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蛋白催化中心# Biology - 生物学
x*k
1
Since I did not hire a lawyer for Eb-1B, do I sign the cover letter myself?
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d*0
2
【 以下文字转载自 Military 讨论区 】
发信人: happyjerry (jerry), 信区: Military
标 题: 美国女留学生昆明爬山被强奸 破案后愉快地与民警合影留念
发信站: BBS 未名空间站 (Sat May 22 23:40:31 2010, 美东)
女留学生爬西山被强奸
12月15日中午12时许,昆明警方接到一名美国姑娘的报案,称其在西山游玩时,遭
到一名中国男子的抢劫、强奸。
通过玛丽自述,警方了解到,她是北京某大学的美国留学生,当天上午,她独自一
人到西山游玩。上山途中,一名中国男子悄悄尾随其后。当行至太华古道太华寺围墙旁
时,该男子突然掏出一把刀子将玛丽挟持到旁边的树林中,随后将玛丽身上的一张美国
信用卡、美国驾照和一部手机、一部相机及596元现金洗劫一空,并对玛丽实施强奸后
扬长而去。在反抗中,玛丽左手食指被刀划伤。
7小时后色狼就被抓
接报后,昆明市公安局西山分局刑侦大队、出入境管理中队以及市局刑侦支队、出
入境管理局民警及当地派出所干警,立即赶往现场展开侦查工作。与此同时昆明市公安
局出入境管理民警根据涉外案件管辖分工,迅速查明报案人身份
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x*o
3
有个问题想请教大家一下。做的一个蛋白是酶,结构已经解析出来了,催化肽键断裂。
预测的催化三联体中2个残基出现在活性中心,另外一个残基(x)离活性中心很远,通
过序列比对确定这个远离的残基就是催化三联体之一,很保守。如果是变构结合的话,
我用itc测了好几个底物也看不见结合放热。和已知的同源结构进行结构比对,也发现
那2个残基位置都对应,就是x很不对。我怀疑有没有可能是Zymogen,或者需要啥附因
子之类的激活它。没经验啊,希望大家给点意见,小弟还指望这个毕业呢。多谢多谢
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c*a
4
No, the petitioner (employer) signs the letter. You are beneficiary.
You sign the cover letter if you apply for eb1a.
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s3
5
这个估计不抢劫的话也许就不报案了
也许还能得点消费啥的

【在 d*****0 的大作中提到】
: 【 以下文字转载自 Military 讨论区 】
: 发信人: happyjerry (jerry), 信区: Military
: 标 题: 美国女留学生昆明爬山被强奸 破案后愉快地与民警合影留念
: 发信站: BBS 未名空间站 (Sat May 22 23:40:31 2010, 美东)
: 女留学生爬西山被强奸
: 12月15日中午12时许,昆明警方接到一名美国姑娘的报案,称其在西山游玩时,遭
: 到一名中国男子的抢劫、强奸。
: 通过玛丽自述,警方了解到,她是北京某大学的美国留学生,当天上午,她独自一
: 人到西山游玩。上山途中,一名中国男子悄悄尾随其后。当行至太华古道太华寺围墙旁
: 时,该男子突然掏出一把刀子将玛丽挟持到旁边的树林中,随后将玛丽身上的一张美国

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l*1
6
if 尿激酶: by small-angle X-ray scattering paper:
//www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/21669207
if 丝氨酸蛋白酶 you also hlod antibody of it,
then try by Surface Plasmon Resonance Analysis (SPR)
//www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/19047064

【在 x***o 的大作中提到】
: 有个问题想请教大家一下。做的一个蛋白是酶,结构已经解析出来了,催化肽键断裂。
: 预测的催化三联体中2个残基出现在活性中心,另外一个残基(x)离活性中心很远,通
: 过序列比对确定这个远离的残基就是催化三联体之一,很保守。如果是变构结合的话,
: 我用itc测了好几个底物也看不见结合放热。和已知的同源结构进行结构比对,也发现
: 那2个残基位置都对应,就是x很不对。我怀疑有没有可能是Zymogen,或者需要啥附因
: 子之类的激活它。没经验啊,希望大家给点意见,小弟还指望这个毕业呢。多谢多谢

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x*k
7
Thanks. I am talking about the cover letter that says what is included in
the package, not the petition letter. My employer signed the petition letter
, but ususally the lawyer sign the coverletter. Are you sure the cover
letter should be signed by the employer as well?

【在 c******a 的大作中提到】
: No, the petitioner (employer) signs the letter. You are beneficiary.
: You sign the cover letter if you apply for eb1a.

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o*l
8
jp:在反抗中,玛丽左手食指被刀划伤。
确定这个不是sm?
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x*o
9
是 Cysteine proteinases,多谢,先看看
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x*k
10
Or I don't really need a cover letter?

【在 c******a 的大作中提到】
: No, the petitioner (employer) signs the letter. You are beneficiary.
: You sign the cover letter if you apply for eb1a.

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E*d
11
嗯,这个新闻再次强化白妞没有廉耻的印象。
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l*1
12
if cysteine cathepsins
please go to:
//www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/20860624
and
//www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/9299326
ps: if you are satisfied with this answer,
BAOZI one please transfer to my mitbbs financial account,
Wei-bi 10.

【在 x***o 的大作中提到】
: 是 Cysteine proteinases,多谢,先看看
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w*c
13
I think it is a check list that may be not need signature.
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s*a
14
心真宽

【在 d*****0 的大作中提到】
: 【 以下文字转载自 Military 讨论区 】
: 发信人: happyjerry (jerry), 信区: Military
: 标 题: 美国女留学生昆明爬山被强奸 破案后愉快地与民警合影留念
: 发信站: BBS 未名空间站 (Sat May 22 23:40:31 2010, 美东)
: 女留学生爬西山被强奸
: 12月15日中午12时许,昆明警方接到一名美国姑娘的报案,称其在西山游玩时,遭
: 到一名中国男子的抢劫、强奸。
: 通过玛丽自述,警方了解到,她是北京某大学的美国留学生,当天上午,她独自一
: 人到西山游玩。上山途中,一名中国男子悄悄尾随其后。当行至太华古道太华寺围墙旁
: 时,该男子突然掏出一把刀子将玛丽挟持到旁边的树林中,随后将玛丽身上的一张美国

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e*s
15
没太看明白。
你想研究这个X是不是直接和催化相关?
底物不能结合是WT还是mutants? 确定你的酶是活的吗,有测过WT的酶活吗?特别如果
底物不能结合的话。

【在 x***o 的大作中提到】
: 有个问题想请教大家一下。做的一个蛋白是酶,结构已经解析出来了,催化肽键断裂。
: 预测的催化三联体中2个残基出现在活性中心,另外一个残基(x)离活性中心很远,通
: 过序列比对确定这个远离的残基就是催化三联体之一,很保守。如果是变构结合的话,
: 我用itc测了好几个底物也看不见结合放热。和已知的同源结构进行结构比对,也发现
: 那2个残基位置都对应,就是x很不对。我怀疑有没有可能是Zymogen,或者需要啥附因
: 子之类的激活它。没经验啊,希望大家给点意见,小弟还指望这个毕业呢。多谢多谢

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x*k
16
Thanks, I think probably you are right.

【在 w***c 的大作中提到】
: I think it is a check list that may be not need signature.
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D*r
17
赞心理素质

【在 d*****0 的大作中提到】
: 【 以下文字转载自 Military 讨论区 】
: 发信人: happyjerry (jerry), 信区: Military
: 标 题: 美国女留学生昆明爬山被强奸 破案后愉快地与民警合影留念
: 发信站: BBS 未名空间站 (Sat May 22 23:40:31 2010, 美东)
: 女留学生爬西山被强奸
: 12月15日中午12时许,昆明警方接到一名美国姑娘的报案,称其在西山游玩时,遭
: 到一名中国男子的抢劫、强奸。
: 通过玛丽自述,警方了解到,她是北京某大学的美国留学生,当天上午,她独自一
: 人到西山游玩。上山途中,一名中国男子悄悄尾随其后。当行至太华古道太华寺围墙旁
: 时,该男子突然掏出一把刀子将玛丽挟持到旁边的树林中,随后将玛丽身上的一张美国

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x*o
18
嗯,看看,我好像没baozi,俺是新手,对不住了

【在 l**********1 的大作中提到】
: if cysteine cathepsins
: please go to:
: //www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/20860624
: and
: //www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/9299326
: ps: if you are satisfied with this answer,
: BAOZI one please transfer to my mitbbs financial account,
: Wei-bi 10.

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t*c
19
什么大事,我当抢鸡蛋的呢

【在 d*****0 的大作中提到】
: 【 以下文字转载自 Military 讨论区 】
: 发信人: happyjerry (jerry), 信区: Military
: 标 题: 美国女留学生昆明爬山被强奸 破案后愉快地与民警合影留念
: 发信站: BBS 未名空间站 (Sat May 22 23:40:31 2010, 美东)
: 女留学生爬西山被强奸
: 12月15日中午12时许,昆明警方接到一名美国姑娘的报案,称其在西山游玩时,遭
: 到一名中国男子的抢劫、强奸。
: 通过玛丽自述,警方了解到,她是北京某大学的美国留学生,当天上午,她独自一
: 人到西山游玩。上山途中,一名中国男子悄悄尾随其后。当行至太华古道太华寺围墙旁
: 时,该男子突然掏出一把刀子将玛丽挟持到旁边的树林中,随后将玛丽身上的一张美国

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x*o
20
x是和底物催化直接相关,wt和mutant都做了,我怀疑可能是结合不紧密造成的。
酶活还没做呢,打算做呢。我想知道如果是结合底物后会造成构象变化,那我怎么确定
呢(复合物估计拿不到,看不到结合),另一个可能如果这个蛋白是酶原的话,我又该
怎么确定。谢谢大家。

【在 e****s 的大作中提到】
: 没太看明白。
: 你想研究这个X是不是直接和催化相关?
: 底物不能结合是WT还是mutants? 确定你的酶是活的吗,有测过WT的酶活吗?特别如果
: 底物不能结合的话。

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g*1
21
"尽管遭此惊吓,但这并没有改变她对中国对云南的美好印象"

【在 d*****0 的大作中提到】
: 【 以下文字转载自 Military 讨论区 】
: 发信人: happyjerry (jerry), 信区: Military
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: 女留学生爬西山被强奸
: 12月15日中午12时许,昆明警方接到一名美国姑娘的报案,称其在西山游玩时,遭
: 到一名中国男子的抢劫、强奸。
: 通过玛丽自述,警方了解到,她是北京某大学的美国留学生,当天上午,她独自一
: 人到西山游玩。上山途中,一名中国男子悄悄尾随其后。当行至太华古道太华寺围墙旁
: 时,该男子突然掏出一把刀子将玛丽挟持到旁边的树林中,随后将玛丽身上的一张美国

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d*1
22
有了结构,复合体不是小case一个么?把晶体浸在底物里面,多来几次,总会看到一片
云的。结合放热并不是每次都能看见的,有些构象变化天生没有热量变化。用NMR,SPR
看看吧。
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S*N
23

装卸工人,体力强大。
美国浪女,常找蓝领,尤其是建筑和装卸工。

【在 g*******1 的大作中提到】
: "尽管遭此惊吓,但这并没有改变她对中国对云南的美好印象"
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b*n
24
有没有这三个残基的点突变结果

【在 x***o 的大作中提到】
: 有个问题想请教大家一下。做的一个蛋白是酶,结构已经解析出来了,催化肽键断裂。
: 预测的催化三联体中2个残基出现在活性中心,另外一个残基(x)离活性中心很远,通
: 过序列比对确定这个远离的残基就是催化三联体之一,很保守。如果是变构结合的话,
: 我用itc测了好几个底物也看不见结合放热。和已知的同源结构进行结构比对,也发现
: 那2个残基位置都对应,就是x很不对。我怀疑有没有可能是Zymogen,或者需要啥附因
: 子之类的激活它。没经验啊,希望大家给点意见,小弟还指望这个毕业呢。多谢多谢

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l*n
25
She looks like a Russian escort in this picture...
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l*1
26
De rein.
猴年马月后 有了的时侯 还记得的话 补个就成。

【在 x***o 的大作中提到】
: 嗯,看看,我好像没baozi,俺是新手,对不住了
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s*d
27
破案后愉快地与民警合影留念....
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x*o
28
嗯,一定补。谢谢兄台

【在 l**********1 的大作中提到】
: De rein.
: 猴年马月后 有了的时侯 还记得的话 补个就成。

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p*w
29
麻利小姐有沒有感謝 diang ?

【在 d*****0 的大作中提到】
: 【 以下文字转载自 Military 讨论区 】
: 发信人: happyjerry (jerry), 信区: Military
: 标 题: 美国女留学生昆明爬山被强奸 破案后愉快地与民警合影留念
: 发信站: BBS 未名空间站 (Sat May 22 23:40:31 2010, 美东)
: 女留学生爬西山被强奸
: 12月15日中午12时许,昆明警方接到一名美国姑娘的报案,称其在西山游玩时,遭
: 到一名中国男子的抢劫、强奸。
: 通过玛丽自述,警方了解到,她是北京某大学的美国留学生,当天上午,她独自一
: 人到西山游玩。上山途中,一名中国男子悄悄尾随其后。当行至太华古道太华寺围墙旁
: 时,该男子突然掏出一把刀子将玛丽挟持到旁边的树林中,随后将玛丽身上的一张美国

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x*o
30
这个就很难泡,而且到现在也没有文章报道过和底物的复合物,单体倒是很多

SPR

【在 d******1 的大作中提到】
: 有了结构,复合体不是小case一个么?把晶体浸在底物里面,多来几次,总会看到一片
: 云的。结合放热并不是每次都能看见的,有些构象变化天生没有热量变化。用NMR,SPR
: 看看吧。

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P*P
31
不错, 给国人争光了!
avatar
x*o
32
有,但也没有结合

【在 b******n 的大作中提到】
: 有没有这三个残基的点突变结果
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r*y
33
邢某?
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l*1
34
you missed my gender.
not 兄台 but Da-Jie or Xiao-mei.

【在 x***o 的大作中提到】
: 嗯,一定补。谢谢兄台
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l*r
35
呵呵,还挺漂亮的
邢某不亏啊

【在 d*****0 的大作中提到】
: 【 以下文字转载自 Military 讨论区 】
: 发信人: happyjerry (jerry), 信区: Military
: 标 题: 美国女留学生昆明爬山被强奸 破案后愉快地与民警合影留念
: 发信站: BBS 未名空间站 (Sat May 22 23:40:31 2010, 美东)
: 女留学生爬西山被强奸
: 12月15日中午12时许,昆明警方接到一名美国姑娘的报案,称其在西山游玩时,遭
: 到一名中国男子的抢劫、强奸。
: 通过玛丽自述,警方了解到,她是北京某大学的美国留学生,当天上午,她独自一
: 人到西山游玩。上山途中,一名中国男子悄悄尾随其后。当行至太华古道太华寺围墙旁
: 时,该男子突然掏出一把刀子将玛丽挟持到旁边的树林中,随后将玛丽身上的一张美国

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C*e
36
刚巧我今天也做的itc
然后也是什么都没看到
请问一下“有些构象变化天生没有热量变化”这个说法有没有什么paper可以做ref?
谢谢

SPR

【在 d******1 的大作中提到】
: 有了结构,复合体不是小case一个么?把晶体浸在底物里面,多来几次,总会看到一片
: 云的。结合放热并不是每次都能看见的,有些构象变化天生没有热量变化。用NMR,SPR
: 看看吧。

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c*k
37
J点是邢某吧,

【在 o**********l 的大作中提到】
: jp:在反抗中,玛丽左手食指被刀划伤。
: 确定这个不是sm?

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y*d
38
楼上给的建议都太复杂,有些还需要很好的技术水平才能得到好结果(如SPR),我来帮楼主分析一下。
目前的问题就是通过序列比对发现有可能的催化残基不在活性中心附近,确定不了原因。怀疑结合底物时有变构现象,但无法确定。
首先,保守的残基未必就是催化残基,也许是对稳定过渡态有作用,也许是对底物进行活性中心有关键作用。这些因素都可能导致突变后蛋白失活。总之,这点上只通过保守来判断有些草率,不知道是否还有其他证据。
其次,如果是想确认有底物存在时蛋白是否有变构,可考虑用经典的光谱方法,如CD,荧光等。仪器简单,而且对样品无损害,建议楼主尝试。
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c*o
39
情绪稳定。。。

【在 g*******1 的大作中提到】
: "尽管遭此惊吓,但这并没有改变她对中国对云南的美好印象"
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x*o
40
我的结构没有突变,而且itc结果又突变的也有native的,都没有显示结合,我怀疑做
cd之类的也不会有明显变化,谢谢,呵呵,不管怎样,下一步尝试尝试

来帮楼主分析一下。
因。怀疑结合底物时有变构现象,但无法确定。
行活性中心有关键作用。这些因素都可能导致突变后蛋白失活。总之,这点上只通过保
守来判断有些草率,不知道是否还有其他证据。
,荧光等。仪器简单,而且对样品无损害,建议楼主尝试。

【在 y****d 的大作中提到】
: 楼上给的建议都太复杂,有些还需要很好的技术水平才能得到好结果(如SPR),我来帮楼主分析一下。
: 目前的问题就是通过序列比对发现有可能的催化残基不在活性中心附近,确定不了原因。怀疑结合底物时有变构现象,但无法确定。
: 首先,保守的残基未必就是催化残基,也许是对稳定过渡态有作用,也许是对底物进行活性中心有关键作用。这些因素都可能导致突变后蛋白失活。总之,这点上只通过保守来判断有些草率,不知道是否还有其他证据。
: 其次,如果是想确认有底物存在时蛋白是否有变构,可考虑用经典的光谱方法,如CD,荧光等。仪器简单,而且对样品无损害,建议楼主尝试。

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p*o
41
说实话,案破得比美国快多了
玛丽,感谢了国家,感谢了党,拍下了犯罪嫌疑人的照片,并要了电话号码
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g*r
42
你说的对
绝不能仅仅从sequence alignment上找active site , 有的保守点是提供其他功能,比
如substrate binding , co factor binding, 或者结构支撑所必须,甚至是演化中的
冗余
判断catalytical center,如果没有类似的已知information, 必须有mutant /
activity assay 佐证

来帮楼主分析一下。
因。怀疑结合底物时有变构现象,但无法确定。
行活性中心有关键作用。这些因素都可能导致突变后蛋白失活。总之,这点上只通过保
守来判断有些草率,不知道是否还有其他证据。
,荧光等。仪器简单,而且对样品无损害,建议楼主尝试。

【在 y****d 的大作中提到】
: 楼上给的建议都太复杂,有些还需要很好的技术水平才能得到好结果(如SPR),我来帮楼主分析一下。
: 目前的问题就是通过序列比对发现有可能的催化残基不在活性中心附近,确定不了原因。怀疑结合底物时有变构现象,但无法确定。
: 首先,保守的残基未必就是催化残基,也许是对稳定过渡态有作用,也许是对底物进行活性中心有关键作用。这些因素都可能导致突变后蛋白失活。总之,这点上只通过保守来判断有些草率,不知道是否还有其他证据。
: 其次,如果是想确认有底物存在时蛋白是否有变构,可考虑用经典的光谱方法,如CD,荧光等。仪器简单,而且对样品无损害,建议楼主尝试。

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N*n
43
报案的目的就是为了这个吧?

【在 p***o 的大作中提到】
: 说实话,案破得比美国快多了
: 玛丽,感谢了国家,感谢了党,拍下了犯罪嫌疑人的照片,并要了电话号码

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d*1
44
ref.不记得了,你可以去找找,躲在一些物理化学的小杂志里面。
ITC,什么都没看到,有太多的可能性了。
以下有几种可能性。
1:200ul的ITC一般什么都看不到,用4ml的老ITC。
2.换成磷酸溶液。
3. 升高蛋白和底物的溶度。

【在 C*******e 的大作中提到】
: 刚巧我今天也做的itc
: 然后也是什么都没看到
: 请问一下“有些构象变化天生没有热量变化”这个说法有没有什么paper可以做ref?
: 谢谢
:
: SPR

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L*s
45
这么壮,那强奸犯应该比她力气还大吧...
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d*1
46
CD和荧光粉不用报什么希望了,太低resolusion了,不过随便做一下也可以,反正用的
量少。
如果蛋白小的话,可以做NMR看一下,一个HSQC就什么都看到了。
最后的一种可能是结晶水,你查一下在预定的第三个碱基位置上是不是有一个保守的水
分子,这个可以通过比较多个结构得到。

【在 x***o 的大作中提到】
: 我的结构没有突变,而且itc结果又突变的也有native的,都没有显示结合,我怀疑做
: cd之类的也不会有明显变化,谢谢,呵呵,不管怎样,下一步尝试尝试
:
: 来帮楼主分析一下。
: 因。怀疑结合底物时有变构现象,但无法确定。
: 行活性中心有关键作用。这些因素都可能导致突变后蛋白失活。总之,这点上只通过保
: 守来判断有些草率,不知道是否还有其他证据。
: ,荧光等。仪器简单,而且对样品无损害,建议楼主尝试。

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p*0
47
心胸广阔
摆个pose跟昆明人说 来吧!
这个wsn也太不专业了,起码要照几张像吧

【在 d*****0 的大作中提到】
: 【 以下文字转载自 Military 讨论区 】
: 发信人: happyjerry (jerry), 信区: Military
: 标 题: 美国女留学生昆明爬山被强奸 破案后愉快地与民警合影留念
: 发信站: BBS 未名空间站 (Sat May 22 23:40:31 2010, 美东)
: 女留学生爬西山被强奸
: 12月15日中午12时许,昆明警方接到一名美国姑娘的报案,称其在西山游玩时,遭
: 到一名中国男子的抢劫、强奸。
: 通过玛丽自述,警方了解到,她是北京某大学的美国留学生,当天上午,她独自一
: 人到西山游玩。上山途中,一名中国男子悄悄尾随其后。当行至太华古道太华寺围墙旁
: 时,该男子突然掏出一把刀子将玛丽挟持到旁边的树林中,随后将玛丽身上的一张美国

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x*o
48
是有一个水分子,呵呵,但是水分子旁边有个ser,通过和同源结构align发现ser的位
置才是催化三联体的第三个残基的位置。但是X在我这个蛋白家族里面(已报道的)序
列上才是保守的,而且这些文章也都没有提到ser可以替代X。所以我还是认为三联体的
第三个残基应该就是X。下一步打算做NMR。谢谢。

【在 d******1 的大作中提到】
: CD和荧光粉不用报什么希望了,太低resolusion了,不过随便做一下也可以,反正用的
: 量少。
: 如果蛋白小的话,可以做NMR看一下,一个HSQC就什么都看到了。
: 最后的一种可能是结晶水,你查一下在预定的第三个碱基位置上是不是有一个保守的水
: 分子,这个可以通过比较多个结构得到。

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i*y
49
那也比哭哭啼啼被一群wsn嘲笑好。

【在 E*******d 的大作中提到】
: 嗯,这个新闻再次强化白妞没有廉耻的印象。
avatar
C*e
50
谢谢回复
我用的是1ml的ITC
只有第一个full volume injection看到比background高一点的峰
一个是蛋白浓度低
还有一个可能一下就饱和了(ligand:protein=24:1)
现在准备用更高的蛋白浓度看看
如果第一个峰更高了
可能会再做一次

【在 d******1 的大作中提到】
: ref.不记得了,你可以去找找,躲在一些物理化学的小杂志里面。
: ITC,什么都没看到,有太多的可能性了。
: 以下有几种可能性。
: 1:200ul的ITC一般什么都看不到,用4ml的老ITC。
: 2.换成磷酸溶液。
: 3. 升高蛋白和底物的溶度。

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z*y
51
让我想起了郭德纲损李菁妹妹那段……
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d*1
52
这就很简单了。 蛋白质溶度太低,ITC看得不大清楚,至少要提高5-10倍的浓度吧。因
为fitting的时候至少要5-10个点。
呵呵,要不然就找那种最老的要4ml的ITC吧。
ITC很烦的,我的一个图,折腾了有半年,如果表达量高还好,不高,累死。。。。

【在 C*******e 的大作中提到】
: 谢谢回复
: 我用的是1ml的ITC
: 只有第一个full volume injection看到比background高一点的峰
: 一个是蛋白浓度低
: 还有一个可能一下就饱和了(ligand:protein=24:1)
: 现在准备用更高的蛋白浓度看看
: 如果第一个峰更高了
: 可能会再做一次

avatar
a*o
53
邢某..........
avatar
C*e
54
恩,这个烧蛋白的速度比做结晶还快啊
我那天起始用的40 mg蛋白
很不幸透析的时候crush out了大半
结果最后做的时候浓度就不够了。。。。。
而且有点tricky
就算看到了binding
为了好的fitting应该还要找到比较合适的ligand:protein比才能保证每个阶段都有点啊
请问一般来说ligand:protein多少合适:
10:1会不会太快饱和?
5:1开始试可以么

【在 d******1 的大作中提到】
: 这就很简单了。 蛋白质溶度太低,ITC看得不大清楚,至少要提高5-10倍的浓度吧。因
: 为fitting的时候至少要5-10个点。
: 呵呵,要不然就找那种最老的要4ml的ITC吧。
: ITC很烦的,我的一个图,折腾了有半年,如果表达量高还好,不高,累死。。。。

avatar
l*7
55
完全不觉得她做的有什么不妥。
avatar
k*n
56
re
avatar
f*l
57
哪里有合影? 就是一张来源不明的单人照。

【在 d*****0 的大作中提到】
: 【 以下文字转载自 Military 讨论区 】
: 发信人: happyjerry (jerry), 信区: Military
: 标 题: 美国女留学生昆明爬山被强奸 破案后愉快地与民警合影留念
: 发信站: BBS 未名空间站 (Sat May 22 23:40:31 2010, 美东)
: 女留学生爬西山被强奸
: 12月15日中午12时许,昆明警方接到一名美国姑娘的报案,称其在西山游玩时,遭
: 到一名中国男子的抢劫、强奸。
: 通过玛丽自述,警方了解到,她是北京某大学的美国留学生,当天上午,她独自一
: 人到西山游玩。上山途中,一名中国男子悄悄尾随其后。当行至太华古道太华寺围墙旁
: 时,该男子突然掏出一把刀子将玛丽挟持到旁边的树林中,随后将玛丽身上的一张美国

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n*n
58
多象站街的。
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a*g
59
老邢又出事啦?
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z*e
60
那个强奸犯要多壮啊,才能强奸了这头牛?
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L*6
61
感觉有点问题,白人女孩儿不是人么?? 她们在外国被老中强奸,之后心情那么好?
? 感觉有点问题 是不是这个男的被勾引 然后女的报案说给强奸 妈的云南那边当
然是刑讯逼供 而且又是涉外案件 这个男的死定了。。。 反正感觉妈的不可能是一
般的强奸案 是个正常人被强奸不会有这种反应 太tm诡异了
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c*e
62
老刑出事了,大家散伙了吧

【在 d*****0 的大作中提到】
: 【 以下文字转载自 Military 讨论区 】
: 发信人: happyjerry (jerry), 信区: Military
: 标 题: 美国女留学生昆明爬山被强奸 破案后愉快地与民警合影留念
: 发信站: BBS 未名空间站 (Sat May 22 23:40:31 2010, 美东)
: 女留学生爬西山被强奸
: 12月15日中午12时许,昆明警方接到一名美国姑娘的报案,称其在西山游玩时,遭
: 到一名中国男子的抢劫、强奸。
: 通过玛丽自述,警方了解到,她是北京某大学的美国留学生,当天上午,她独自一
: 人到西山游玩。上山途中,一名中国男子悄悄尾随其后。当行至太华古道太华寺围墙旁
: 时,该男子突然掏出一把刀子将玛丽挟持到旁边的树林中,随后将玛丽身上的一张美国

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d*r
63
"她愉快地和办案民警合影留念,并表示,尽管遭此惊吓,但这并没有改变她对中国对
云南的美好印象,她近期内还将携家人一起再到云南,按计划到大理、丽江等地游玩,
继续完成她的云南之旅..."
猎人...
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s*a
64
其实更有可能是国内无良记者瞎鸡巴乱写
就好像当年国内发大水,灾民们房子被淹了,然后记者非说那些灾民“怀着过年般的心
情”等待着抗灾物资

【在 L***6 的大作中提到】
: 感觉有点问题,白人女孩儿不是人么?? 她们在外国被老中强奸,之后心情那么好?
: ? 感觉有点问题 是不是这个男的被勾引 然后女的报案说给强奸 妈的云南那边当
: 然是刑讯逼供 而且又是涉外案件 这个男的死定了。。。 反正感觉妈的不可能是一
: 般的强奸案 是个正常人被强奸不会有这种反应 太tm诡异了

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K*y
65
赞愉快

【在 d*****0 的大作中提到】
: 【 以下文字转载自 Military 讨论区 】
: 发信人: happyjerry (jerry), 信区: Military
: 标 题: 美国女留学生昆明爬山被强奸 破案后愉快地与民警合影留念
: 发信站: BBS 未名空间站 (Sat May 22 23:40:31 2010, 美东)
: 女留学生爬西山被强奸
: 12月15日中午12时许,昆明警方接到一名美国姑娘的报案,称其在西山游玩时,遭
: 到一名中国男子的抢劫、强奸。
: 通过玛丽自述,警方了解到,她是北京某大学的美国留学生,当天上午,她独自一
: 人到西山游玩。上山途中,一名中国男子悄悄尾随其后。当行至太华古道太华寺围墙旁
: 时,该男子突然掏出一把刀子将玛丽挟持到旁边的树林中,随后将玛丽身上的一张美国

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v*a
66
可能还在回味富有东方神秘色彩的性高潮

【在 K*****y 的大作中提到】
: 赞愉快
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t*s
67
以前上学的时候,学校里有一个系列的海报,强奸案的女受害者在自己的大幅照片上写
着“I was raped”,来鼓励其它受害人不要忍气吞声。

【在 d*****0 的大作中提到】
: 【 以下文字转载自 Military 讨论区 】
: 发信人: happyjerry (jerry), 信区: Military
: 标 题: 美国女留学生昆明爬山被强奸 破案后愉快地与民警合影留念
: 发信站: BBS 未名空间站 (Sat May 22 23:40:31 2010, 美东)
: 女留学生爬西山被强奸
: 12月15日中午12时许,昆明警方接到一名美国姑娘的报案,称其在西山游玩时,遭
: 到一名中国男子的抢劫、强奸。
: 通过玛丽自述,警方了解到,她是北京某大学的美国留学生,当天上午,她独自一
: 人到西山游玩。上山途中,一名中国男子悄悄尾随其后。当行至太华古道太华寺围墙旁
: 时,该男子突然掏出一把刀子将玛丽挟持到旁边的树林中,随后将玛丽身上的一张美国

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k*e
68
诗曰:
美人不问中与洋,一样开花一样强。
春心独潜人之后,草色铺就树下凉。
远水隔时想深浅,世博开处较短长。
人生相逢本不识,明年拜哥势在床。

【在 d*****0 的大作中提到】
: 【 以下文字转载自 Military 讨论区 】
: 发信人: happyjerry (jerry), 信区: Military
: 标 题: 美国女留学生昆明爬山被强奸 破案后愉快地与民警合影留念
: 发信站: BBS 未名空间站 (Sat May 22 23:40:31 2010, 美东)
: 女留学生爬西山被强奸
: 12月15日中午12时许,昆明警方接到一名美国姑娘的报案,称其在西山游玩时,遭
: 到一名中国男子的抢劫、强奸。
: 通过玛丽自述,警方了解到,她是北京某大学的美国留学生,当天上午,她独自一
: 人到西山游玩。上山途中,一名中国男子悄悄尾随其后。当行至太华古道太华寺围墙旁
: 时,该男子突然掏出一把刀子将玛丽挟持到旁边的树林中,随后将玛丽身上的一张美国

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p*w
69
犀利啊

【在 k****e 的大作中提到】
: 诗曰:
: 美人不问中与洋,一样开花一样强。
: 春心独潜人之后,草色铺就树下凉。
: 远水隔时想深浅,世博开处较短长。
: 人生相逢本不识,明年拜哥势在床。

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D*n
70
路过
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a*0
71
主要是丢了驾照信用卡太不方便了,要找回来
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