请教genotyping的问题# Biology - 生物学
n*l
1 楼
我刚开始做小鼠，所以从genotyping做起。
现在问题来了。第一次用相同的kit，primer做了结果挺好的。结果我repeat的时候，
用同样提取的基因组DNA竟然做不出了（PCR产物几乎看不见）。我试了不同公司的kit
，结果一样。
我保存基因组DNA的时候是-20，是不是反复冻融，DNA降解了呢。GENOSOME是加入
buffer和proteinaseK overnight，然后85度1小时。用上清做的PCR。
另外，我用别人提取的基因组DNA是做出来的PCR结果的。
今天又来了一批新样品，我重新提取了基因组，然后做，什么也没有啊，阳性对照说明
我的反应体系没有问题。难道，我提取的方法出问题了么？这批是老鼠的手指头。
实在想不通那里出问题了。好发愁啊。
现在问题来了。第一次用相同的kit，primer做了结果挺好的。结果我repeat的时候，
用同样提取的基因组DNA竟然做不出了（PCR产物几乎看不见）。我试了不同公司的kit
，结果一样。
我保存基因组DNA的时候是-20，是不是反复冻融，DNA降解了呢。GENOSOME是加入
buffer和proteinaseK overnight，然后85度1小时。用上清做的PCR。
另外，我用别人提取的基因组DNA是做出来的PCR结果的。
今天又来了一批新样品，我重新提取了基因组，然后做，什么也没有啊，阳性对照说明
我的反应体系没有问题。难道，我提取的方法出问题了么？这批是老鼠的手指头。
实在想不通那里出问题了。好发愁啊。
