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小分子量蛋白片段转染表达问题

小分子量蛋白片段转染表达问题# Biology - 生物学

a*02013-10-25 07:10

1 楼

刚来的时候没有信用卡很不方便就让先来的朋友帮忙申请了两张一张visa卡一张master
卡的副卡先用着，后来有了自己的信用卡之后就让朋友帮我关卡了
但是今天点进去看credit karma的credit report里面还有那两张卡
跟朋友说过一次帮我查一下副卡是不是确实关掉了，后来也不知道查了没有
我朋友的用卡习惯不是很好，每个月的balance都很高（report里能看到）
请各位帮我看一下，credit karma的这个卡的report是准确的么？还有就是别人名下的
secondary card会影响我的分数吗？小女子先谢过啦~~~~

l*d2013-10-25 07:10

2 楼

1. Aster
2. hardy garden mum
3. hardy garden mum
4. ice plant
5. blank flower
6. Ballon flower
7. Becky flower
8.玫瑰们：
9.
10.
11。
12。
13.
14.

s*a2013-10-25 07:10

3 楼

一个蛋白，分成几个片段，MYC tag，转染进２９３T，其他片段都能用anti－MYC
antibody 检测到，只有分子量最小的那个 (70 个氨基酸,加上Tag啥的，总共不超过
10KD。)，检测不到。但把这个片段克隆进原核表达
载体能在细菌中表达。
请问这是一种什么情况，大家遇到过么，怎么解决，谢谢！

l*g2013-10-25 07:10

4 楼

楼主一定是美女

master

【在 a******0 的大作中提到】

: 刚来的时候没有信用卡很不方便就让先来的朋友帮忙申请了两张一张visa卡一张master
: 卡的副卡先用着，后来有了自己的信用卡之后就让朋友帮我关卡了
: 但是今天点进去看credit karma的credit report里面还有那两张卡
: 跟朋友说过一次帮我查一下副卡是不是确实关掉了，后来也不知道查了没有
: 我朋友的用卡习惯不是很好，每个月的balance都很高（report里能看到）
: 请各位帮我看一下，credit karma的这个卡的report是准确的么？还有就是别人名下的
: secondary card会影响我的分数吗？小女子先谢过啦~~~~

f*c2013-10-25 07:10

5 楼

抢个沙发

e*s2013-10-25 07:10

6 楼

看多大了。这种片断，特别是小的，容易被降解。可以试试看把它融合在一个蛋白的
tag后面，GFP之类的。

【在 s**********a 的大作中提到】

: 一个蛋白，分成几个片段，MYC tag，转染进２９３T，其他片段都能用anti－MYC
: antibody 检测到，只有分子量最小的那个 (70 个氨基酸,加上Tag啥的，总共不超过
: 10KD。)，检测不到。但把这个片段克隆进原核表达
: 载体能在细菌中表达。
: 请问这是一种什么情况，大家遇到过么，怎么解决，谢谢！

a*s2013-10-25 07:10

7 楼

会的。

f*c2013-10-25 07:10

8 楼

漂亮，慢慢看

s*a2013-10-25 07:10

9 楼

谢谢！总共７０个氨基酸。我可以试试加个大点的Tag. 另外，有防止降解的好方法么
，我试过MG132，不好使。

【在 e****s 的大作中提到】

: 看多大了。这种片断，特别是小的，容易被降解。可以试试看把它融合在一个蛋白的
: tag后面，GFP之类的。

c*n2013-10-25 07:10

10 楼

搞balance不算什么帮你延长了很多信用历史还不够？

【在 l********g 的大作中提到】

: 楼主一定是美女
:
: master

l*d2013-10-25 07:10

11 楼

怎么把漂亮删了？

【在 f*****c 的大作中提到】

: 漂亮，慢慢看

g*n2013-10-25 07:10

12 楼

嗯
延长信用历史
是好的影响

l*d2013-10-25 07:10

13 楼

屁颠，屁颠去给你倒茶，结果看到你把漂亮删了。算了，茶还是留着自己喝了。

【在 f*****c 的大作中提到】

: 抢个沙发

r*y2013-10-25 07:10

14 楼

这个朋友真好

z*e2013-10-25 07:10

15 楼

开得好红火，赞！

【在 l*********d 的大作中提到】

: 屁颠，屁颠去给你倒茶，结果看到你把漂亮删了。算了，茶还是留着自己喝了。

a*02013-10-25 07:10

16 楼

朋友给我副卡，我无偿帮忙完成刷卡bonus任务，这种交换请问有什么问题么？

【在 c******n 的大作中提到】

: 搞balance不算什么帮你延长了很多信用历史还不够？

h*e2013-10-25 07:10

17 楼

到了这个帖子才知道我的网速太慢

【在 l*********d 的大作中提到】

: 屁颠，屁颠去给你倒茶，结果看到你把漂亮删了。算了，茶还是留着自己喝了。

c*d2013-10-25 07:10

18 楼

。。。你这个人怎么不懂得感谢别人呢。顶多提醒一下对方，比如说我把副卡弄丢了，
怕被人盗刷让他确定一下是不是关了
你觉得你朋友给你副卡是占你便宜么？那你给我张副卡吧，我帮你刷，免费让你占我便宜

【在 a******0 的大作中提到】

: 朋友给我副卡，我无偿帮忙完成刷卡bonus任务，这种交换请问有什么问题么？

l*d2013-10-25 07:10

19 楼

国庆嘛！

【在 z*****e 的大作中提到】

: 开得好红火，赞！

a*02013-10-25 07:10

20 楼

我没觉得朋友占我便宜了，朋友也没这么觉得
相反我们彼此都感谢对方的帮助
但是我不能一而再再而三地去找我朋友说你看看关卡没关卡没？一次两次还好，次数多
了别人烦不烦啊？别人一天到晚闲着没事帮你打CS电话？
他也知道自己这个习惯不好，但是老是记不住还卡，也怕什么时候忘记还了late pay影
响比较大，问一下要是副卡不影响我的分数那我也不用再去麻烦别人帮我关卡就放在那
里无所谓了撒
反而是那个人，一上来reply的语气就是“还不够？”
这种心态，觉得这类事情不是别人占你便宜就是你占别人便宜，您的“便宜”我真占不起

便宜

【在 c*****d 的大作中提到】

: 。。。你这个人怎么不懂得感谢别人呢。顶多提醒一下对方，比如说我把副卡弄丢了，
: 怕被人盗刷让他确定一下是不是关了
: 你觉得你朋友给你副卡是占你便宜么？那你给我张副卡吧，我帮你刷，免费让你占我便宜

l*d2013-10-25 07:10

21 楼

幸亏加上慎入，不然要挨骂了。

【在 h******e 的大作中提到】

: 到了这个帖子才知道我的网速太慢

y*i2013-10-25 07:10

22 楼

it is a potential risk so you'd better make sure your friend removes you as
an authorized user once and for all.

master

【在 a******0 的大作中提到】

c*22013-10-25 07:10

23 楼

大头多图照，好红火，前几种是mom aster?

k*t2013-10-25 07:10

24 楼

就是，如果你不还款，他得背债务了。。。。

【在 r******y 的大作中提到】

: 这个朋友真好

l*d2013-10-25 07:10

25 楼

第一个是aster，其他两个是garden mum。
现在玫瑰很难有满株都是花了，只能兽大头照了。

【在 c*******2 的大作中提到】

: 大头多图照，好红火，前几种是mom aster?

a*02013-10-25 07:10

26 楼

每个月我自己用的会在账单日之前还清，因为不想造成别人的麻烦
显然只能给信任的少数几个人开副卡了，感激别人的信任。
如果自己做得不好，以后谁还会信任你？

【在 k****t 的大作中提到】

: 就是，如果你不还款，他得背债务了。。。。

c*p2013-10-25 07:10

27 楼

赞！拍照水平大有进步，一张都没糊！真是你照的？ LOL

L*Y2013-10-25 07:10

28 楼

男朋友？

l*d2013-10-25 07:10

29 楼

哪壶不开提哪壶！
不是有了新武器，迷你爱拍的。

【在 c***p 的大作中提到】

: 赞！拍照水平大有进步，一张都没糊！真是你照的？ LOL

m*d2013-10-25 07:10

30 楼

账单日之前还清不好。
你这朋友可真好
不放心你自己打电话去关卡不就行了，你的卡背面也有客服电话的

【在 a******0 的大作中提到】

: 每个月我自己用的会在账单日之前还清，因为不想造成别人的麻烦
: 显然只能给信任的少数几个人开副卡了，感激别人的信任。
: 如果自己做得不好，以后谁还会信任你？

c*p2013-10-25 07:10

31 楼

金花菜确实3天就发芽，太威武了，多谢！

【在 l*********d 的大作中提到】

: 哪壶不开提哪壶！
: 不是有了新武器，迷你爱拍的。

a*02013-10-25 07:10

32 楼

关卡差不多一年半了……卡早就剪了……呃……所以也不知道账号什么的了

【在 m*******d 的大作中提到】

: 账单日之前还清不好。
: 你这朋友可真好
: 不放心你自己打电话去关卡不就行了，你的卡背面也有客服电话的

l*d2013-10-25 07:10

33 楼

我什么时候给你金花菜了？
我给你的是黄心乌，游大要5－6天，我家反正就是3天。

【在 c***p 的大作中提到】

: 金花菜确实3天就发芽，太威武了，多谢！

l*e2013-10-25 07:10

34 楼

chase的副卡卡号和主卡一样，及时影响也影响的是主卡持有人。
不过你还是确定一下是否关掉了比较好。

master

【在 a******0 的大作中提到】

c*p2013-10-25 07:10

35 楼

黄心无黄心无！
金花菜我也弄到了
游大RP不行所以要多等几天

【在 l*********d 的大作中提到】

: 我什么时候给你金花菜了？
: 我给你的是黄心乌，游大要5－6天，我家反正就是3天。

a*02013-10-25 07:10

36 楼

谢谢解答~我的卡是citi的，唉只好厚着脸皮再去麻烦一次人了~~o(>_
【在 l*****e 的大作中提到】

: chase的副卡卡号和主卡一样，及时影响也影响的是主卡持有人。
: 不过你还是确定一下是否关掉了比较好。
:
: master

l*d2013-10-25 07:10

37 楼

刚刚给的？
反正这两样菜我是非常喜欢，不过你挑食，不知合你胃口否？

【在 c***p 的大作中提到】

: 黄心无黄心无！
: 金花菜我也弄到了
: 游大RP不行所以要多等几天

f*c2013-10-25 07:10

38 楼

有呀，是被你删的哈

【在 l*********d 的大作中提到】

: 怎么把漂亮删了？

f*c2013-10-25 07:10

39 楼

我要喝，喜欢你们安徽滴绿茶，甜甜的

【在 l*********d 的大作中提到】

: 屁颠，屁颠去给你倒茶，结果看到你把漂亮删了。算了，茶还是留着自己喝了。

p*y2013-10-25 07:10

40 楼

师熊的花园越来越像高老庄了
---------- 杯子秋实大猫鱼杯子

l*d2013-10-25 07:10

41 楼

难道我眼花了？

【在 f*****c 的大作中提到】

: 有呀，是被你删的哈

l*d2013-10-25 07:10

42 楼

爱屋及乌吧！

【在 f*****c 的大作中提到】

: 我要喝，喜欢你们安徽滴绿茶，甜甜的

l*d2013-10-25 07:10

43 楼

龙大家才是高老庄！

【在 p*****y 的大作中提到】

: 师熊的花园越来越像高老庄了
: ---------- 杯子秋实大猫鱼杯子

M*72013-10-25 07:10

44 楼

花很好看

f*c2013-10-25 07:10

45 楼

：不是，是真的好喝。好多地方的绿茶冲过2-3次水后就只有涩味，而安徽的绿茶冲多
次水后，即使没茶味，但水也不会涩，甜甜的。
：我喝的安徽绿茶有：太平猴魁，六安瓜片，黄山毛峰，这几款茶都很有特点，特别是
前两种，有机会找来喝喝，真的很不错。

【在 l*********d 的大作中提到】

: 爱屋及乌吧！

m*i2013-10-25 07:10

46 楼

漂亮，期待你明年秀玫瑰园

T*m2013-10-25 07:10

47 楼

好看的花！冬天给我寄一些aster的籽，可以吗？

M*72013-10-25 07:10

48 楼

那三种绿茶属于是中国传统十大名茶（绿茶），当然好喝。祁门的红茶，喝过没有？也
是特别好喝。祁红就是历史上首先拿下英王妃，然后拿下整个英国的茶。可惜冒牌的太
多。

【在 f*****c 的大作中提到】

: ：不是，是真的好喝。好多地方的绿茶冲过2-3次水后就只有涩味，而安徽的绿茶冲多
: 次水后，即使没茶味，但水也不会涩，甜甜的。
: ：我喝的安徽绿茶有：太平猴魁，六安瓜片，黄山毛峰，这几款茶都很有特点，特别是
: 前两种，有机会找来喝喝，真的很不错。

l*d2013-10-25 07:10

49 楼

谢谢老乡捧场，你家的花也非常好看。
明年春天能给我点中国菊花吗？

【在 M****7 的大作中提到】

: 花很好看

l*d2013-10-25 07:10

50 楼

我家有很多茶，而且特别好的。

【在 f*****c 的大作中提到】

g*o2013-10-25 07:10

51 楼

第5个应该是blanket?

【在 l*********d 的大作中提到】

: 1. Aster
: 2. hardy garden mum
: 3. hardy garden mum
: 4. ice plant
: 5. blank flower
: 6. Ballon flower
: 7. Becky flower
: 8.玫瑰们：
: 9.
: 10.

l*d2013-10-25 07:10

52 楼

谢谢！
明年春天我的玫瑰园一定很美，先预告了，lol。

【在 m*****i 的大作中提到】

: 漂亮，期待你明年秀玫瑰园

f*c2013-10-25 07:10

53 楼

喝过，不是很喜欢喝红茶，但喜欢祁红那红浓明亮的汤色和特有的香气

【在 M****7 的大作中提到】

: 那三种绿茶属于是中国传统十大名茶（绿茶），当然好喝。祁门的红茶，喝过没有？也
: 是特别好喝。祁红就是历史上首先拿下英王妃，然后拿下整个英国的茶。可惜冒牌的太
: 多。

l*d2013-10-25 07:10

54 楼

不讲，我差点忘了，被ld拔了，扔垃圾桶去了。
花期太短了，准备放弃了，明年上大理，zinnia 和蓝色的petunia，还有各色的非洲菊
了。

【在 T*******m 的大作中提到】

: 好看的花！冬天给我寄一些aster的籽，可以吗？

f*c2013-10-25 07:10

55 楼

赶紧拿出来喝吧，别放过期了。我怀孕后来喂奶就一直没喝茶，LD也不喜欢，家里好几
罐好茶过期了，好可惜的。现在就只剩普洱可喝了。

【在 l*********d 的大作中提到】

: 我家有很多茶，而且特别好的。

j*n2013-10-25 07:10

56 楼

中间几个和雏菊什么区别

【在 l*********d 的大作中提到】

: 1. Aster
: 2. hardy garden mum
: 3. hardy garden mum
: 4. ice plant
: 5. blank flower
: 6. Ballon flower
: 7. Becky flower
: 8.玫瑰们：
: 9.
: 10.

f*c2013-10-25 07:10

57 楼

很郁闷的说，我是为排你的种子开始狂灌水的，这一灌就没停下来，可是可是上次你寄
种子的时候却寄掉了花种子，我很桑心

【在 l*********d 的大作中提到】

: 不讲，我差点忘了，被ld拔了，扔垃圾桶去了。
: 花期太短了，准备放弃了，明年上大理，zinnia 和蓝色的petunia，还有各色的非洲菊
: 了。

y*22013-10-25 07:10

58 楼

漂亮，喜欢两种颜色的玫瑰9，好象花辨颜色会变似的。

【在 l*********d 的大作中提到】

: 1. Aster
: 2. hardy garden mum
: 3. hardy garden mum
: 4. ice plant
: 5. blank flower
: 6. Ballon flower
: 7. Becky flower
: 8.玫瑰们：
: 9.
: 10.

y*82013-10-25 07:10

59 楼

浮云看来转型完全成功了，好多漂亮的花花。很喜欢你家的Aster。

l*d2013-10-25 07:10

60 楼

En, 漏掉字母了。谢谢小番茄！

【在 g*********o 的大作中提到】

: 第5个应该是blanket?

l*d2013-10-25 07:10

61 楼

没人喝呀！
只有来客人喝。

【在 f*****c 的大作中提到】

: 赶紧拿出来喝吧，别放过期了。我怀孕后来喂奶就一直没喝茶，LD也不喜欢，家里好几
: 罐好茶过期了，好可惜的。现在就只剩普洱可喝了。

l*d2013-10-25 07:10

62 楼

没人喝呀！
只有来客人喝。

【在 f*****c 的大作中提到】

: 赶紧拿出来喝吧，别放过期了。我怀孕后来喂奶就一直没喝茶，LD也不喜欢，家里好几
: 罐好茶过期了，好可惜的。现在就只剩普洱可喝了。

l*d2013-10-25 07:10

63 楼

怎么翻译的问题吧。

【在 j******n 的大作中提到】

: 中间几个和雏菊什么区别

b*h2013-10-25 07:10

64 楼

百花齐放啊!
照得也不错!原来有个老把焦距对不住准的不是你吧？

【在 l*********d 的大作中提到】

: 1. Aster
: 2. hardy garden mum
: 3. hardy garden mum
: 4. ice plant
: 5. blank flower
: 6. Ballon flower
: 7. Becky flower
: 8.玫瑰们：
: 9.
: 10.

l*d2013-10-25 07:10

65 楼

我是按照你们最后点名来装，你自己是否漏点了？
保持这个惯势！

【在 f*****c 的大作中提到】

: 很郁闷的说，我是为排你的种子开始狂灌水的，这一灌就没停下来，可是可是上次你寄
: 种子的时候却寄掉了花种子，我很桑心

j*n2013-10-25 07:10

66 楼

O
Daisy别名很多

【在 l*********d 的大作中提到】

: 怎么翻译的问题吧。

l*d2013-10-25 07:10

67 楼

谢谢！

【在 y****2 的大作中提到】

: 漂亮，喜欢两种颜色的玫瑰9，好象花辨颜色会变似的。

l*d2013-10-25 07:10

68 楼

早拔了，这个是我今天淘的perenial的aster。

【在 y*****8 的大作中提到】

: 浮云看来转型完全成功了，好多漂亮的花花。很喜欢你家的Aster。

l*d2013-10-25 07:10

69 楼

那是相机不好，现在有迷你爱拍的了。

【在 b********h 的大作中提到】

: 百花齐放啊!
: 照得也不错!原来有个老把焦距对不住准的不是你吧？

l*d2013-10-25 07:10

70 楼

那我这些不是daisy，是mum，第一个是aster。
好像很多daisy是annual，但是我这些都是perennial

【在 j******n 的大作中提到】

: O
: Daisy别名很多

b*i2013-10-25 07:10

71 楼

这个时候了还这么漂亮。
我今年的ice plant旱死很多。

【在 l*********d 的大作中提到】

: 1. Aster
: 2. hardy garden mum
: 3. hardy garden mum
: 4. ice plant
: 5. blank flower
: 6. Ballon flower
: 7. Becky flower
: 8.玫瑰们：
: 9.
: 10.

f*c2013-10-25 07:10

72 楼

可惜离你太远，要不隔三差五就来蹭茶喝了

【在 l*********d 的大作中提到】

: 没人喝呀！
: 只有来客人喝。

f*c2013-10-25 07:10

73 楼

肿么会

【在 l*********d 的大作中提到】

: 我是按照你们最后点名来装，你自己是否漏点了？
: 保持这个惯势！

c*p2013-10-25 07:10

74 楼

谁漏点了？

【在 l*********d 的大作中提到】

: 我是按照你们最后点名来装，你自己是否漏点了？
: 保持这个惯势！

j*n2013-10-25 07:10

75 楼

我不大懂就是第一次注意到各种好听名字
查了下aster和daisy貌似一个大类的姐妹
4，5，7则都算daisy

【在 l*********d 的大作中提到】

: 那我这些不是daisy，是mum，第一个是aster。
: 好像很多daisy是annual，但是我这些都是perennial

g*g2013-10-25 07:10

76 楼

花不错，照的太次

a*72013-10-25 07:10

77 楼

漂亮，赞一个

【在 l*********d 的大作中提到】

: 1. Aster
: 2. hardy garden mum
: 3. hardy garden mum
: 4. ice plant
: 5. blank flower
: 6. Ballon flower
: 7. Becky flower
: 8.玫瑰们：
: 9.
: 10.

l*12013-10-25 07:10

78 楼

花很美！浮云MM该买个好相机了。

l*d2013-10-25 07:10

79 楼

谢谢，玫瑰真好，花期长！
我育了几千棵iceplant，还买了几盆都莫名奇妙死了，本来预期满坡的iceplant，现在
也就零星几处了。

【在 b********i 的大作中提到】

: 这个时候了还这么漂亮。
: 我今年的ice plant旱死很多。

l*12013-10-25 07:10

80 楼

浮云，你的黄心乌怎么样了？有多大了？给咱们看看呗。

l*d2013-10-25 07:10

81 楼

带娃来！
看看我家儿子跟你家闺女是否有缘！

【在 f*****c 的大作中提到】

: 可惜离你太远，要不隔三差五就来蹭茶喝了

l*d2013-10-25 07:10

82 楼

刚刚移栽，等到12月份才能有样子。
我在盆里育的苗，苗很小，但是不弱，很适合移栽。

【在 l*****1 的大作中提到】

: 浮云，你的黄心乌怎么样了？有多大了？给咱们看看呗。

l*12013-10-25 07:10

83 楼

哦，那我现在移的岂不是太早了么？

【在 l*********d 的大作中提到】

: 刚刚移栽，等到12月份才能有样子。
: 我在盆里育的苗，苗很小，但是不弱，很适合移栽。

l*d2013-10-25 07:10

84 楼

4肯定不属于，iceplant是多肉。

【在 j******n 的大作中提到】

: 我不大懂就是第一次注意到各种好听名字
: 查了下aster和daisy貌似一个大类的姐妹
: 4，5，7则都算daisy

l*d2013-10-25 07:10

85 楼

现在虫子多，我在盆里育苗的时候，抓到几十条青虫。
你的没被虫吃了？

【在 l*****1 的大作中提到】

: 哦，那我现在移的岂不是太早了么？

l*12013-10-25 07:10

86 楼

到目前为止还好。

【在 l*********d 的大作中提到】

: 现在虫子多，我在盆里育苗的时候，抓到几十条青虫。
: 你的没被虫吃了？

l*d2013-10-25 07:10

87 楼

哎，钻缝每次都拿我当反面教材，又把我放到首页示众了一天。

【在 g**********g 的大作中提到】

: 花不错，照的太次

l*d2013-10-25 07:10

88 楼

谢谢！

【在 a*******7 的大作中提到】

: 漂亮，赞一个

l*d2013-10-25 07:10

89 楼

不干，准备租老四家的兔子。

【在 l*****1 的大作中提到】

: 花很美！浮云MM该买个好相机了。

f*c2013-10-25 07:10

90 楼

那你得搬离我近点才有可能

【在 l*********d 的大作中提到】

: 带娃来！
: 看看我家儿子跟你家闺女是否有缘！

l*d2013-10-25 07:10

91 楼

那等这个月底下霜后，就可以开吃了。

【在 l*****1 的大作中提到】

: 到目前为止还好。

l*d2013-10-25 07:10

92 楼

你不是空姐吗？

【在 f*****c 的大作中提到】

: 那你得搬离我近点才有可能

f*c2013-10-25 07:10

93 楼

空姐也不能自己飞呀

【在 l*********d 的大作中提到】

: 你不是空姐吗？