Y*E
2 楼
急啊！
Z*5
3 楼
假设有2管质粒a和b，两管质粒的其它序列全部相同，除了某一位点在a中全部
为野生型A；在b中野生型A：突变型G大约为100000:1。
要用什么样的技术才能检测出b中的突变序列呢？最好能得到野生型和突变型的比例。
HRM（高分辨率溶解曲线）行不行？检出的灵敏度是多少？
或者有什么办法能够定量的把b中的突变富集起来？
为野生型A；在b中野生型A：突变型G大约为100000:1。
要用什么样的技术才能检测出b中的突变序列呢？最好能得到野生型和突变型的比例。
HRM（高分辨率溶解曲线）行不行？检出的灵敏度是多少？
或者有什么办法能够定量的把b中的突变富集起来？
m*n
4 楼
不可以放award 里，放 Student/Thesis Supervision 里，属于 Service 下面的一小
块
块
n*y
5 楼
排队去店里买最快
att和verizon网站都可以order no-commitment的机器，不过你得等很久
att和verizon网站都可以order no-commitment的机器，不过你得等很久
w*n
6 楼
PCR可以检测单碱基突变，算比例，我想可以用realtimePCR,但是可能误差很大。
【在 Z******5 的大作中提到】
: 假设有2管质粒a和b，两管质粒的其它序列全部相同，除了某一位点在a中全部
: 为野生型A；在b中野生型A：突变型G大约为100000:1。
: 要用什么样的技术才能检测出b中的突变序列呢？最好能得到野生型和突变型的比例。
: HRM（高分辨率溶解曲线）行不行？检出的灵敏度是多少？
: 或者有什么办法能够定量的把b中的突变富集起来？
【在 Z******5 的大作中提到】
: 假设有2管质粒a和b，两管质粒的其它序列全部相同，除了某一位点在a中全部
: 为野生型A；在b中野生型A：突变型G大约为100000:1。
: 要用什么样的技术才能检测出b中的突变序列呢？最好能得到野生型和突变型的比例。
: HRM（高分辨率溶解曲线）行不行？检出的灵敏度是多少？
: 或者有什么办法能够定量的把b中的突变富集起来？
d*w
7 楼
是co-author吗？是就算吧。发奖的奖上面所有作者的名字都有的啊一般。
如果是毕业论文的话就不好算。
如果是毕业论文的话就不好算。
Y*E
8 楼
大概要排多久呢，现在？
【在 n**y 的大作中提到】
: 排队去店里买最快
: att和verizon网站都可以order no-commitment的机器，不过你得等很久
【在 n**y 的大作中提到】
: 排队去店里买最快
: att和verizon网站都可以order no-commitment的机器，不过你得等很久
A*0
9 楼
polony
请参考George Church Lab 的这个网页：http://arep.med.harvard.edu/Polonator/
不过这技术要求比较特殊的设备。一般lab不一定有。
请参考George Church Lab 的这个网页：http://arep.med.harvard.edu/Polonator/
不过这技术要求比较特殊的设备。一般lab不一定有。
w*g
10 楼
其实是conference paper. 导师是corresponding author. 但得奖的是学生。
【在 d******w 的大作中提到】
: 是co-author吗？是就算吧。发奖的奖上面所有作者的名字都有的啊一般。
: 如果是毕业论文的话就不好算。
【在 d******w 的大作中提到】
: 是co-author吗？是就算吧。发奖的奖上面所有作者的名字都有的啊一般。
: 如果是毕业论文的话就不好算。
a*7
11 楼
刚看了一下，11月16号，verizon的所有容量的
【在 Y**E 的大作中提到】
: 大概要排多久呢，现在？
【在 Y**E 的大作中提到】
: 大概要排多久呢，现在？
d*p
12 楼
最简单办法，转化，稀释，挑单克隆测序，测100个， 看 比率
s*e
13 楼
导师如果是作者之一的话，也可以放进自己的CV。说白了，这个奖是给该文章所有作者
的。
【在 w*********g 的大作中提到】
: 其实是conference paper. 导师是corresponding author. 但得奖的是学生。
的。
【在 w*********g 的大作中提到】
: 其实是conference paper. 导师是corresponding author. 但得奖的是学生。
Y*E
14 楼
verizon的是无锁无合同裸机吗？
要是去店里排队需要等多久呢？
【在 a******7 的大作中提到】
: 刚看了一下，11月16号，verizon的所有容量的
要是去店里排队需要等多久呢？
【在 a******7 的大作中提到】
: 刚看了一下，11月16号，verizon的所有容量的
d*p
15 楼
没有看清你那个 比率 这么 低，deep sequence吧，一个 样品 也就几千块
w*g
16 楼
如果这奖叫Best Graduation Research Award (其实是学生的），那导师CV里怎么写呢
？请指点
【在 s**********e 的大作中提到】
: 导师如果是作者之一的话，也可以放进自己的CV。说白了，这个奖是给该文章所有作者
: 的。
？请指点
【在 s**********e 的大作中提到】
: 导师如果是作者之一的话，也可以放进自己的CV。说白了，这个奖是给该文章所有作者
: 的。
a*7
17 楼
全价机，目测要买month to month的合同，可以到手之后取消合同
店里不知道有没有无锁无合同
【在 Y**E 的大作中提到】
: verizon的是无锁无合同裸机吗？
: 要是去店里排队需要等多久呢？
店里不知道有没有无锁无合同
【在 Y**E 的大作中提到】
: verizon的是无锁无合同裸机吗？
: 要是去店里排队需要等多久呢？
s*s
18 楼
有一个很变态的方法，如果你一直要做这样的检测可能有用，
否则你就deep seq吧
这个方法类似的去年好像有一个检查癌症单碱基突变的nature还是
science文章有，为你的改编一下大概是这样：首先PCR把你要的这段
P出来(cycle不要太多), 然后加热退火杂交，因为你的突变型很少，
所以大多数是完美双链，小部分是有一个mismatch的dsDNA. 这个东西
克隆到特定的载体里面，转化有识别mismatch的ecoli. 有mismatch的
就切开修了，顺便把载体里面下游的一个特定结构（比如loop)的致死
或者抗药基因也修掉了；否则不开修，这个转化子活不了。这样，你
spike几个不同比例的control，用转化colony多少做标准曲线就可以估计了
【在 Z******5 的大作中提到】
: 假设有2管质粒a和b，两管质粒的其它序列全部相同，除了某一位点在a中全部
: 为野生型A；在b中野生型A：突变型G大约为100000:1。
: 要用什么样的技术才能检测出b中的突变序列呢？最好能得到野生型和突变型的比例。
: HRM（高分辨率溶解曲线）行不行？检出的灵敏度是多少？
: 或者有什么办法能够定量的把b中的突变富集起来？
否则你就deep seq吧
这个方法类似的去年好像有一个检查癌症单碱基突变的nature还是
science文章有，为你的改编一下大概是这样：首先PCR把你要的这段
P出来(cycle不要太多), 然后加热退火杂交，因为你的突变型很少，
所以大多数是完美双链，小部分是有一个mismatch的dsDNA. 这个东西
克隆到特定的载体里面，转化有识别mismatch的ecoli. 有mismatch的
就切开修了，顺便把载体里面下游的一个特定结构（比如loop)的致死
或者抗药基因也修掉了；否则不开修，这个转化子活不了。这样，你
spike几个不同比例的control，用转化colony多少做标准曲线就可以估计了
【在 Z******5 的大作中提到】
: 假设有2管质粒a和b，两管质粒的其它序列全部相同，除了某一位点在a中全部
: 为野生型A；在b中野生型A：突变型G大约为100000:1。
: 要用什么样的技术才能检测出b中的突变序列呢？最好能得到野生型和突变型的比例。
: HRM（高分辨率溶解曲线）行不行？检出的灵敏度是多少？
: 或者有什么办法能够定量的把b中的突变富集起来？
l*s
19 楼
Advisor of Best Graduation Research Awardee
【在 w*********g 的大作中提到】
: 如果这奖叫Best Graduation Research Award (其实是学生的），那导师CV里怎么写呢
: ？请指点
【在 w*********g 的大作中提到】
: 如果这奖叫Best Graduation Research Award (其实是学生的），那导师CV里怎么写呢
: ？请指点
l*a
20 楼
deep seq
n*g
21 楼
Agree.
见过只要学生来问问题 (学生是Dean's list student, presidential scholar,XX
honored student，etc.), 就在自己的简历上列 advisor of ....
不过人家好像也没列错。
【在 l*******s 的大作中提到】
: Advisor of Best Graduation Research Awardee
见过只要学生来问问题 (学生是Dean's list student, presidential scholar,XX
honored student，etc.), 就在自己的简历上列 advisor of ....
不过人家好像也没列错。
【在 l*******s 的大作中提到】
: Advisor of Best Graduation Research Awardee
Z*5
22 楼
假设有2管质粒a和b，两管质粒的其它序列全部相同，除了某一位点在a中全部
为野生型A；在b中野生型A：突变型G大约为100000:1。
要用什么样的技术才能检测出b中的突变序列呢？最好能得到野生型和突变型的比例。
HRM（高分辨率溶解曲线）行不行？检出的灵敏度是多少？
或者有什么办法能够定量的把b中的突变富集起来？
为野生型A；在b中野生型A：突变型G大约为100000:1。
要用什么样的技术才能检测出b中的突变序列呢？最好能得到野生型和突变型的比例。
HRM（高分辨率溶解曲线）行不行？检出的灵敏度是多少？
或者有什么办法能够定量的把b中的突变富集起来？
w*g
23 楼
非常感谢!
【在 l*******s 的大作中提到】
: Advisor of Best Graduation Research Awardee
【在 l*******s 的大作中提到】
: Advisor of Best Graduation Research Awardee
w*n
24 楼
PCR可以检测单碱基突变，算比例，我想可以用realtimePCR,但是可能误差很大。
【在 Z******5 的大作中提到】
: 假设有2管质粒a和b，两管质粒的其它序列全部相同，除了某一位点在a中全部
: 为野生型A；在b中野生型A：突变型G大约为100000:1。
: 要用什么样的技术才能检测出b中的突变序列呢？最好能得到野生型和突变型的比例。
: HRM（高分辨率溶解曲线）行不行？检出的灵敏度是多少？
: 或者有什么办法能够定量的把b中的突变富集起来？
【在 Z******5 的大作中提到】
: 假设有2管质粒a和b，两管质粒的其它序列全部相同，除了某一位点在a中全部
: 为野生型A；在b中野生型A：突变型G大约为100000:1。
: 要用什么样的技术才能检测出b中的突变序列呢？最好能得到野生型和突变型的比例。
: HRM（高分辨率溶解曲线）行不行？检出的灵敏度是多少？
: 或者有什么办法能够定量的把b中的突变富集起来？
L*s
25 楼
这难道不算是所有作者的奖？
【在 w*********g 的大作中提到】
: 放在Award里吗？毕竟不是导师得的奖，能放吗？
【在 w*********g 的大作中提到】
: 放在Award里吗？毕竟不是导师得的奖，能放吗？
A*0
26 楼
polony
请参考George Church Lab 的这个网页：http://arep.med.harvard.edu/Polonator/
不过这技术要求比较特殊的设备。一般lab不一定有。
请参考George Church Lab 的这个网页：http://arep.med.harvard.edu/Polonator/
不过这技术要求比较特殊的设备。一般lab不一定有。
m*m
27 楼
关键是奖的名字不对
比如学生论文奖，青年学者论文奖，而你早已不是学生而且年纪很大了
和你的身份不一致，这时候就有点纠结
【在 L***s 的大作中提到】
: 这难道不算是所有作者的奖？
比如学生论文奖，青年学者论文奖，而你早已不是学生而且年纪很大了
和你的身份不一致，这时候就有点纠结
【在 L***s 的大作中提到】
: 这难道不算是所有作者的奖？
d*p
28 楼
最简单办法，转化，稀释，挑单克隆测序，测100个， 看 比率
b*h
29 楼
我见过有full prof还得young scientist award的，获奖者年纪可能倒也不大，40左右
？而且列出的大部分奖项都是学生得的奖，best student paper，best student
presentation
？而且列出的大部分奖项都是学生得的奖，best student paper，best student
presentation
d*p
30 楼
没有看清你那个 比率 这么 低，deep sequence吧，一个 样品 也就几千块
w*g
31 楼
是他当学生时的奖呢，还是他的学生的奖？列在哪一栏里呢？
【在 b******h 的大作中提到】
: 我见过有full prof还得young scientist award的，获奖者年纪可能倒也不大，40左右
: ？而且列出的大部分奖项都是学生得的奖，best student paper，best student
: presentation
【在 b******h 的大作中提到】
: 我见过有full prof还得young scientist award的，获奖者年纪可能倒也不大，40左右
: ？而且列出的大部分奖项都是学生得的奖，best student paper，best student
: presentation
s*s
32 楼
有一个很变态的方法，如果你一直要做这样的检测可能有用，
否则你就deep seq吧
这个方法类似的去年好像有一个检查癌症单碱基突变的nature还是
science文章有，为你的改编一下大概是这样：首先PCR把你要的这段
P出来(cycle不要太多), 然后加热退火杂交，因为你的突变型很少，
所以大多数是完美双链，小部分是有一个mismatch的dsDNA. 这个东西
克隆到特定的载体里面，转化有识别mismatch的ecoli. 有mismatch的
就切开修了，顺便把载体里面下游的一个特定结构（比如loop)的致死
或者抗药基因也修掉了；否则不开修，这个转化子活不了。这样，你
spike几个不同比例的control，用转化colony多少做标准曲线就可以估计了
【在 Z******5 的大作中提到】
: 假设有2管质粒a和b，两管质粒的其它序列全部相同，除了某一位点在a中全部
: 为野生型A；在b中野生型A：突变型G大约为100000:1。
: 要用什么样的技术才能检测出b中的突变序列呢？最好能得到野生型和突变型的比例。
: HRM（高分辨率溶解曲线）行不行？检出的灵敏度是多少？
: 或者有什么办法能够定量的把b中的突变富集起来？
否则你就deep seq吧
这个方法类似的去年好像有一个检查癌症单碱基突变的nature还是
science文章有，为你的改编一下大概是这样：首先PCR把你要的这段
P出来(cycle不要太多), 然后加热退火杂交，因为你的突变型很少，
所以大多数是完美双链，小部分是有一个mismatch的dsDNA. 这个东西
克隆到特定的载体里面，转化有识别mismatch的ecoli. 有mismatch的
就切开修了，顺便把载体里面下游的一个特定结构（比如loop)的致死
或者抗药基因也修掉了；否则不开修，这个转化子活不了。这样，你
spike几个不同比例的control，用转化colony多少做标准曲线就可以估计了
【在 Z******5 的大作中提到】
: 假设有2管质粒a和b，两管质粒的其它序列全部相同，除了某一位点在a中全部
: 为野生型A；在b中野生型A：突变型G大约为100000:1。
: 要用什么样的技术才能检测出b中的突变序列呢？最好能得到野生型和突变型的比例。
: HRM（高分辨率溶解曲线）行不行？检出的灵敏度是多少？
: 或者有什么办法能够定量的把b中的突变富集起来？
v*l
33 楼
专列一项trainee's honor/award。我认为这一项比自己得奖还有意义。
l*a
34 楼
deep seq
s*y
35 楼
这个是个好主意。
我也有学生和博士后得了几个奖，一直不知道该怎么列呢。
【在 v***l 的大作中提到】
: 专列一项trainee's honor/award。我认为这一项比自己得奖还有意义。
我也有学生和博士后得了几个奖，一直不知道该怎么列呢。
【在 v***l 的大作中提到】
: 专列一项trainee's honor/award。我认为这一项比自己得奖还有意义。
Z*5
36 楼
我在网上查到一些办法，比如cold PCR富集啥的。
自己试过构建野生型和突变型质粒，然后按照1:1000到1:100梯度稀释，用sybgreen扩
增检测Tm值，然后做标准曲线。 扩增片段80bp，要检测的位点在中间。 发现A到G的突
变Tm值升高了0.5度。G到T的突变Tm值没变化。 然后用梯度稀释的比例值与Tm值做回归
，能得到R方0.95的回归曲线。但是如果加上bar值，各组Tm之间其实根本没有统计差别
。同时又由于用的是ABI7500，又是不饱和染料sybgreen，分辨率也就0.5度，这个方法
也就作罢。
后来尝试在突变位点附件做定点突变PCR，制造出酶切位点（野生型能切，突变型不能
切），结果神奇的发现药物处理第二代后，细胞中积累的突变就有50%至高了，完全不
想一开始自己想象的千分之一、万分之一。
自己试过构建野生型和突变型质粒，然后按照1:1000到1:100梯度稀释，用sybgreen扩
增检测Tm值，然后做标准曲线。 扩增片段80bp，要检测的位点在中间。 发现A到G的突
变Tm值升高了0.5度。G到T的突变Tm值没变化。 然后用梯度稀释的比例值与Tm值做回归
，能得到R方0.95的回归曲线。但是如果加上bar值，各组Tm之间其实根本没有统计差别
。同时又由于用的是ABI7500，又是不饱和染料sybgreen，分辨率也就0.5度，这个方法
也就作罢。
后来尝试在突变位点附件做定点突变PCR，制造出酶切位点（野生型能切，突变型不能
切），结果神奇的发现药物处理第二代后，细胞中积累的突变就有50%至高了，完全不
想一开始自己想象的千分之一、万分之一。
b*h
37 楼
学生的奖
跟其本人的奖啥的都列在一起
【在 w*********g 的大作中提到】
: 是他当学生时的奖呢，还是他的学生的奖？列在哪一栏里呢？
跟其本人的奖啥的都列在一起
【在 w*********g 的大作中提到】
: 是他当学生时的奖呢，还是他的学生的奖？列在哪一栏里呢？
l*g
38 楼
用COLD-PCR最低监测过0.1%含量的突变，你这个估计要用deep sequencing
【在 Z******5 的大作中提到】
: 假设有2管质粒a和b，两管质粒的其它序列全部相同，除了某一位点在a中全部
: 为野生型A；在b中野生型A：突变型G大约为100000:1。
: 要用什么样的技术才能检测出b中的突变序列呢？最好能得到野生型和突变型的比例。
: HRM（高分辨率溶解曲线）行不行？检出的灵敏度是多少？
: 或者有什么办法能够定量的把b中的突变富集起来？
【在 Z******5 的大作中提到】
: 假设有2管质粒a和b，两管质粒的其它序列全部相同，除了某一位点在a中全部
: 为野生型A；在b中野生型A：突变型G大约为100000:1。
: 要用什么样的技术才能检测出b中的突变序列呢？最好能得到野生型和突变型的比例。
: HRM（高分辨率溶解曲线）行不行？检出的灵敏度是多少？
: 或者有什么办法能够定量的把b中的突变富集起来？
w*g
39 楼
那叫个啥名字呢?
【在 b******h 的大作中提到】
: 学生的奖
: 跟其本人的奖啥的都列在一起
【在 b******h 的大作中提到】
: 学生的奖
: 跟其本人的奖啥的都列在一起
L*s
40 楼
我学生得过一个我们全society每年一个的scholarship，$24000。给学生，但是propos
al要老板写，通知拿到与否也是直接通知老板。
【在 s******y 的大作中提到】
: 这个是个好主意。
: 我也有学生和博士后得了几个奖，一直不知道该怎么列呢。
al要老板写，通知拿到与否也是直接通知老板。
【在 s******y 的大作中提到】
: 这个是个好主意。
: 我也有学生和博士后得了几个奖，一直不知道该怎么列呢。
L*s
41 楼
哦... 论文还是可以算的。毕竟你是联合作者。
要是最佳博士论文就不行了。
【在 m****m 的大作中提到】
: 关键是奖的名字不对
: 比如学生论文奖，青年学者论文奖，而你早已不是学生而且年纪很大了
: 和你的身份不一致，这时候就有点纠结
要是最佳博士论文就不行了。
【在 m****m 的大作中提到】
: 关键是奖的名字不对
: 比如学生论文奖，青年学者论文奖，而你早已不是学生而且年纪很大了
: 和你的身份不一致，这时候就有点纠结
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