Re: 细胞传代求助# Biology - 生物学
d*e
1 楼
Trypsin, pepsin 等对LH receptor影响不大{Gospodarowicz 1973}. 所以也可能是其它
的一些原因：cells condition, monolayer overlapping之类的问题.当然commercial
trypsin function本身就比较复杂，有时有些人就用较纯化或重组的trypsin和胶原酶之
类成份确定的混合物去消化。
我的感觉是你是否让你的宝贝细胞刚长得90%confluence后，hanks washing triple,再用
0.05%trypsin在不同温度（Rm, 36）消化一下看有没有提高。
实在不行就定些Cell Dissociation Buffer or Enzyme Free Dissociation
Reagents(60% confluence)，但我总认为是花拳秀腿，但也许就对你的实验管用。
另外培养界面，polypropylene, glass, teflon-coated 都是option,但我对这些不熟悉
。可能还有几个较流氓的方法，冰水超声,内置tiny cover slides, 瞬时低渗
的一些原因：cells condition, monolayer overlapping之类的问题.当然commercial
trypsin function本身就比较复杂，有时有些人就用较纯化或重组的trypsin和胶原酶之
类成份确定的混合物去消化。
我的感觉是你是否让你的宝贝细胞刚长得90%confluence后，hanks washing triple,再用
0.05%trypsin在不同温度（Rm, 36）消化一下看有没有提高。
实在不行就定些Cell Dissociation Buffer or Enzyme Free Dissociation
Reagents(60% confluence)，但我总认为是花拳秀腿，但也许就对你的实验管用。
另外培养界面，polypropylene, glass, teflon-coated 都是option,但我对这些不熟悉
。可能还有几个较流氓的方法，冰水超声,内置tiny cover slides, 瞬时低渗