突然发现用260/280比值评判核酸纯度是完全不可靠的。# Biology - 生物学
r*o
1 楼
最近重新研读了分子克隆第三版，有一个有趣的小发现，好像过去没
听人说过。一般测核酸浓度都是用260nm的光吸收值来决定，同时用
260/280的比值来判断有无蛋白质污染。理想的比值是1.8~2.0左右。
分子克隆第三版专门提到这种判断核酸纯度的办法是不可靠的。原因在
于蛋白质在260nm的消光系数比核酸小很多，即使有相当多的蛋白质污染
，这个比值还是接近于理想的比值。另外，260/280比值尤其不能用于
评判寡聚核甘酸的纯度，因为嘌呤的消光系数比嘧啶大好多，寡聚核甘酸
嘌呤嘧啶组成很可能不平均，所以很可能出现很纯的样品260/280比值却
比较小的情况。
听人说过。一般测核酸浓度都是用260nm的光吸收值来决定，同时用
260/280的比值来判断有无蛋白质污染。理想的比值是1.8~2.0左右。
分子克隆第三版专门提到这种判断核酸纯度的办法是不可靠的。原因在
于蛋白质在260nm的消光系数比核酸小很多，即使有相当多的蛋白质污染
，这个比值还是接近于理想的比值。另外，260/280比值尤其不能用于
评判寡聚核甘酸的纯度，因为嘌呤的消光系数比嘧啶大好多，寡聚核甘酸
嘌呤嘧啶组成很可能不平均，所以很可能出现很纯的样品260/280比值却
比较小的情况。