今天的试验，神出鬼没，试验plate孔内的1 N NaOH 100ul凭空消失，匪夷所思，百思不得其解

实验步骤简单如下：

SOFIA with Rolling circle DNA amplification (T4 ligase normal standard)

1. Coat plate with : Anti-GFAP antibody.

2. block

3. serum（14samples）

4. Biotin-anti GFAP antibody.

5. Streptavidin

6. Primer: biotin-prostate-primer

7. T4 ligase

PEG4000

    phos-template

8.ф29 DNA polymerase buffer 

       BSA

      each DATP,DGTP,DCTP

       DTTP+DUTP-Texas Red 

      ф29 DNA polymerase

      PBS 

9. 1 N NaOH 

10. Laser test

今天的试验，神出鬼没，试验plate孔内的1 N NaOH 100ul凭空消失，匪夷所思，百思不得其解。

Plate 1

Plate 1, C 和E的3，4,5,6,7,8,9，是样品1，2,3,4,5,6,7，C和E的1,2,10,11,12是PBS。这里最重要的条件是：C和E完全一样。

plate 2

Plate 2, C 和E的3，4,5,6,7,8,9，是样品8，9,10,11,12,13,14，C和E的1,2,10,11,12是PBS。这里最重要的条件是：C和E完全一样。

实验进行到第9步骤，就是加了1 N NaOH （100ul ），零下20度过夜。第二天要进行Laser test的时候，发现，

1. Plate 1, C的3，4,5,6,7,8,9内的100ul 1 N NaOH，不见了，而与之对应的Plate 1, E的3，4,5,6,7,8,9内的100ul 1 N NaOH还在，而C和E的1,2,10,11,12的内的100ul 1 N NaOH还在。

2. Plate 2, C的3，4,5,6,7,8,9内的100ul 1 N NaOH，不见了，而与之对应的Plate 2, E的3，4,5,6,7,8,9内的100ul 1 N NaOH还在，而C和E的1,2,10,11,12的内的100ul 1 N NaOH还在。

这消失的100ul 1 N NaOH，去了哪里？

假如是serum的区别，就是C和E的1,2,10,11,12的内的100ul 1 N NaOH还在（就是PBS还在，而serum不在了），那么，为什么, E的3，4,5,6,7,8,9内的100ul 1 N NaOH还在？而C的3，4,5,6,7,8,9内的100ul 1 N NaOH消失了呢？

这里一个重要的信息是，剩余的 1 N NaOH几乎是100ul，而消失的1 N NaOH的plate孔，很干净，几乎看不见任何液体。

这凭空消失的条件是什么？关键是与之完全对应的E的3，4,5,6,7,8,9内的100ul 1 N NaOH还在.