l*9
2 楼
星期六收到的RFE
要求的交我老公5月到8月的工资单 晕倒了 他5月16号OPT生效 我的case6月20号USCIS
收到 怎么都是在90天内吧 怎么我当时file的时候F-2都是valid的吧
不过不敢不好好准备啊
就解释了一下 什么他没有工作啊 8月8号他的employer帮他file了COS F-1 to H1B啊
还特意说了在90天内啊 F-1是valid的啊
估计就是这个签证官不懂吧 就算之后我老公不能保持身份了 超过90天的话 和我的
case关系大吗?? 求解啊
不过以后大家碰到F-2转F-1的时候 刚好另一个OPT 还是多准备一点 说明一下 也许签
证官就是不懂啊
还有 他要是问我要5月到8月的工资单 我当时是怎么都提交不出来的 才6月份啊 我提
交的时候
反正我是怕了他们这帮人了 太天马行空了
如果我理解有错 大家要告诉我啊
要求的交我老公5月到8月的工资单 晕倒了 他5月16号OPT生效 我的case6月20号USCIS
收到 怎么都是在90天内吧 怎么我当时file的时候F-2都是valid的吧
不过不敢不好好准备啊
就解释了一下 什么他没有工作啊 8月8号他的employer帮他file了COS F-1 to H1B啊
还特意说了在90天内啊 F-1是valid的啊
估计就是这个签证官不懂吧 就算之后我老公不能保持身份了 超过90天的话 和我的
case关系大吗?? 求解啊
不过以后大家碰到F-2转F-1的时候 刚好另一个OPT 还是多准备一点 说明一下 也许签
证官就是不懂啊
还有 他要是问我要5月到8月的工资单 我当时是怎么都提交不出来的 才6月份啊 我提
交的时候
反正我是怕了他们这帮人了 太天马行空了
如果我理解有错 大家要告诉我啊
a*o
3 楼
【 以下文字转载自 Joke 讨论区 】
发信人: hopeusw (云子), 信区: Joke
标 题: Re: 柔妹子,真厉害。 (转载)
发信站: BBS 未名空间站 (Sun Mar 2 16:35:06 2014, 美东)
看了这图,PROPOSAL也不写了,换了衣服去GYM
发信人: hopeusw (云子), 信区: Joke
标 题: Re: 柔妹子,真厉害。 (转载)
发信站: BBS 未名空间站 (Sun Mar 2 16:35:06 2014, 美东)
看了这图,PROPOSAL也不写了,换了衣服去GYM
h*o
4 楼
芒果台实在是很恶心
c*a
5 楼
以前没有用过昆虫细胞,现在需要从SF9 细胞里表达蛋白并纯化. 之前试着用
lipofectamine
tranfect细胞, 没有收集到多少蛋白. 请求有经验的高手给个protocol或者方法,用什
么transfection
reagent比较好. 怎么lyse和纯化蛋白. 谢谢了.
lipofectamine
tranfect细胞, 没有收集到多少蛋白. 请求有经验的高手给个protocol或者方法,用什
么transfection
reagent比较好. 怎么lyse和纯化蛋白. 谢谢了.
l*x
7 楼
不知道叫他们vo是不是寒碜了这个官职,只能说vtc那帮人真的不是不懂,是根本不愿
意懂,
比如我们的case,我们提供的资金证明可是i20上要求的多多了
结果签证官不知道是不会google rmb汇率,还是脑子哪根线搭错,认为你写在
affidavit上那句“保证有30000+支付学费”就是你“只有30000+支付学费”,然后还
自作聪明做了个乘法:30000/9*12=46000?,说你看吧,你钱不够。连你提供的财产证明
看都不看
对于父母支持那块,签证官可能是觉得父母的银行资金证明不能证明他们有direct
accessibility,真是彻底无语了。
本来不想发作
意懂,
比如我们的case,我们提供的资金证明可是i20上要求的多多了
结果签证官不知道是不会google rmb汇率,还是脑子哪根线搭错,认为你写在
affidavit上那句“保证有30000+支付学费”就是你“只有30000+支付学费”,然后还
自作聪明做了个乘法:30000/9*12=46000?,说你看吧,你钱不够。连你提供的财产证明
看都不看
对于父母支持那块,签证官可能是觉得父母的银行资金证明不能证明他们有direct
accessibility,真是彻底无语了。
本来不想发作
J*G
9 楼
费尽心机,结果把杨洋赔进去了。。。
J*n
10 楼
这个不用transfection reagent。
需要先制备P3 virus (就是P1 amplify三次),sf9 cells很容易break,比E.coli更简
单。之后最好ultracentrifuge 40K, 1hour.
要更具体的,上invitrogen或者BD Biosciences看看。他们产生P1 virus所用方法不同。
当然,比较新的BacMam就更简单了。
需要先制备P3 virus (就是P1 amplify三次),sf9 cells很容易break,比E.coli更简
单。之后最好ultracentrifuge 40K, 1hour.
要更具体的,上invitrogen或者BD Biosciences看看。他们产生P1 virus所用方法不同。
当然,比较新的BacMam就更简单了。
l*9
11 楼
是啊 这些VO比我们学校的adviser 差多了
我们学校如果交人民币证明 都不需要自己换算了 adviser自己换算
而且这个RFE adviser也指导我怎么准备 她思路巨清楚 比VO头脑清楚多了
【在 l****x 的大作中提到】![](/moin_static193/solenoid/img/up.png)
: 不知道叫他们vo是不是寒碜了这个官职,只能说vtc那帮人真的不是不懂,是根本不愿
: 意懂,
: 比如我们的case,我们提供的资金证明可是i20上要求的多多了
: 结果签证官不知道是不会google rmb汇率,还是脑子哪根线搭错,认为你写在
: affidavit上那句“保证有30000+支付学费”就是你“只有30000+支付学费”,然后还
: 自作聪明做了个乘法:30000/9*12=46000?,说你看吧,你钱不够。连你提供的财产证明
: 看都不看
: 对于父母支持那块,签证官可能是觉得父母的银行资金证明不能证明他们有direct
: accessibility,真是彻底无语了。
: 本来不想发作
我们学校如果交人民币证明 都不需要自己换算了 adviser自己换算
而且这个RFE adviser也指导我怎么准备 她思路巨清楚 比VO头脑清楚多了
【在 l****x 的大作中提到】
![](/moin_static193/solenoid/img/up.png)
: 不知道叫他们vo是不是寒碜了这个官职,只能说vtc那帮人真的不是不懂,是根本不愿
: 意懂,
: 比如我们的case,我们提供的资金证明可是i20上要求的多多了
: 结果签证官不知道是不会google rmb汇率,还是脑子哪根线搭错,认为你写在
: affidavit上那句“保证有30000+支付学费”就是你“只有30000+支付学费”,然后还
: 自作聪明做了个乘法:30000/9*12=46000?,说你看吧,你钱不够。连你提供的财产证明
: 看都不看
: 对于父母支持那块,签证官可能是觉得父母的银行资金证明不能证明他们有direct
: accessibility,真是彻底无语了。
: 本来不想发作
p*2
13 楼
今天看得我一路紧张~~
n*d
14 楼
"P1 amplify三次"? 靠,有必要吗?
l*9
15 楼
自作聪明做了个乘法:30000/9*12=46000?
笑死了啊
I-20上面不是有tuition books health insurance这些项目吗??
一年都要交tuition 没有放假的啊
不知道他怎么想的
再说父母银行证明 不能用的话 我们干嘛要交这份材料啊 而且你好像还是学校帮着办
的 真是不愿意接受人家 这么多人同意的证明 非要相信自己的智商
【在 l****x 的大作中提到】![](/moin_static193/solenoid/img/up.png)
: 不知道叫他们vo是不是寒碜了这个官职,只能说vtc那帮人真的不是不懂,是根本不愿
: 意懂,
: 比如我们的case,我们提供的资金证明可是i20上要求的多多了
: 结果签证官不知道是不会google rmb汇率,还是脑子哪根线搭错,认为你写在
: affidavit上那句“保证有30000+支付学费”就是你“只有30000+支付学费”,然后还
: 自作聪明做了个乘法:30000/9*12=46000?,说你看吧,你钱不够。连你提供的财产证明
: 看都不看
: 对于父母支持那块,签证官可能是觉得父母的银行资金证明不能证明他们有direct
: accessibility,真是彻底无语了。
: 本来不想发作
笑死了啊
I-20上面不是有tuition books health insurance这些项目吗??
一年都要交tuition 没有放假的啊
不知道他怎么想的
再说父母银行证明 不能用的话 我们干嘛要交这份材料啊 而且你好像还是学校帮着办
的 真是不愿意接受人家 这么多人同意的证明 非要相信自己的智商
【在 l****x 的大作中提到】
![](/moin_static193/solenoid/img/up.png)
: 不知道叫他们vo是不是寒碜了这个官职,只能说vtc那帮人真的不是不懂,是根本不愿
: 意懂,
: 比如我们的case,我们提供的资金证明可是i20上要求的多多了
: 结果签证官不知道是不会google rmb汇率,还是脑子哪根线搭错,认为你写在
: affidavit上那句“保证有30000+支付学费”就是你“只有30000+支付学费”,然后还
: 自作聪明做了个乘法:30000/9*12=46000?,说你看吧,你钱不够。连你提供的财产证明
: 看都不看
: 对于父母支持那块,签证官可能是觉得父母的银行资金证明不能证明他们有direct
: accessibility,真是彻底无语了。
: 本来不想发作
h*w
16 楼
靠,这居然也转过来了...
d*h
19 楼
Re~~
s*o
21 楼
其實我不討厭楊洋,為啥大家都這麼恨她呢
當然,我最愛狗狗!
當然,我最愛狗狗!
y*1
24 楼
一开始喜欢她, 后来越来越不喜欢她。
唱着唱着就开始掉嗓子,
鸡皮疙瘩都蹦出来了。
唱着唱着就开始掉嗓子,
鸡皮疙瘩都蹦出来了。
s*r
28 楼
试一试High-Five 细胞,单层,转染方便
a*n
31 楼
先克隆到bac-to-bac里面,用DH10Bac制作bacmid,用Cellfectin吧bacmid转进sf9,获
得P1 virus,然后amplify到P3。
P1和P2不是不可以用,只是titer很低。直接large scale结果相当烂。
P3收集多了,测过titer不错之后,可以用作seed做large scale(试过roller bottle
啥的,200mL)。
看似前期麻烦,但是比死命转不进去强多了。
得P1 virus,然后amplify到P3。
P1和P2不是不可以用,只是titer很低。直接large scale结果相当烂。
P3收集多了,测过titer不错之后,可以用作seed做large scale(试过roller bottle
啥的,200mL)。
看似前期麻烦,但是比死命转不进去强多了。
相关阅读
千老可以过的比绝大部分码工舒服 请转WORK (转载)Nature Publishing Index 中国研究机构排名做核蛋白乙酰化是不是需要多load一些蛋白才容易检测到?Who's afraid of the referee?JCR 2013 will be released today, June 19, 2013作为千老老婆,bso一下丁香园文献求助平台,仅限大陆地区使用,求如何破解?RNA SEQ vs Array求详细的overlap PCR protocol回高校研究所做教授的看一下求德国结构实验室从进化论转换到码工是不是有点儿太快了何去何从? (转载)最近那么多讨论CS的,首页上还有骂生物post-doc的Paper help,thanks!21世纪是CS的世纪研究干细胞是不特有前途啊?求一篇文献==without basic research==Yeast strain邮寄的问题