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哪位大神用crisper/CAS9 做过single point mutation的KI?
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哪位大神用crisper/CAS9 做过single point mutation的KI?# Biology - 生物学
d*t
1
刚刚拿了个offer,有些心得,希望对正在找工作的朋友们有点帮助。
1.电面前和on-site前要多做功课,个人觉得恨重要。包括了解公司和team的背景,也可以联系公司内部的人了解一下。我在linkedIn找到一个,虽然不是一个team,但是给了我不少中肯的建议。这样,到时候强调自己背景和他们match的地方会比较有的放矢。
2.多准备些问题,因为面试官一般都会留时间给你问问题。这时候很重要,他们可能要看你的知识面够不够宽,对职位有多了解,对公司感不感兴趣。我第一个on-site就死在这个地方了。Sigh...
3.面试过程中每个人都要做笔记,帮助你回答后面的面试人的问题,同时也让人感觉你take it serious.
4.面试开始有机会可以交换下名片,拉近自己和面试者的距离,增强你的第一印象,也方便以后写感谢信。
5.多多观察,其实自己背景多强有时候真的没有“那么”重要,能猜到面试人的心思或者说学会倾听个人感觉更重要一些。这个有点云山雾罩了:)大家自己体会吧。
以上是个人拙见(我只有两个on-site,样本数偏少,所以经验未必适用于每个人),但是还是希望对大家以后的面试有点帮助。
我相信这里很多人都经历过on-site失败,一切都会过去,没关系吧。
而且请坚信下一个offer一定是更好的...至少在我这里验证过了:)
Good luck to your job hunting!
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S*n
2
EB1A I-140, RD6/15/2010, PP3/4/2011, AD3/9/2011
实在等不了的,PP吧!!!
Background FYI:
Mechanical Engineer
4 Journal (2 first author)
15 Conference Papers (4 first author)
Citation: ~120 by others
Review: Total 12 for 4 journals + several conferences
Claim: authorship, contribution and review
板上Y律师办的,在我坚持下同意PP
祝我们大家都能早点绿!
包子很少,够发7个
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c*7
3
中国传媒大学“23点后禁止男士通行” Mitbbs.com
一座普通的过街天桥,却在旁边立了一个牌子,写着“23点后禁止男士通行”。这是近
日出现在中国传媒大学中的一幕。据了解,天桥主要是为了方便学生们穿行宿舍区和教
学区。由于天桥一端距离女生宿舍较近,学校保卫处在此设立告示牌,告诫男生深夜不
要在此活动。Mitbbs.com
记者昨天在传媒大学见到了这座天桥和牌子(见图)。天桥西侧是女生宿舍和生活区,
另外还有小超市、理发馆等生活设施。而天桥的东侧,则是学校的教学区,天桥跨越的
是定福庄东街,这条街属于校外的公共道路。“去年有了这座天桥,在此之前,我们去
教学区需要往北绕行几百米出宿舍区,再进入教学区。” 一位女生说。Mitbbs.com
据了解,大约一周前,天桥旁出现了这个蓝色的告示牌。“男生有时候买点东西或者接
送女友,也经常要通过这个天桥,来到女生宿舍的生活区。”一名女生介绍说,“有的
时候我们在学校机房做作品,回来晚了,能看见有男生在天桥上停留。”Mitbbs.com
虽然天桥限时禁止男士通行,但是并没有专人管理,“我估计学校是想让学生自觉,防
止干扰女生们的休息。有时候过了23点,我会去对面的小超市买点吃的。我觉得学校的
男生都挺自觉的,不会打扰女生的正常生活,更不会做违法乱纪的事情。”一位小伙子
拿着可乐和方便面走下天桥,“有了这个牌子,晚上有时候还会有男生送女朋友或者买
东西经过,不过大家都理解牌子的意思,所以送完人或者买完东西,赶紧离开就是了。
”Mitbbs.com
据一位宿舍管理员介绍,在天桥前设置牌子,主要是对男生提出警示:“以前有过男生
在天桥上停留,大晚上在这聊天,让过路的女生们有些紧张。大晚上的,就别来女生宿
舍这边了,送女朋友送到天桥下就够了,别打扰女生们的正常休息。”Mitbbs.com
“都晚上11点多了,还要干嘛?”昨天,传媒大学保卫处工作人员告诉记者,这个牌子
是保卫部门立在天桥下的,“就是告诫男同学,晚上就不要在天桥上和女生宿舍区乱走
动了,以免影响他人休息。”Mitbbs.com
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r*k
4
如题。 小弟想想做cell line的KI。不知道哪位大神做过? 质粒我都拿到了。 不知道
大家都用什么样的protocol呢?
非常感谢
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G*7
5
Very useful. Thanks.
By the way, what is your major? CS? EE?
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d*2
6
cong

【在 S******n 的大作中提到】
: EB1A I-140, RD6/15/2010, PP3/4/2011, AD3/9/2011
: 实在等不了的,PP吧!!!
: Background FYI:
: Mechanical Engineer
: 4 Journal (2 first author)
: 15 Conference Papers (4 first author)
: Citation: ~120 by others
: Review: Total 12 for 4 journals + several conferences
: Claim: authorship, contribution and review
: 板上Y律师办的,在我坚持下同意PP

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B*e
7
那个牌很假啊。。。连字体大小都不一致。。。
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T*u
8
直接转染筛选即可

【在 r******k 的大作中提到】
: 如题。 小弟想想做cell line的KI。不知道哪位大神做过? 质粒我都拿到了。 不知道
: 大家都用什么样的protocol呢?
: 非常感谢

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c*e
9
thanks
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E*H
10
and Con.
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c*7
11
这个是我在首页上看到的新闻=。=
没有去过这个学校,不知道这个桥会不会被从新命名

【在 B********e 的大作中提到】
: 那个牌很假啊。。。连字体大小都不一致。。。
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l*i
12
ssDNA oligo as donor, puro screen, should be easy~

【在 r******k 的大作中提到】
: 如题。 小弟想想做cell line的KI。不知道哪位大神做过? 质粒我都拿到了。 不知道
: 大家都用什么样的protocol呢?
: 非常感谢

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d*t
13
ECE. Thanks.

【在 G**7 的大作中提到】
: Very useful. Thanks.
: By the way, what is your major? CS? EE?

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g*i
14
恭喜,太牛了!

【在 S******n 的大作中提到】
: EB1A I-140, RD6/15/2010, PP3/4/2011, AD3/9/2011
: 实在等不了的,PP吧!!!
: Background FYI:
: Mechanical Engineer
: 4 Journal (2 first author)
: 15 Conference Papers (4 first author)
: Citation: ~120 by others
: Review: Total 12 for 4 journals + several conferences
: Claim: authorship, contribution and review
: 板上Y律师办的,在我坚持下同意PP

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s*y
15
棒打鸳鸯桥?

【在 c*******7 的大作中提到】
: 这个是我在首页上看到的新闻=。=
: 没有去过这个学校,不知道这个桥会不会被从新命名

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f*g
16
crisper/CAS9 究竟怎么工作? homologous recombination ? or RNAi ?
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l*1
17
wow~首页啦,咔咔
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t*l
18
恭喜,早日拿卡!

【在 S******n 的大作中提到】
: EB1A I-140, RD6/15/2010, PP3/4/2011, AD3/9/2011
: 实在等不了的,PP吧!!!
: Background FYI:
: Mechanical Engineer
: 4 Journal (2 first author)
: 15 Conference Papers (4 first author)
: Citation: ~120 by others
: Review: Total 12 for 4 journals + several conferences
: Claim: authorship, contribution and review
: 板上Y律师办的,在我坚持下同意PP

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c*7
19
夕巳心桥

【在 s******y 的大作中提到】
: 棒打鸳鸯桥?
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M*n
20
楼上二位能不能多分享一些经验?
具体讲讲要注意点啥

【在 f*******g 的大作中提到】
: crisper/CAS9 究竟怎么工作? homologous recombination ? or RNAi ?
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d*t
21
之前在这里得到了很多帮助。
有机会和大家分享自己的一点经验,感觉真的不错啊!

【在 l***1 的大作中提到】
: wow~首页啦,咔咔
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l*t
22
congrats

发信人: Soberman (天路过客), 信区: Immigration
标 题: EB1A I-140, RD6/15/2010, PP 3/4/2011, AD 3/9/2011
发信站: BBS 未名空间站 (Thu Mar 10 07:02:28 2011, 美东)
EB1A I-140, RD6/15/2010, PP3/4/2011, AD3/9/2011
实在等不了的,PP吧!!!
Background FYI:
Mechanical Engineer
4 Journal (2 first author)
15 Conference Papers (4 first author)
Citation: ~120 by others
Review: Total 12 for 4 journals + several conferences
Claim: authorship, contribution and review
板上Y律师办的,在我坚持下同意PP
祝我们大家都能早点绿!
包子很少,够发7个

【在 S******n 的大作中提到】
: EB1A I-140, RD6/15/2010, PP3/4/2011, AD3/9/2011
: 实在等不了的,PP吧!!!
: Background FYI:
: Mechanical Engineer
: 4 Journal (2 first author)
: 15 Conference Papers (4 first author)
: Citation: ~120 by others
: Review: Total 12 for 4 journals + several conferences
: Claim: authorship, contribution and review
: 板上Y律师办的,在我坚持下同意PP

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p*w
23
已经有一个地铁站叫传媒大学了还不够啊

函数,离散数学等相关课程,由此造成的,高中不录取,大学不录取,学位证无,出国
offer无等相关问题,请与本人领导联系。联系电话(212)-1212-212
,请找我们领导。

【在 c*******7 的大作中提到】
: 这个是我在首页上看到的新闻=。=
: 没有去过这个学校,不知道这个桥会不会被从新命名

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r*k
24
是呀 光这么说 小弟愚钝不太懂。。。

【在 M*****n 的大作中提到】
: 楼上二位能不能多分享一些经验?
: 具体讲讲要注意点啥

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l*1
25
您真客气,眼镜配了吗?

【在 d****t 的大作中提到】
: 之前在这里得到了很多帮助。
: 有机会和大家分享自己的一点经验,感觉真的不错啊!

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M*9
26
cong!
等包子!
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d*g
27
23:00点后
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r*k
28
大神 有具体操作吗? 小弟愚钝。。。

【在 l*********i 的大作中提到】
: ssDNA oligo as donor, puro screen, should be easy~
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o*m
29
记笔记这个问题,面试官与被面试者都做笔记的话,有点怪怪的。这个时候还是拼记忆
力好点吧。
交换名片,恭喜,你已经有一张自己的名片了。

也可以联系公司内部的人了解一下。我在linkedIn找到一个,虽然不是一个team,但是
给了我不少中肯的建议。这样,到时候强调自己背景和他们match的地方会比较有的放
矢。
要看你的知识面够不够宽,对职位有多了解,对公司感不感兴趣。我第一个on-site就
死在这个地方了。Sigh...
你take it serious.
也方便以后写感谢信。
或者说学会倾听个人感觉更重要一些。这个有点云山雾罩了:)大家自己体会吧。
但是还是希望对大家以后的面试有点帮助。

【在 d****t 的大作中提到】
: 刚刚拿了个offer,有些心得,希望对正在找工作的朋友们有点帮助。
: 1.电面前和on-site前要多做功课,个人觉得恨重要。包括了解公司和team的背景,也可以联系公司内部的人了解一下。我在linkedIn找到一个,虽然不是一个team,但是给了我不少中肯的建议。这样,到时候强调自己背景和他们match的地方会比较有的放矢。
: 2.多准备些问题,因为面试官一般都会留时间给你问问题。这时候很重要,他们可能要看你的知识面够不够宽,对职位有多了解,对公司感不感兴趣。我第一个on-site就死在这个地方了。Sigh...
: 3.面试过程中每个人都要做笔记,帮助你回答后面的面试人的问题,同时也让人感觉你take it serious.
: 4.面试开始有机会可以交换下名片,拉近自己和面试者的距离,增强你的第一印象,也方便以后写感谢信。
: 5.多多观察,其实自己背景多强有时候真的没有“那么”重要,能猜到面试人的心思或者说学会倾听个人感觉更重要一些。这个有点云山雾罩了:)大家自己体会吧。
: 以上是个人拙见(我只有两个on-site,样本数偏少,所以经验未必适用于每个人),但是还是希望对大家以后的面试有点帮助。
: 我相信这里很多人都经历过on-site失败,一切都会过去,没关系吧。
: 而且请坚信下一个offer一定是更好的...至少在我这里验证过了:)
: Good luck to your job hunting!

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z*8
30
cong!
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g*n
31
我上大学的时候有一条校规"不准勾肩搭背",连我那特正经的老娘看了都笑坏了
男人跟男人没事,男人跟女人勾肩搭背在校园里逛就不行
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r*k
32
大神 有具体操作吗? 小弟愚钝。。。

【在 l*********i 的大作中提到】
: ssDNA oligo as donor, puro screen, should be easy~
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t*m
33
good thanks
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s*a
34
cong

【在 S******n 的大作中提到】
: EB1A I-140, RD6/15/2010, PP3/4/2011, AD3/9/2011
: 实在等不了的,PP吧!!!
: Background FYI:
: Mechanical Engineer
: 4 Journal (2 first author)
: 15 Conference Papers (4 first author)
: Citation: ~120 by others
: Review: Total 12 for 4 journals + several conferences
: Claim: authorship, contribution and review
: 板上Y律师办的,在我坚持下同意PP

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l*i
35
zhang feng的nature protocol写的如此详细,看看去啊

【在 r******k 的大作中提到】
: 大神 有具体操作吗? 小弟愚钝。。。
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q*n
36
好建议,不过, 自己相亲没出问题,也要看到相亲会的阴暗面。

也可以联系公司内部的人了解一下。我在linkedIn找到一个,虽然不是一个team,但是
给了我不少中肯的建议。这样,到时候强调自己背景和他们match的地方会比较有的放
矢。
要看你的知识面够不够宽,对职位有多了解,对公司感不感兴趣。我第一个on-site就
死在这个地方了。Sigh...
你take it serious.
也方便以后写感谢信。
或者说学会倾听个人感觉更重要一些。这个有点云山雾罩了:)大家自己体会吧。
但是还是希望对大家以后的面试有点帮助。

【在 d****t 的大作中提到】
: 刚刚拿了个offer,有些心得,希望对正在找工作的朋友们有点帮助。
: 1.电面前和on-site前要多做功课,个人觉得恨重要。包括了解公司和team的背景,也可以联系公司内部的人了解一下。我在linkedIn找到一个,虽然不是一个team,但是给了我不少中肯的建议。这样,到时候强调自己背景和他们match的地方会比较有的放矢。
: 2.多准备些问题,因为面试官一般都会留时间给你问问题。这时候很重要,他们可能要看你的知识面够不够宽,对职位有多了解,对公司感不感兴趣。我第一个on-site就死在这个地方了。Sigh...
: 3.面试过程中每个人都要做笔记,帮助你回答后面的面试人的问题,同时也让人感觉你take it serious.
: 4.面试开始有机会可以交换下名片,拉近自己和面试者的距离,增强你的第一印象,也方便以后写感谢信。
: 5.多多观察,其实自己背景多强有时候真的没有“那么”重要,能猜到面试人的心思或者说学会倾听个人感觉更重要一些。这个有点云山雾罩了:)大家自己体会吧。
: 以上是个人拙见(我只有两个on-site,样本数偏少,所以经验未必适用于每个人),但是还是希望对大家以后的面试有点帮助。
: 我相信这里很多人都经历过on-site失败,一切都会过去,没关系吧。
: 而且请坚信下一个offer一定是更好的...至少在我这里验证过了:)
: Good luck to your job hunting!

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m*q
37
CONG!

【在 S******n 的大作中提到】
: EB1A I-140, RD6/15/2010, PP3/4/2011, AD3/9/2011
: 实在等不了的,PP吧!!!
: Background FYI:
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: 15 Conference Papers (4 first author)
: Citation: ~120 by others
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r*k
38
好的好的!

【在 l*********i 的大作中提到】
: zhang feng的nature protocol写的如此详细,看看去啊
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s*n
39
mark
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p*i
40
BIG CONG!

【在 S******n 的大作中提到】
: EB1A I-140, RD6/15/2010, PP3/4/2011, AD3/9/2011
: 实在等不了的,PP吧!!!
: Background FYI:
: Mechanical Engineer
: 4 Journal (2 first author)
: 15 Conference Papers (4 first author)
: Citation: ~120 by others
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: Claim: authorship, contribution and review
: 板上Y律师办的,在我坚持下同意PP

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m*D
41
Thanks a lot! Just assigned by my boss to develop this technology for the
lab.

【在 l*********i 的大作中提到】
: zhang feng的nature protocol写的如此详细,看看去啊
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s*g
42
nice, thx

也可以联系公司内部的人了解一下。我在linkedIn找到一个,虽然不是一个team,但是
给了我不少中肯的建议。这样,到时候强调自己背景和他们match的地方会比较有的放
矢。
要看你的知识面够不够宽,对职位有多了解,对公司感不感兴趣。我第一个on-site就
死在这个地方了。Sigh...
你take it serious.
也方便以后写感谢信。
或者说学会倾听个人感觉更重要一些。这个有点云山雾罩了:)大家自己体会吧。
但是还是希望对大家以后的面试有点帮助。

【在 d****t 的大作中提到】
: 刚刚拿了个offer,有些心得,希望对正在找工作的朋友们有点帮助。
: 1.电面前和on-site前要多做功课,个人觉得恨重要。包括了解公司和team的背景,也可以联系公司内部的人了解一下。我在linkedIn找到一个,虽然不是一个team,但是给了我不少中肯的建议。这样,到时候强调自己背景和他们match的地方会比较有的放矢。
: 2.多准备些问题,因为面试官一般都会留时间给你问问题。这时候很重要,他们可能要看你的知识面够不够宽,对职位有多了解,对公司感不感兴趣。我第一个on-site就死在这个地方了。Sigh...
: 3.面试过程中每个人都要做笔记,帮助你回答后面的面试人的问题,同时也让人感觉你take it serious.
: 4.面试开始有机会可以交换下名片,拉近自己和面试者的距离,增强你的第一印象,也方便以后写感谢信。
: 5.多多观察,其实自己背景多强有时候真的没有“那么”重要,能猜到面试人的心思或者说学会倾听个人感觉更重要一些。这个有点云山雾罩了:)大家自己体会吧。
: 以上是个人拙见(我只有两个on-site,样本数偏少,所以经验未必适用于每个人),但是还是希望对大家以后的面试有点帮助。
: 我相信这里很多人都经历过on-site失败,一切都会过去,没关系吧。
: 而且请坚信下一个offer一定是更好的...至少在我这里验证过了:)
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e*1
43
gongxi!
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r*z
44

ssDNA转染细胞效率很低吧???

【在 l*********i 的大作中提到】
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e*c
45
big cong!

【在 S******n 的大作中提到】
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j*i
46
转染效率跟哪种细胞有关。CRISPR+ssDNA要拿到想要的克隆还是挺费劲的。可以考虑
CRISPR+piggybac+puroTK的结合来筛选克隆。

【在 r***z 的大作中提到】
:
: ssDNA转染细胞效率很低吧???

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b*r
47
cong
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s*g
48
不需要antibiotic selection的方法。
Isolation of single-base genome-edited human iPS cells without antibiotic
selection
Yuichiro Miyaoka, Amanda H Chan, Luke M Judge, Jennie Yoo, Miller Huang,
Trieu D Nguyen, Paweena P Lizarraga, Po-Lin So & Bruce R Conklin
Nature Methods 11, 291–293 (2014) doi:10.1038/nmeth.2840
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g*r
49
Cong!

【在 S******n 的大作中提到】
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m*3
50
CONG
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I*1
51
这个引用太强了
GX

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p*l
52
恭喜!
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x*3
53
Cong!!!!!
为什么我还在煎熬中,我的pp是3/2的, lz有任何soft lud么?

【在 S******n 的大作中提到】
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g*r
54
Cong!

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f*h
55
gxgx...................
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L*y
56
gxgx
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i*u
57
gxgx!
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b*0
58
big cong

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d*e
59
GX!
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A*n
60
GONGXI
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g*3
61
Cong!
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c*t
62
cong
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h*i
63
gxgx
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G*0
64
GXGX
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g*3
65
GXGX
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w*h
66
cong!

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: EB1A I-140, RD6/15/2010, PP3/4/2011, AD3/9/2011
: 实在等不了的,PP吧!!!
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