n*w
2 楼
Cre被silence不工作了?
S*h
3 楼
southern blot 看DNA
f*e
4 楼
太不详细了,ko,cko,iko....
d*i
11 楼
谢谢你的建议。
我的flox mice 是别人给的,发过文章的。不过他们用的其他组织的cre
而我们用的另外一个组织的cre. 我们的cre也应该没有问题(和其他癌基因cross后能
成瘤)
【在 f*******e 的大作中提到】![](/moin_static193/solenoid/img/up.png)
: 先假设抗体特异,cre好使,loxp正确。
: 你检测下你可以切掉的部分,有些时候切掉一个exon还能形成转录本,不frameshift还
: 能有蛋白。primer至少一头设计在切除的部分上。做个pcr。
:
:
: 是conditional KO
:
: fl/fl tissue specific cre
:
: 两者genotyping 都是对的。
:
: 请教会是什么原因??
:
我的flox mice 是别人给的,发过文章的。不过他们用的其他组织的cre
而我们用的另外一个组织的cre. 我们的cre也应该没有问题(和其他癌基因cross后能
成瘤)
【在 f*******e 的大作中提到】
![](/moin_static193/solenoid/img/up.png)
: 先假设抗体特异,cre好使,loxp正确。
: 你检测下你可以切掉的部分,有些时候切掉一个exon还能形成转录本,不frameshift还
: 能有蛋白。primer至少一头设计在切除的部分上。做个pcr。
:
:
: 是conditional KO
:
: fl/fl tissue specific cre
:
: 两者genotyping 都是对的。
:
: 请教会是什么原因??
:
n*e
12 楼
可能是overlapping PCR,同源DNA在vector和基因组里面都有,两个不相干的DNA分子
粘在一起放大了。用过一个PCR enzyme特别好,也发生过这个现象。不好的PCR enzyme
不会发生。降低PCR的循环数会去除这个overlapping PCR。
粘在一起放大了。用过一个PCR enzyme特别好,也发生过这个现象。不好的PCR enzyme
不会发生。降低PCR的循环数会去除这个overlapping PCR。
s*v
14 楼
这种组织或者细胞特异的ko,直接上IHC啊。
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