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请教一个未知引物序列的技术问题

请教一个未知引物序列的技术问题# Biology - 生物学

A*l2010-07-22 07:07

1 楼

【以下文字转载自 ComputerGraphics 讨论区】
发信人: Apell (A片), 信区: ComputerGraphics
标题: 申请ComputerGraphics版版主 (转载)
发信站: BBS 未名空间站 (Fri Feb 4 12:21:40 2011, 美东)
麻烦看到的人去board版支持我一下，等钻风批准了回来包子谢。
发信人: Apell (A片), 信区: board
标题: 申请ComputerGraphics版版主
发信站: BBS 未名空间站 (Fri Feb 4 12:20:16 2011, 美东)
是否已阅读：1）《站规》2）《版务操作简易手册》?:
是
[申请ID]:
Apell
[申请版面]:
ComputerGraphics
[申请职务]:
版主
[版务经验]:
熟悉telnet,现任ComputerGraphics版副.
[申请纲领]:
现任版主ILM长期没有上线，其实上次经过沟通他已经同意并请支持我申请，本版有记
录，我目前
是板斧，希望能成为版主并且选一些热爱这个领域的人成为板斧一起交流，这个领域本
身很有意
思，也有很多人希望进行技术上的交流，可惜现在因为版主长期不在疏于治理人气实在
比较低，我
希望能把热爱CG，或者喜欢相关computer vision/image processing的人一起拉来讨论。
[版规草案]:
延续现有版规

q*d2010-07-22 07:07

2 楼

请教大家一个技术问题。我用过一个荧光定量PCR试剂盒，效果挺不错，想了解一下引
物和探针的具体序
列，但是试剂盒里这些oligo DNA是混一起的，质谱很难分开。想了一个办法，把扩增
产物上T载测
序，就知道引物的位置，但是具体序列上只知道5‘端开始的序列，却不知引物的3‘端
序列具体在哪里终
止，因为一般引物大约18-25 nt长度，有很多的可能性。各位有没有什么办法解决这个
问题？

q*d2010-07-22 07:07

3 楼

自己顶一下，这是问题是太简单还是太复杂啊？

s*y2010-07-22 07:07

4 楼

Why don't you call the company tech support and ask for the sequence?

【在 q*****d 的大作中提到】

: 请教大家一个技术问题。我用过一个荧光定量PCR试剂盒，效果挺不错，想了解一下引
: 物和探针的具体序
: 列，但是试剂盒里这些oligo DNA是混一起的，质谱很难分开。想了一个办法，把扩增
: 产物上T载测
: 序，就知道引物的位置，但是具体序列上只知道5‘端开始的序列，却不知引物的3‘端
: 序列具体在哪里终
: 止，因为一般引物大约18-25 nt长度，有很多的可能性。各位有没有什么办法解决这个
: 问题？

q*d2010-07-22 07:07

5 楼

要是能问到，还费这么大劲在这里请教专家啊，这是公司的商业机密！

s*y2010-07-22 07:07

6 楼

There is no easy way.
In theory you can seperate the oligos with HPLC, then mass spec them one by
one

【在 q*****d 的大作中提到】

: 要是能问到，还费这么大劲在这里请教专家啊，这是公司的商业机密！

a*o2010-07-22 07:07

7 楼

dePi ur oligo
order a 5'P oligo A w/ known sequence
ligate w/ RNA ligase
use reverse complement oligo of A to do primer extension to get double
strand DNA
clone into T-vector or blunt end vector

【在 q*****d 的大作中提到】