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为什么没有表达RNAi 的transgenic 老鼠呢。
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为什么没有表达RNAi 的transgenic 老鼠呢。# Biology - 生物学
y*m
1
说低了改不回去。说高了被拒.等他说个数自己考虑?
thx!
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i*0
2
我应该不应该appeal我的o1 visa?
在rfe之后被拒绝,发过来看为什么被拒绝,后面谈的根本不是我这个人
要不要appeal ?
还是就走h1b算了
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x*k
3
【 以下文字转载自 Basketball 讨论区 】
发信人: toughtough (Born To Be Tough), 信区: Basketball
标 题: 漂亮MM惊现华师大篮球场 卖饮料艰辛求生活! 有片片有真相
发信站: BBS 未名空间站 (Sun Jun 27 14:57:17 2010, 美东)
看美女看美女看美女!这几天,华师大的篮球场经常出现一位骑着小车,载着一箱
力水,长裙飘飘美女MM会在下午3点左右出现在篮球场,给场上的球员带去 饮料的清凉
。每次都只出现短短几十分钟,但会立即吸引周边的雄性驻足购买(这年代的男同学啊
,啧啧啧,真不矜持)。小弟我也只是有所耳闻,不曾有过此等荣幸能一见芳容。
一枚帅哥向饮料MM买了一瓶运动饮料,虽然不想承认,但不得不说还是蛮配、蛮养眼的
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z*u
4
tetO driven, 表达某个gene的RNAi序列来knock down 其表达。
至少在Jax没有这样的老鼠。 是为啥呢。knockdown 的效率不够高导致没有phenotype?
有谁懂的讲讲?
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L*e
5
问他们的range是多少。同时实现查一查面试的地区相应职位的工资水平,以防人家一
定让你说个数字。
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A*r
6
of course

【在 i***0 的大作中提到】
: 我应该不应该appeal我的o1 visa?
: 在rfe之后被拒绝,发过来看为什么被拒绝,后面谈的根本不是我这个人
: 要不要appeal ?
: 还是就走h1b算了

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c*o
7
赞自力更生。

【在 x***k 的大作中提到】
: 【 以下文字转载自 Basketball 讨论区 】
: 发信人: toughtough (Born To Be Tough), 信区: Basketball
: 标 题: 漂亮MM惊现华师大篮球场 卖饮料艰辛求生活! 有片片有真相
: 发信站: BBS 未名空间站 (Sun Jun 27 14:57:17 2010, 美东)
: 看美女看美女看美女!这几天,华师大的篮球场经常出现一位骑着小车,载着一箱
: 力水,长裙飘飘美女MM会在下午3点左右出现在篮球场,给场上的球员带去 饮料的清凉
: 。每次都只出现短短几十分钟,但会立即吸引周边的雄性驻足购买(这年代的男同学啊
: ,啧啧啧,真不矜持)。小弟我也只是有所耳闻,不曾有过此等荣幸能一见芳容。
: 一枚帅哥向饮料MM买了一瓶运动饮料,虽然不想承认,但不得不说还是蛮配、蛮养眼的

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D*a
8
都是做construction,养ES,打胚胎,养老鼠,为啥不直接做KO?
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A*r
10
This is then clearly their negligence. I think you can ask for compensatory
damage for the money loss and emotional distress and possibly punitive
damage too.

【在 i***0 的大作中提到】
: 我应该不应该appeal我的o1 visa?
: 在rfe之后被拒绝,发过来看为什么被拒绝,后面谈的根本不是我这个人
: 要不要appeal ?
: 还是就走h1b算了

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n*d
11
华师大请来的?

【在 x***k 的大作中提到】
: 【 以下文字转载自 Basketball 讨论区 】
: 发信人: toughtough (Born To Be Tough), 信区: Basketball
: 标 题: 漂亮MM惊现华师大篮球场 卖饮料艰辛求生活! 有片片有真相
: 发信站: BBS 未名空间站 (Sun Jun 27 14:57:17 2010, 美东)
: 看美女看美女看美女!这几天,华师大的篮球场经常出现一位骑着小车,载着一箱
: 力水,长裙飘飘美女MM会在下午3点左右出现在篮球场,给场上的球员带去 饮料的清凉
: 。每次都只出现短短几十分钟,但会立即吸引周边的雄性驻足购买(这年代的男同学啊
: ,啧啧啧,真不矜持)。小弟我也只是有所耳闻,不曾有过此等荣幸能一见芳容。
: 一枚帅哥向饮料MM买了一瓶运动饮料,虽然不想承认,但不得不说还是蛮配、蛮养眼的

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z*8
12

transgenic 不需要养es. construction 也相对容易对了。

【在 D*a 的大作中提到】
: 都是做construction,养ES,打胚胎,养老鼠,为啥不直接做KO?
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i*0
13
仔细一看,里面的的判断还是说我
但是只有会员那一条没有满足
太失败了

compensatory

【在 A*********r 的大作中提到】
: This is then clearly their negligence. I think you can ask for compensatory
: damage for the money loss and emotional distress and possibly punitive
: damage too.

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z*a
14
J点是5元一瓶?

【在 x***k 的大作中提到】
: 【 以下文字转载自 Basketball 讨论区 】
: 发信人: toughtough (Born To Be Tough), 信区: Basketball
: 标 题: 漂亮MM惊现华师大篮球场 卖饮料艰辛求生活! 有片片有真相
: 发信站: BBS 未名空间站 (Sun Jun 27 14:57:17 2010, 美东)
: 看美女看美女看美女!这几天,华师大的篮球场经常出现一位骑着小车,载着一箱
: 力水,长裙飘飘美女MM会在下午3点左右出现在篮球场,给场上的球员带去 饮料的清凉
: 。每次都只出现短短几十分钟,但会立即吸引周边的雄性驻足购买(这年代的男同学啊
: ,啧啧啧,真不矜持)。小弟我也只是有所耳闻,不曾有过此等荣幸能一见芳容。
: 一枚帅哥向饮料MM买了一瓶运动饮料,虽然不想承认,但不得不说还是蛮配、蛮养眼的

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a*x
15
Don't have a good induction system like the UAS Gal4
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A*r
16
sorry to hear that.
why not H1?

【在 i***0 的大作中提到】
: 仔细一看,里面的的判断还是说我
: 但是只有会员那一条没有满足
: 太失败了
:
: compensatory

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m*t
17
支持,至少没去做下三滥的事情赚钱

【 以下文字转载自 Basketball 讨论区 】
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标 题: 漂亮MM惊现华师大篮球场 卖饮料艰辛求生活! 有片片有真相
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看美女看美女看美女!这几天,华师大的篮球场经常出现一位骑着小车,载着一箱
力水,长裙飘飘美女MM会在下午3点左右出现在篮球场,给场上的球员带去 饮料的清凉
。每次都只出现短短几十分钟,但会立即吸引周边的雄性驻足购买(这年代的男同学啊
,啧啧啧,真不矜持)。小弟我也只是有所耳闻,不曾有过此等荣幸能一见芳容。
一枚帅哥向饮料MM买了一瓶运动饮料,虽然不想承认,但不得不说还是蛮配、蛮养眼的

【在 x***k 的大作中提到】
: 【 以下文字转载自 Basketball 讨论区 】
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: 标 题: 漂亮MM惊现华师大篮球场 卖饮料艰辛求生活! 有片片有真相
: 发信站: BBS 未名空间站 (Sun Jun 27 14:57:17 2010, 美东)
: 看美女看美女看美女!这几天,华师大的篮球场经常出现一位骑着小车,载着一箱
: 力水,长裙飘飘美女MM会在下午3点左右出现在篮球场,给场上的球员带去 饮料的清凉
: 。每次都只出现短短几十分钟,但会立即吸引周边的雄性驻足购买(这年代的男同学啊
: ,啧啧啧,真不矜持)。小弟我也只是有所耳闻,不曾有过此等荣幸能一见芳容。
: 一枚帅哥向饮料MM买了一瓶运动饮料,虽然不想承认,但不得不说还是蛮配、蛮养眼的

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i*0
19
人生如梦
梦如人生,自己搞eb1b了

【在 A*********r 的大作中提到】
: sorry to hear that.
: why not H1?

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k*e
20
诗曰:
青青卖水女,鸦鸦猛男集。
泡沫裹冰冻,布袋收钱米。
敢问姐有因?还怕哥无趣。
日暮归其门,想见花如雨。

【在 x***k 的大作中提到】
: 【 以下文字转载自 Basketball 讨论区 】
: 发信人: toughtough (Born To Be Tough), 信区: Basketball
: 标 题: 漂亮MM惊现华师大篮球场 卖饮料艰辛求生活! 有片片有真相
: 发信站: BBS 未名空间站 (Sun Jun 27 14:57:17 2010, 美东)
: 看美女看美女看美女!这几天,华师大的篮球场经常出现一位骑着小车,载着一箱
: 力水,长裙飘飘美女MM会在下午3点左右出现在篮球场,给场上的球员带去 饮料的清凉
: 。每次都只出现短短几十分钟,但会立即吸引周边的雄性驻足购买(这年代的男同学啊
: ,啧啧啧,真不矜持)。小弟我也只是有所耳闻,不曾有过此等荣幸能一见芳容。
: 一枚帅哥向饮料MM买了一瓶运动饮料,虽然不想承认,但不得不说还是蛮配、蛮养眼的

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z*u
21
多谢楼上分享。看来只是技术还不成熟,暂时不available.
我以前读一些paper,说RNAi knockdown 对老鼠的问题在于transgenic mice对于
heterozygou 非常耐受,就是说knockdown 50%都不会有明显phenotype. 而RNAi 在体
外也就70% 的knockdown, 所以构建transgenic line没啥phenotype,不知道是不是这个
原因以前一直没有line 出来。
我做transgenic RNAi老鼠主要目的是研究成体的KO phenotype.当然,reversible也是很重要的原因。 唯一办法就是构建XXX
-rtTA;teto-shRNA 来在成体knock down.
avatar
A*r
22
也好。祝好运!

【在 i***0 的大作中提到】
: 人生如梦
: 梦如人生,自己搞eb1b了

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b*g
23
现在是个人就知道炒作

【在 x***k 的大作中提到】
: 【 以下文字转载自 Basketball 讨论区 】
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: 标 题: 漂亮MM惊现华师大篮球场 卖饮料艰辛求生活! 有片片有真相
: 发信站: BBS 未名空间站 (Sun Jun 27 14:57:17 2010, 美东)
: 看美女看美女看美女!这几天,华师大的篮球场经常出现一位骑着小车,载着一箱
: 力水,长裙飘飘美女MM会在下午3点左右出现在篮球场,给场上的球员带去 饮料的清凉
: 。每次都只出现短短几十分钟,但会立即吸引周边的雄性驻足购买(这年代的男同学啊
: ,啧啧啧,真不矜持)。小弟我也只是有所耳闻,不曾有过此等荣幸能一见芳容。
: 一枚帅哥向饮料MM买了一瓶运动饮料,虽然不想承认,但不得不说还是蛮配、蛮养眼的

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Z*g
24
转基因的拷贝数有限,所以要保证高的knockdown效率比较难。另外可用的rtTA转基
因小鼠相对少,也是一个限制因素。

是很重要的原因。 唯一办法就是构建XXX

【在 z****u 的大作中提到】
: 多谢楼上分享。看来只是技术还不成熟,暂时不available.
: 我以前读一些paper,说RNAi knockdown 对老鼠的问题在于transgenic mice对于
: heterozygou 非常耐受,就是说knockdown 50%都不会有明显phenotype. 而RNAi 在体
: 外也就70% 的knockdown, 所以构建transgenic line没啥phenotype,不知道是不是这个
: 原因以前一直没有line 出来。
: 我做transgenic RNAi老鼠主要目的是研究成体的KO phenotype.当然,reversible也是很重要的原因。 唯一办法就是构建XXX
: -rtTA;teto-shRNA 来在成体knock down.

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l*y
25
学校里面卖水5块钱一瓶谁买啊。就是一个挖坑的。
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a*g
26
More trouble than KO
1) efficiency is variable.
2) when you get efficient knockdown and beautiful phenotype, the interpretat
ion is much more complicated。
“Gene A knockdown causes developmental defects?”
while the more accurate discription will be "a short nucleotide targeting ge
ne A (and MANY OTHER GENES!) causes phenotype."
Given the time and money spent to generate a mouse model, the RNAi-in vivo s
ystem is not worth it...
Plus there is an international effort to produce conditional knockout for ev
ery gene (at least ES cells for 6000 such genes are ready).

phenotype?

【在 z****u 的大作中提到】
: tetO driven, 表达某个gene的RNAi序列来knock down 其表达。
: 至少在Jax没有这样的老鼠。 是为啥呢。knockdown 的效率不够高导致没有phenotype?
: 有谁懂的讲讲?

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S*r
27
跟槟榔西施卖槟榔一个道理

【在 l**y 的大作中提到】
: 学校里面卖水5块钱一瓶谁买啊。就是一个挖坑的。
avatar
z*u
28
那就是说根本原因还是RNAi的specificity问题啦?
但是RNAi技术至少有KO不能替代的方面,就是reversible, 以及perfect timing
control.
对于我这样做adult stem cell的人来说这是至关重要的。很多gene KO 都活不过NB,又
缺乏成体表达的cre或者rtTA.
刚大概浏览了一下楼上推荐的那篇cell paper. 看起来满吸引人的倒是。要是他们那个
APC inhibitor line能available 肯定要弄来试试。

interpretat
ge
s
ev

【在 a*****g 的大作中提到】
: More trouble than KO
: 1) efficiency is variable.
: 2) when you get efficient knockdown and beautiful phenotype, the interpretat
: ion is much more complicated。
: “Gene A knockdown causes developmental defects?”
: while the more accurate discription will be "a short nucleotide targeting ge
: ne A (and MANY OTHER GENES!) causes phenotype."
: Given the time and money spent to generate a mouse model, the RNAi-in vivo s
: ystem is not worth it...
: Plus there is an international effort to produce conditional knockout for ev

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c*e
29
穿这么多收5块一瓶不厚道。
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a*g
30
KO也可以做成reversible(加上一个knockin). 另外KO也可以inducible (timing
control)
还是那句话,RNAi做出来的很多结果都是off-target effect。有人投钱做过了。
如果没有cre/rTTA,那你的RNAi也没法保证 tissue specificity吧?

【在 z****u 的大作中提到】
: 那就是说根本原因还是RNAi的specificity问题啦?
: 但是RNAi技术至少有KO不能替代的方面,就是reversible, 以及perfect timing
: control.
: 对于我这样做adult stem cell的人来说这是至关重要的。很多gene KO 都活不过NB,又
: 缺乏成体表达的cre或者rtTA.
: 刚大概浏览了一下楼上推荐的那篇cell paper. 看起来满吸引人的倒是。要是他们那个
: APC inhibitor line能available 肯定要弄来试试。
:
: interpretat
: ge

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l*e
31
人家还弯腰给你拿呢
5块不算贵了

【在 c**e 的大作中提到】
: 穿这么多收5块一瓶不厚道。
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R*a
32
求弯腰照

【在 l*****e 的大作中提到】
: 人家还弯腰给你拿呢
: 5块不算贵了

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C*n
33
我出50行不。。。
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y*n
34
500一次如何?
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m*d
35
五元不贵
最近物价上涨

【在 l**y 的大作中提到】
: 学校里面卖水5块钱一瓶谁买啊。就是一个挖坑的。
avatar
z*n
36
很贵了,一般也就2快吧。

【在 m**d 的大作中提到】
: 五元不贵
: 最近物价上涨

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h*u
37
长的不错,求跟进照片
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r*g
38
你们没发现,小腿很粗吗?而且平胸。
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c*o
39
不能要求太高。

【在 r*******g 的大作中提到】
: 你们没发现,小腿很粗吗?而且平胸。
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e*e
40
这个mm挺聪明的,水价钱是贵了些,但是她在学校运动场边上卖。刚运动下来都渴,多
花点钱也不在乎。
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m*d
41
太挑剔了
猥琐男应该多多光顾

【在 r*******g 的大作中提到】
: 你们没发现,小腿很粗吗?而且平胸。
avatar
m*d
42
应该卖冰镇西瓜
原来我们就是踢球前买一个让老板并镇上
回来吃

【在 e******e 的大作中提到】
: 这个mm挺聪明的,水价钱是贵了些,但是她在学校运动场边上卖。刚运动下来都渴,多
: 花点钱也不在乎。

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