能状态(图7B)→选择RB 、UM和AML可以得到t-SNE图(图7C)。

图8:LIPT1相关基因的富集分析。

图8A蛋白互作网络分析。图8A复现:进入BioGRID数据库(https://thebiogrid.org/)→输入基因名称(LIPT1)→点击“Network”。


图8B是LIPT1和基因的相关性分析。图8B复现:进入GEPIA 2.0数据库(http://gepia2.cancer-pku.cn/#index)→选择“Multiple Gene Analysis”→点击Correlation Analysis→输入基因A(LIPT1)和基因B(TSGA10)→添加全部癌种→点击“Plot”。就可以得到相关性散点图。输入不同的B基因就可以得到其他图。

图8C复现:按照文章的步骤,利用数据库导出top100的相关性基因。

输入基因名称(LIPT1)→点击“Similar”点击“GoPIA!”→添加所有的“TCGA Tumor”和“TCGA Normal”的cancer name→点击“List”→几分钟后得到了基因列表。

进入TIMER2.0数据库,点击Gene_Corr分析按钮,输入目标基因和相关性基因。就可以得到图8C。

将100个基因整理。打开仙桃学术(https://www.xiantao.love/)→生信工具→功能聚类→[GOKEGG]分析→上传整理好的100个基因列表数据→点击确认→得到富集分析结果→保存富集分析结果为“GOKEGG-TOP100 GENES”。


打开仙桃学术(https://www.xiantao.love/)→生信工具→功能聚类→[GOKEGG]气泡图→刚才保存的“GOKEGG-TOP100 GENES”结果自动上传到数据栏→点击确认→保存结果或图片。


以上就是这篇文章完整的复现过程。全文一共8张figure,涉及到差异表达,交互网络和功能聚类等模块,我们使用仙桃工具和几个数据库,比较完整地复现了该篇文章。

END

撰文丨锦   鲤
排版丨三叶虫
编辑丨三叶虫


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