有遇到过这种情况的吗？# Biology - 生物学
z*i
1 楼
MS找到了两个相互作用的蛋白。最初克隆基因的时候发现不容易做出来，不得已用了
Taq酶，测通之后发现有四个点突变（K and E都有)，当时没有太在意，就这样做下去
了，发现有很强的相互作用。克隆的这个基因是kinase，做了KR突变之后,发现KR和WT
的作用一样(reporter assay)，我心里就有点疑惑了,当然kinase-indepdent的效果也
是有可能的。内源的相互作用没有做，在没有拿到confirmed的data之前，估计老板也
不会买抗体。
期间用pfu还是把这个基因克隆出来了，重复了一下原来的实验，发现重复不出来以前的结果，相互作用很弱，可有可无的那种。
难道我以前看到的是假象吗，真有这么点背的吗？
Taq酶，测通之后发现有四个点突变（K and E都有)，当时没有太在意，就这样做下去
了，发现有很强的相互作用。克隆的这个基因是kinase，做了KR突变之后,发现KR和WT
的作用一样(reporter assay)，我心里就有点疑惑了,当然kinase-indepdent的效果也
是有可能的。内源的相互作用没有做，在没有拿到confirmed的data之前，估计老板也
不会买抗体。
期间用pfu还是把这个基因克隆出来了，重复了一下原来的实验，发现重复不出来以前的结果，相互作用很弱，可有可无的那种。
难道我以前看到的是假象吗，真有这么点背的吗？