s*t
2 楼
是不是必须得用maxi？mini的质量不能做细胞转染？
另外，G418, puro没用完，是放回－20，还是可以放在4度？能stable多久？
多谢！
另外，G418, puro没用完，是放回－20，还是可以放在4度？能stable多久？
多谢！
g*a
3 楼
Same question. I sent email to him/her, no reply.
r*y
4 楼
yes, we use at least 10 ug to transfect 10^5 cells. plant cells though. but
i think it would be similar to animal cells?
【在 s*********t 的大作中提到】
: 是不是必须得用maxi？mini的质量不能做细胞转染？
: 另外，G418, puro没用完，是放回－20，还是可以放在4度？能stable多久？
: 多谢！
i think it would be similar to animal cells?
【在 s*********t 的大作中提到】
: 是不是必须得用maxi？mini的质量不能做细胞转染？
: 另外，G418, puro没用完，是放回－20，还是可以放在4度？能stable多久？
: 多谢！
w*2
5 楼
如果有明确的虚假宣传引起的纠纷，果版会考虑对当事人进行封禁。
s*y
6 楼
Mini 的完全可以
【在 s*********t 的大作中提到】
: 是不是必须得用maxi？mini的质量不能做细胞转染？
: 另外，G418, puro没用完，是放回－20，还是可以放在4度？能stable多久？
: 多谢！
【在 s*********t 的大作中提到】
: 是不是必须得用maxi？mini的质量不能做细胞转染？
: 另外，G418, puro没用完，是放回－20，还是可以放在4度？能stable多久？
: 多谢！
j*g
7 楼
Get my refund as Amazon gift card. Perhaps she/he is super busy these days..
.
.
n*k
8 楼
it depends on the kits/company, the cells, so many factors...this kind of
question is a bit too hard/general to answer...
【在 s******y 的大作中提到】
: Mini 的完全可以
question is a bit too hard/general to answer...
【在 s******y 的大作中提到】
: Mini 的完全可以
d*g
9 楼
got my refund a few days after ordering, got the case today. He/she is a
nice person.
Not a high qualify and possible scratched Iphone 5 paint. Freebie quality.
nice person.
Not a high qualify and possible scratched Iphone 5 paint. Freebie quality.
s*t
10 楼
是吗？多谢
不过我看到有人说mini的plasmid的quality较差，因为没有去掉内毒素，有较多开环和线性，而maxi的去除了内毒素，且
多为超螺旋，更适合转细胞
还有G418和puro该怎么保存？
【在 s******y 的大作中提到】
: Mini 的完全可以
不过我看到有人说mini的plasmid的quality较差，因为没有去掉内毒素，有较多开环和线性，而maxi的去除了内毒素，且
多为超螺旋，更适合转细胞
还有G418和puro该怎么保存？
【在 s******y 的大作中提到】
: Mini 的完全可以
d*6
11 楼
给她发了两封站内信，都看了，彻底不回信了，算了，三块钱的事，就是觉得不守信用
很瞧不上。
【在 d****6 的大作中提到】
: 我和我朋友都没收到你的退款。
很瞧不上。
【在 d****6 的大作中提到】
: 我和我朋友都没收到你的退款。
s*t
12 楼
谢了。
不过不是担心plasmid的量，而是担心质量
有时候只转很少的细胞，mini prep的量是够的，做max太麻烦
想知道mini的到底能否转染细胞
but
【在 r******y 的大作中提到】
: yes, we use at least 10 ug to transfect 10^5 cells. plant cells though. but
: i think it would be similar to animal cells?
不过不是担心plasmid的量，而是担心质量
有时候只转很少的细胞，mini prep的量是够的，做max太麻烦
想知道mini的到底能否转染细胞
but
【在 r******y 的大作中提到】
: yes, we use at least 10 ug to transfect 10^5 cells. plant cells though. but
: i think it would be similar to animal cells?
q*d
13 楼
恩，俺的钱也还没退。。。
s*y
14 楼
如果你要转的是类似Hela, HEK293T 这些大众化的细胞的话，
我亲手做过，用lipofectamine能转。如果你担心内毒素的话，
在做miniprep 的时候额外多洗两次（一次用buffer PB,
然后70%ETOH 洗的这一步多洗一次）
唯一要注意的是大部分mini-prep 出来的质粒浓度比较低，
如果浓度太低（低于50ng/ul) 的话要浓缩。
和线性，而maxi的去除了内毒素，且
【在 s*********t 的大作中提到】
: 是吗？多谢
: 不过我看到有人说mini的plasmid的quality较差，因为没有去掉内毒素，有较多开环和线性，而maxi的去除了内毒素，且
: 多为超螺旋，更适合转细胞
: 还有G418和puro该怎么保存？
我亲手做过，用lipofectamine能转。如果你担心内毒素的话，
在做miniprep 的时候额外多洗两次（一次用buffer PB,
然后70%ETOH 洗的这一步多洗一次）
唯一要注意的是大部分mini-prep 出来的质粒浓度比较低，
如果浓度太低（低于50ng/ul) 的话要浓缩。
和线性，而maxi的去除了内毒素，且
【在 s*********t 的大作中提到】
: 是吗？多谢
: 不过我看到有人说mini的plasmid的quality较差，因为没有去掉内毒素，有较多开环和线性，而maxi的去除了内毒素，且
: 多为超螺旋，更适合转细胞
: 还有G418和puro该怎么保存？
s*r
15 楼
这个depend on你的细胞，如果你的细胞耐粗饲，那没问题。
试一下好了。
谢了。
不过不是担心plasmid的量，而是担心质量
有时候只转很少的细胞，mini prep的量是够的，做max太麻烦
想知道mini的到底能否转染细胞
but
【在 s*********t 的大作中提到】
: 谢了。
: 不过不是担心plasmid的量，而是担心质量
: 有时候只转很少的细胞，mini prep的量是够的，做max太麻烦
: 想知道mini的到底能否转染细胞
:
: but
试一下好了。
谢了。
不过不是担心plasmid的量，而是担心质量
有时候只转很少的细胞，mini prep的量是够的，做max太麻烦
想知道mini的到底能否转染细胞
but
【在 s*********t 的大作中提到】
: 谢了。
: 不过不是担心plasmid的量，而是担心质量
: 有时候只转很少的细胞，mini prep的量是够的，做max太麻烦
: 想知道mini的到底能否转染细胞
:
: but
a*d
16 楼
Try endotoxin removal solution from Sigma if you worry about endotoxin.
http://www.sigmaaldrich.com/catalog/ProductDetail.do?D7=0&N5=SE
G418 and puromycin solution should be stable for weeks at 4 degree.
http://www.sigmaaldrich.com/catalog/ProductDetail.do?D7=0&N5=SE
G418 and puromycin solution should be stable for weeks at 4 degree.
g*3
17 楼
如果你担心的不是mini prep的DNA quantity，那么mini prep是可以的。mini prep的
kit也有好几种，你可以选哪种transfection grade的，没有问题。
http://www.qiagen.com/products/plasmid/qiagenplasmidpurificatio
我以前用过，但不知道是不是这个kit。
【在 s*********t 的大作中提到】
: 是不是必须得用maxi？mini的质量不能做细胞转染？
: 另外，G418, puro没用完，是放回－20，还是可以放在4度？能stable多久？
: 多谢！
kit也有好几种，你可以选哪种transfection grade的，没有问题。
http://www.qiagen.com/products/plasmid/qiagenplasmidpurificatio
我以前用过，但不知道是不是这个kit。
【在 s*********t 的大作中提到】
: 是不是必须得用maxi？mini的质量不能做细胞转染？
: 另外，G418, puro没用完，是放回－20，还是可以放在4度？能stable多久？
: 多谢！
h*y
18 楼
mini kit 可以啊。碱法用酚氯仿抽下做transfection都可以。
要包子！
要包子！
g*5
19 楼
qiagen,invitrogen,fermentus,sigma的小抽试剂盒都用过，hek 没有问题。
c*r
20 楼
恩，我用mini的转过
就是mini出来的量太少，真正大规模使用，还是要用maxi
【在 s******y 的大作中提到】
: Mini 的完全可以
就是mini出来的量太少，真正大规模使用，还是要用maxi
【在 s******y 的大作中提到】
: Mini 的完全可以
A*y
21 楼
Seriously, I though mini, midi, and maxi just telling you the prep size.
Use a quality kit not a kit from an unknown company. Qiagen is my preferred
one.
Use a quality kit not a kit from an unknown company. Qiagen is my preferred
one.
r*y
22 楼
我们用macherey-nagel的，非常好比其他的都便宜 而且他们可以单独买column单独买
buffer。
【在 g*********3 的大作中提到】
: 如果你担心的不是mini prep的DNA quantity，那么mini prep是可以的。mini prep的
: kit也有好几种，你可以选哪种transfection grade的，没有问题。
: http://www.qiagen.com/products/plasmid/qiagenplasmidpurificatio
: 我以前用过，但不知道是不是这个kit。
buffer。
【在 g*********3 的大作中提到】
: 如果你担心的不是mini prep的DNA quantity，那么mini prep是可以的。mini prep的
: kit也有好几种，你可以选哪种transfection grade的，没有问题。
: http://www.qiagen.com/products/plasmid/qiagenplasmidpurificatio
: 我以前用过，但不知道是不是这个kit。
m*e
23 楼
mini prep的没用过，但是有高质量的mini的提质粒的kit完全可以转，也是Qiangen的
，效果很好的
，效果很好的
c*i
24 楼
可以啊，至少HEK293可以，我一般用400ng或800ng转100，000cells，没问题的。
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