直播预告｜基因编辑敲入细胞模型构建的挑战和解决方案

上月，张锋创立的Editas公司在Nature Biotechnology（IF=68.1）上发布了关于专利技术SLEEK的研究论文，数据显示该技术在T细胞、B细胞、iPSC及NK细胞中敲入功能性基因的效率可接近100%，论文通讯作者提到“这可能会为下一代细胞治疗药物带来高效的多重基因敲入策略。”^[1]

可以说，在细胞中实现高效的基因敲入（KI）对于生物医药研究的意义毋庸置疑，如功能基因研究、单克隆抗体制备乃至小分子药物研发、细胞与基因治疗等领域均有KI细胞的广泛应用。但是，落到具体的实验情境中，很多人可能都会眉头紧锁。因为想获得纯合的KI细胞并不是一件容易的事，其构建结果受多方面因素影响，如gRNA的切割效率、基因组发生同源重组的概率、目的片段同源重组的概率等，且难以完全避免sgRNA脱靶。

知识要点提前掉落

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[1]Allen, Alexander G., Khan, Samia Q., Margulies, Carrie M., Viswanathan, Ramya.,  and Lele, Swarali.. "A highly efficient transgene knock-in technology in clinically relevant cell types." Nature biotechnology.

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