请推荐一个质谱灵敏度高的地方 - 未名空间MITBBS历史存档

请推荐一个质谱灵敏度高的地方# Biology - 生物学

c*s2012-02-24 08:02

1 楼

上周接了一个offer，由于行业，职位，location都比较满意，收到hr电话就从了。当
时已经定了这周还有另外一个onsite，今天打电话给这周去onsite的公司取消
interview的时候，hr问我接的offer多少钱，我老实告诉了（base 75k，bonus不
guaranteed，统计fresh MS，有intern经历，在NYC）。hr说俺要低了，应该negotiate
一下再接，还说他们公司能付75k~85k啥的（他们在康州）。。。说得俺心里麻麻地。
sigh，虽然决定不去onsite了，被hr搅得有点小小不爽。。。
PS,刚才给这个hr发email confirm了，还是不去onsite了，hr回信说：sounds good, I hope my negotiating advice helped a bit?!
纠结死我了，这个hr是不是存心让我不爽呀。。。还是确实要低了？！

s*t2012-02-24 08:02

2 楼

请推荐一个地方做质谱，要灵敏度足够好。
我们实验室也有合作的做质谱的地方，不过感觉技术不行。我做IP之后，western能检
测到的，跟input相比差不多有50％富集的蛋白，他们质谱居然打不到。而且那个蛋白
不是质谱不能检测，因为别的实验可以做质谱监测到。所以我担心是他们质谱灵敏度不
够。
所以想找一个技术很好，质谱灵敏度很高的实验室或者公司去做
请问怎么样知道质谱灵敏度高呢？需要什么样的质谱仪？
质谱至少应该能检测到1 ng的蛋白质吧？
谢谢！

j*n2012-02-24 08:02

3 楼

他很奇怪。

w*s2012-02-24 08:02

4 楼

frankly u better figure out how to get your IP working.. instead of
complaining without knowing anything..

G*i2012-02-24 08:02

5 楼

甭理那厮
你已经接受了的Offer
而且当初不是已经满意了嘛
没啥好不爽的
自己开心就好

negotiate
I hope my negotiating advice helped a bit?!

【在 c*********s 的大作中提到】

: 上周接了一个offer，由于行业，职位，location都比较满意，收到hr电话就从了。当
: 时已经定了这周还有另外一个onsite，今天打电话给这周去onsite的公司取消
: interview的时候，hr问我接的offer多少钱，我老实告诉了（base 75k，bonus不
: guaranteed，统计fresh MS，有intern经历，在NYC）。hr说俺要低了，应该negotiate
: 一下再接，还说他们公司能付75k~85k啥的（他们在康州）。。。说得俺心里麻麻地。
: sigh，虽然决定不去onsite了，被hr搅得有点小小不爽。。。
: PS,刚才给这个hr发email confirm了，还是不去onsite了，hr回信说：sounds good, I hope my negotiating advice helped a bit?!
: 纠结死我了，这个hr是不是存心让我不爽呀。。。还是确实要低了？！

s*t2012-02-24 08:02

6 楼

不是做了western了吗
此外还有银染
western能检测到并且量还不错，只能是质谱灵敏度的问题了吧

【在 w****s 的大作中提到】

: frankly u better figure out how to get your IP working.. instead of
: complaining without knowing anything..

k*a2012-02-24 08:02

7 楼

你都不去onsite，就不要纠结了吧
而且康州的生活比纽约boring好多的。。。

negotiate
I hope my negotiating advice helped a bit?!

【在 c*********s 的大作中提到】

: 上周接了一个offer，由于行业，职位，location都比较满意，收到hr电话就从了。当
: 时已经定了这周还有另外一个onsite，今天打电话给这周去onsite的公司取消
: interview的时候，hr问我接的offer多少钱，我老实告诉了（base 75k，bonus不
: guaranteed，统计fresh MS，有intern经历，在NYC）。hr说俺要低了，应该negotiate
: 一下再接，还说他们公司能付75k~85k啥的（他们在康州）。。。说得俺心里麻麻地。
: sigh，虽然决定不去onsite了，被hr搅得有点小小不爽。。。
: PS,刚才给这个hr发email confirm了，还是不去onsite了，hr回信说：sounds good, I hope my negotiating advice helped a bit?!
: 纠结死我了，这个hr是不是存心让我不爽呀。。。还是确实要低了？！

r*e2012-02-24 08:02

8 楼

我有一个蛋白，考染都很清楚的带。
结果信号很差，他们说从胶上洗脱蛋白很难（或者电离很难，我不是很懂）。我是想看
整个蛋白分子量。
但是酶（trypsin）切过以后的小片段，据说很好做。
我对这不大懂，提供一点信息而已。

【在 s*********t 的大作中提到】

: 不是做了western了吗
: 此外还有银染
: western能检测到并且量还不错，只能是质谱灵敏度的问题了吧

m*n2012-02-24 08:02

9 楼

negotiate
I hope my negotiating advice helped a bit?!
你自己满意就行，管别人说三道四干啥？

【在 c*********s 的大作中提到】

: 上周接了一个offer，由于行业，职位，location都比较满意，收到hr电话就从了。当
: 时已经定了这周还有另外一个onsite，今天打电话给这周去onsite的公司取消
: interview的时候，hr问我接的offer多少钱，我老实告诉了（base 75k，bonus不
: guaranteed，统计fresh MS，有intern经历，在NYC）。hr说俺要低了，应该negotiate
: 一下再接，还说他们公司能付75k~85k啥的（他们在康州）。。。说得俺心里麻麻地。
: sigh，虽然决定不去onsite了，被hr搅得有点小小不爽。。。
: PS,刚才给这个hr发email confirm了，还是不去onsite了，hr回信说：sounds good, I hope my negotiating advice helped a bit?!
: 纠结死我了，这个hr是不是存心让我不爽呀。。。还是确实要低了？！

K*S2012-02-24 08:02

10 楼

Theoretically, 1 ng is enough for protein ID and MRM if you use LC-MS/MS
based method. MALDI needs more.
In reality, lots of factors contribute to sensitivity.

【在 s*********t 的大作中提到】

: 请推荐一个地方做质谱，要灵敏度足够好。
: 我们实验室也有合作的做质谱的地方，不过感觉技术不行。我做IP之后，western能检
: 测到的，跟input相比差不多有50％富集的蛋白，他们质谱居然打不到。而且那个蛋白
: 不是质谱不能检测，因为别的实验可以做质谱监测到。所以我担心是他们质谱灵敏度不
: 够。
: 所以想找一个技术很好，质谱灵敏度很高的实验室或者公司去做
: 请问怎么样知道质谱灵敏度高呢？需要什么样的质谱仪？
: 质谱至少应该能检测到1 ng的蛋白质吧？
: 谢谢！

n*r2012-02-24 08:02

11 楼

你最后拿到offer hr有钱的
不甘心而已

negotiate
I hope my negotiating advice helped a bit?!

【在 c*********s 的大作中提到】

: 上周接了一个offer，由于行业，职位，location都比较满意，收到hr电话就从了。当
: 时已经定了这周还有另外一个onsite，今天打电话给这周去onsite的公司取消
: interview的时候，hr问我接的offer多少钱，我老实告诉了（base 75k，bonus不
: guaranteed，统计fresh MS，有intern经历，在NYC）。hr说俺要低了，应该negotiate
: 一下再接，还说他们公司能付75k~85k啥的（他们在康州）。。。说得俺心里麻麻地。
: sigh，虽然决定不去onsite了，被hr搅得有点小小不爽。。。
: PS,刚才给这个hr发email confirm了，还是不去onsite了，hr回信说：sounds good, I hope my negotiating advice helped a bit?!
: 纠结死我了，这个hr是不是存心让我不爽呀。。。还是确实要低了？！

K*S2012-02-24 08:02

12 楼

silver stain is notorious for not very compatible with mass spec.

【在 s*********t 的大作中提到】

: 不是做了western了吗
: 此外还有银染
: western能检测到并且量还不错，只能是质谱灵敏度的问题了吧

x*r2012-02-24 08:02

13 楼

同意！不要理那个 HR。他就是捣乱而已。

【在 G******i 的大作中提到】

: 甭理那厮
: 你已经接受了的Offer
: 而且当初不是已经满意了嘛
: 没啥好不爽的
: 自己开心就好
:
: negotiate
: I hope my negotiating advice helped a bit?!

K*S2012-02-24 08:02

14 楼

it is indeed very difficult to get intact protein out of sds gel.

【在 r***e 的大作中提到】

: 我有一个蛋白，考染都很清楚的带。
: 结果信号很差，他们说从胶上洗脱蛋白很难（或者电离很难，我不是很懂）。我是想看
: 整个蛋白分子量。
: 但是酶（trypsin）切过以后的小片段，据说很好做。
: 我对这不大懂，提供一点信息而已。

s*t2012-02-24 08:02

15 楼

那是在溶液里面直接去打，还是跑胶之后再打哪个好，哪个更灵敏

【在 K******S 的大作中提到】

: it is indeed very difficult to get intact protein out of sds gel.

h*s2012-02-24 08:02

16 楼

LC-MS/MS... Orbitrap

K*S2012-02-24 08:02

17 楼

if you want to measure intact protein mass, just give them solution.

【在 s*********t 的大作中提到】

: 那是在溶液里面直接去打，还是跑胶之后再打哪个好，哪个更灵敏

s*t2012-02-24 08:02

18 楼

请问什么是intact protein？不都是得酶切成肽段吗
帮我做质谱的地方说不要溶液，只要切胶。这也是我不想再找他们的原因，直接打溶液
总比切胶，要少损失一些蛋白，灵敏度也高吧？

【在 K******S 的大作中提到】

: if you want to measure intact protein mass, just give them solution.

K*S2012-02-24 08:02

19 楼

that ID said "我是想看整个蛋白分子量"

【在 s*********t 的大作中提到】

: 请问什么是intact protein？不都是得酶切成肽段吗
: 帮我做质谱的地方说不要溶液，只要切胶。这也是我不想再找他们的原因，直接打溶液
: 总比切胶，要少损失一些蛋白，灵敏度也高吧？