k*g
2 楼
Celltracker Orange染料说明上说要avoid amine- and thiol-containing buffers,
我就不知道配working solution时候用的media到底选啥好,培养E.coli的LB Broth算
amine- and thiol-containing buffer吗,配方Tryptone:Yeast Extract:NaCl=2:1:
2 (Luria),或者Enzymatic Digest of Casein:Yeast Extract:Sodium Chloride=
2:1:1(LENNOX)
我就不知道配working solution时候用的media到底选啥好,培养E.coli的LB Broth算
amine- and thiol-containing buffer吗,配方Tryptone:Yeast Extract:NaCl=2:1:
2 (Luria),或者Enzymatic Digest of Casein:Yeast Extract:Sodium Chloride=
2:1:1(LENNOX)
s*y
4 楼
不知道你这个要做啥,但是amino acid 的确是amine- and thiol-containing
你为什么不能用一般的buffer 来把细菌先洗一洗,然后再染色?
1:
Chloride=
【在 k***g 的大作中提到】![](/moin_static193/solenoid/img/up.png)
: Celltracker Orange染料说明上说要avoid amine- and thiol-containing buffers,
: 我就不知道配working solution时候用的media到底选啥好,培养E.coli的LB Broth算
: amine- and thiol-containing buffer吗,配方Tryptone:Yeast Extract:NaCl=2:1:
: 2 (Luria),或者Enzymatic Digest of Casein:Yeast Extract:Sodium Chloride=
: 2:1:1(LENNOX)
你为什么不能用一般的buffer 来把细菌先洗一洗,然后再染色?
1:
Chloride=
【在 k***g 的大作中提到】
![](/moin_static193/solenoid/img/up.png)
: Celltracker Orange染料说明上说要avoid amine- and thiol-containing buffers,
: 我就不知道配working solution时候用的media到底选啥好,培养E.coli的LB Broth算
: amine- and thiol-containing buffer吗,配方Tryptone:Yeast Extract:NaCl=2:1:
: 2 (Luria),或者Enzymatic Digest of Casein:Yeast Extract:Sodium Chloride=
: 2:1:1(LENNOX)
k*g
5 楼
s*y
6 楼
你应该把细菌离心后用PBS洗两次,然后再放含染料的PBS.
另外,我不知道你具体用哪个dye, 但是在我印象中cell tracker这个dye
是通过和细胞膜表面上的分子连接而染色的,没有必要让细胞去“吃”。
LB
【在 k***g 的大作中提到】![](/moin_static193/solenoid/img/up.png)
: 我现在就是直接拿PBS配working solution染,可是忽然想起来,培养的时候是用的LB
: broth,里面肯定是有各种amino acid吧,那会不会不预先清洗几遍不符合染料说明书
: 的龟腚。还有就是染料是不是在media里面跟细胞incubate会更快被吃进去?所以就想
: 是不是我用PBS配working solution这个方法不妥当了。
另外,我不知道你具体用哪个dye, 但是在我印象中cell tracker这个dye
是通过和细胞膜表面上的分子连接而染色的,没有必要让细胞去“吃”。
LB
【在 k***g 的大作中提到】
![](/moin_static193/solenoid/img/up.png)
: 我现在就是直接拿PBS配working solution染,可是忽然想起来,培养的时候是用的LB
: broth,里面肯定是有各种amino acid吧,那会不会不预先清洗几遍不符合染料说明书
: 的龟腚。还有就是染料是不是在media里面跟细胞incubate会更快被吃进去?所以就想
: 是不是我用PBS配working solution这个方法不妥当了。
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