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求教一个Brain CKO 导致小鼠出生死亡的问题。
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求教一个Brain CKO 导致小鼠出生死亡的问题。# Biology - 生物学
i*0
1
实验室最近做个一个基因的brain CKO, 用的是Nestin-cre,P7 以后剪尾巴,已经追踪
了400多个nb,发现没有 F/F CRE+ 小鼠,实验室的学生长了个心眼,每天早晚都去动
物房看动物,发现F/F CRE+是可以出生的,但是出生12-24小鼠内就死掉了。目前唯一
F/F CRE+的表现就是小鼠吃奶有问题,出生后第一天的野生型小鼠的胃里面都是有白白
的母乳,但是 F/F CRE+小鼠没有。这种情况如何解释?小鼠到底是为啥死亡的?求教
各位小鼠专家。
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D*g
2
一天不吃东西也不至于饿死。检查一些肺功能和血液,是不是有问题?
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S*h
3
不做小鼠。看你的描述,你们应该是关注这个基因在神经系统中的功能,应该先从检查
cKO小鼠的脑子开始。至于导致死亡的原因,可能是多方面的。
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N*o
4
Lag3-KO老鼠生下来就不会吃奶,然后就挂了。你这个也是,很有意思的基因。
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a*c
5
我们原来做的基因敲除小鼠,表型主要集中于大脑,也是出生后24小时内死亡,milk很
少。粗略的说,在胚胎发育阶段,大脑的功能远远没有心脏那么重要,出问题也不至于
导致死亡。出生之后,呼吸、哺乳、肌肉运动都会直接影响到生存。至于直接致死原因
,完全弄明白其实很不容易,也没有必要。研究的目的是看你所感兴趣的基因的功能,
而死亡都不知道是几级之后的次级效应了。下一步可以做脑组织切片,看H&E,
apoptotic marker,体外培养神经元做电生理,换GFAP cre看特异性等等。



【在 i*********0 的大作中提到】
: 实验室最近做个一个基因的brain CKO, 用的是Nestin-cre,P7 以后剪尾巴,已经追踪
: 了400多个nb,发现没有 F/F CRE+ 小鼠,实验室的学生长了个心眼,每天早晚都去动
: 物房看动物,发现F/F CRE+是可以出生的,但是出生12-24小鼠内就死掉了。目前唯一
: F/F CRE+的表现就是小鼠吃奶有问题,出生后第一天的野生型小鼠的胃里面都是有白白
: 的母乳,但是 F/F CRE+小鼠没有。这种情况如何解释?小鼠到底是为啥死亡的?求教
: 各位小鼠专家。

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i*0
6
多谢指点。相关的分析已经在进行中。

【在 a****c 的大作中提到】
: 我们原来做的基因敲除小鼠,表型主要集中于大脑,也是出生后24小时内死亡,milk很
: 少。粗略的说,在胚胎发育阶段,大脑的功能远远没有心脏那么重要,出问题也不至于
: 导致死亡。出生之后,呼吸、哺乳、肌肉运动都会直接影响到生存。至于直接致死原因
: ,完全弄明白其实很不容易,也没有必要。研究的目的是看你所感兴趣的基因的功能,
: 而死亡都不知道是几级之后的次级效应了。下一步可以做脑组织切片,看H&E,
: apoptotic marker,体外培养神经元做电生理,换GFAP cre看特异性等等。
:
: 一

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i*0
7
多谢。

【在 S*****h 的大作中提到】
: 不做小鼠。看你的描述,你们应该是关注这个基因在神经系统中的功能,应该先从检查
: cKO小鼠的脑子开始。至于导致死亡的原因,可能是多方面的。

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i*0
8
谢谢楼上几位的指点。
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D*g
9
https://www.jax.org/strain/026644
很有意思。不过看jax的描述,好像没有这么严重,是这个lag3 kO吗?

【在 N******o 的大作中提到】
: Lag3-KO老鼠生下来就不会吃奶,然后就挂了。你这个也是,很有意思的基因。
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l*d
10
没必要深究,perinatal death是个很烂的phenotype, 除非能有specific rescue by
a compound。
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N*o
11
噢,真的是啊。可惜我已经离开Lab不做这个了。早知道就好了。谢谢你。

【在 D****g 的大作中提到】
: https://www.jax.org/strain/026644
: 很有意思。不过看jax的描述,好像没有这么严重,是这个lag3 kO吗?

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r*z
12
P0的胃里没奶,是没喝进去奶呛死了。Nestin-cre 会在口腔上皮上表达,可以看看是
否 cleft palate。
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i*0
13
THANKS!

【在 r***z 的大作中提到】
: P0的胃里没奶,是没喝进去奶呛死了。Nestin-cre 会在口腔上皮上表达,可以看看是
: 否 cleft palate。

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r*r
14
先确定一下有没有别的表型。
“其他都没问题,只是不吃奶” 还是 “运动、呼吸各方面都有障碍且不吃奶。”



【在 i*********0 的大作中提到】
: 实验室最近做个一个基因的brain CKO, 用的是Nestin-cre,P7 以后剪尾巴,已经追踪
: 了400多个nb,发现没有 F/F CRE+ 小鼠,实验室的学生长了个心眼,每天早晚都去动
: 物房看动物,发现F/F CRE+是可以出生的,但是出生12-24小鼠内就死掉了。目前唯一
: F/F CRE+的表现就是小鼠吃奶有问题,出生后第一天的野生型小鼠的胃里面都是有白白
: 的母乳,但是 F/F CRE+小鼠没有。这种情况如何解释?小鼠到底是为啥死亡的?求教
: 各位小鼠专家。

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r*r
15
还是会死的。脱水死掉了。

【在 D****g 的大作中提到】
: 一天不吃东西也不至于饿死。检查一些肺功能和血液,是不是有问题?
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i*0
16
thanks!

【在 r**********r 的大作中提到】
: 先确定一下有没有别的表型。
: “其他都没问题,只是不吃奶” 还是 “运动、呼吸各方面都有障碍且不吃奶。”
:
: 一

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l*h
17
这种实验每天早晚两次检查动物是常规。



【在 i*********0 的大作中提到】
: 实验室最近做个一个基因的brain CKO, 用的是Nestin-cre,P7 以后剪尾巴,已经追踪
: 了400多个nb,发现没有 F/F CRE+ 小鼠,实验室的学生长了个心眼,每天早晚都去动
: 物房看动物,发现F/F CRE+是可以出生的,但是出生12-24小鼠内就死掉了。目前唯一
: F/F CRE+的表现就是小鼠吃奶有问题,出生后第一天的野生型小鼠的胃里面都是有白白
: 的母乳,但是 F/F CRE+小鼠没有。这种情况如何解释?小鼠到底是为啥死亡的?求教
: 各位小鼠专家。

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