请问有人做过BSA ELISA quantitation吗？ - 未名空间MITBBS历史存档

请问有人做过BSA ELISA quantitation吗？# Biology - 生物学

S*s2010-09-02 07:09

1 楼

H1b已经拿到approved的receipt，在10月1日生效前回国的话（自然是以F1(OPT)身份回
国），下列几种情况（我属于2.2情况）
1）之前的F1回美visa过期的话，因为不能去领事馆签F1 visa，会影响
已经申请的H1b，只能去领事馆申请H1b visa，且只能在9月20日才能入境。
2）之前的F1回美visa在回美国之前未过期，那么
2.1）如果回国期间是opt cap-gap，也就是回美的时候opt已经过期，那么必须去领事
馆申请H1b visa，且只能在9月20日后才能入境；
2.2）回美时候原始OPT未过期，那么问题是：是否可以直接以未过期的F1 visa来回美
国？
我的opt是明年初才过期，且有明年初才过期的F1 VISA （今年初刚回国拿到的），请
教是否可以以这个F1 visa免签证回来美国吗？

m*w2010-09-02 07:09

2 楼

年龄:
三十出头
家庭:
俩孩子一岁和三岁,老公在tenure track,没老人帮忙
背景:
博士毕业五年,还在搞技术,以前在业内最大的公司工作,去年初随老公来到这个中
西部小城市,在一个中等大小公司(10,000人不到).
在现在这个公司工作轻松,从不需要加班.但个人感觉工作缺乏挑战性,非常苦闷.公
司小的好处是能见度较高,公司Ph.D.很少,CTO对我印象也不错,慢慢混年头过两年做个
中层管理应该问题不大.

想读part time MBA的原因:
1.我的专业就业较窄,以后老公如果去更好的学校要换地方, MBA可以拓宽我的就业范围
??
2.因为工作没有挑战性,让我感觉很痛苦,想给自己找点事做,寻找生活的目标;
3.老公对我全力支持;
4.读老公的学校只要付很少的学费;
5.如果不转行对以后找工作也许有帮助.
不读part time MBA的原因:
1.老公工作已经很忙,周六加班,而且常出去开会,我读书会加重老公的负担;
2.老公的学校商学院排名靠后,在50左右,读出来以后找工作前景未知
3.要读书的话肯定要请保姆,和孩子待的时间会很少.

l*t2010-09-02 07:09

3 楼

作案时间: 周四下午至傍晚
作案方位: 屯子东北120公里
作案天气: 毒阳高照，又闷又热
作案方式: 循循善诱，甜言蜜语
作案成果: 看下面
** 米国鲥鱼 **
** 桂花鱼 **
** 白鲈鱼 **

m*d2010-09-02 07:09

4 楼

【以下文字转载自 Joke 讨论区】
发信人: authenticsam (愛的刻骨唱的淒美西海情歌刀郎无敌!), 信区: Joke
标题: 鬼子轮奸意外打通任督二脉抗日女网上爆红！！ (转载)
发信站: BBS 未名空间站 (Wed Mar 13 16:40:13 2013, 美东)
发信人: authenticsam (愛的刻骨唱的淒美西海情歌刀郎无敌!), 信区: Military
标题: 鬼子轮奸意外打通任督二脉抗日女网上爆红！！
发信站: BBS 未名空间站 (Wed Mar 13 16:39:19 2013, 美东)
抗日剧再现雷人情节，一部名为《箭在弦上》的抗日剧中，一名抗日女遭鬼子轮奸后突
然小宇宙爆发！连发数箭射死一众日本兵和汉奸，被轮奸后裤子还自动穿上了。饰演抗
日女的女演员正是当年《老房有喜》里精灵可爱的“小海燕”的演员潘之琳，视频被网
友疯转后潘之琳也引来关注。
http://www.youtube.com/watch?feature=player_embedded&v=U2TDwPpy
该段视频中，抗日女一开始遭到日本兵的围攻，寡不敌众惨遭轮奸，三个日本兵轮
奸过后，抗日女在痛苦中突然挣扎着抓起了地上的弓和箭，翻身而起，裤子自动穿上，
抽出弓，搭上箭，每一发都有三枝箭，箭无虚发，一众日本兵和汉奸纷纷被射倒。
这段视频在网络上疯传，围观网友不禁调侃称，“难道打通了任督二脉？”，更有
网友点评道，“会飞，会射，一口气能干掉二三十个大男人，怎么可能被轮奸？带着一
串串疑问，我揣测导演是这样想的：抗日、暴力、床戏这些元素结合必火啊！”
有网友发现，饰演抗日女的女演员正是当年《老房有喜》里精灵可爱的“小海燕”
的演员潘之琳，现就读于北京电影学院表演系，近年还参与拍摄了《一不小心爱上你
》《箭在弦上》《娘要嫁人》《失恋33天》等多部电视剧及电影《金太狼的幸福生活》
。此番突如其来的走红也让网友调侃道，“那个扮演以高潮杀人的扛日女英雄的演员，
这算是爆红吗？”

m*i2010-09-02 07:09

5 楼

最近做了两次ELISA，结果都不好，快要崩溃了，blank wells全都有读数，不知道是哪
步出问题了？

i*r2010-09-02 07:09

6 楼

你做的research和我的理解基本一致，个人觉得可以，但是必须注意你回来的时间
因为你的sevis会在10月1日自动转成h1b
另外我觉得1的情况，就算F1 visa过期,理论上还是可以申请f1 visa的，只是觉得风险
很大

i*e2010-09-02 07:09

7 楼

u can try CMU.. not that bad

R*G2010-09-02 07:09

8 楼

都是好吃的鱼。砖家说说鲥鱼用什么饵，周末我也要甩杆去勒。

m*d2010-09-02 07:09

9 楼

这个《箭在弦上》怎么样？最近的电视剧我都看了几集就看不动了

Military

【在 m*****d 的大作中提到】

: 【以下文字转载自 Joke 讨论区】
: 发信人: authenticsam (愛的刻骨唱的淒美西海情歌刀郎无敌!), 信区: Joke
: 标题: 鬼子轮奸意外打通任督二脉抗日女网上爆红！！ (转载)
: 发信站: BBS 未名空间站 (Wed Mar 13 16:40:13 2013, 美东)
: 发信人: authenticsam (愛的刻骨唱的淒美西海情歌刀郎无敌!), 信区: Military
: 标题: 鬼子轮奸意外打通任督二脉抗日女网上爆红！！
: 发信站: BBS 未名空间站 (Wed Mar 13 16:39:19 2013, 美东)
: 抗日剧再现雷人情节，一部名为《箭在弦上》的抗日剧中，一名抗日女遭鬼子轮奸后突
: 然小宇宙爆发！连发数箭射死一众日本兵和汉奸，被轮奸后裤子还自动穿上了。饰演抗
: 日女的女演员正是当年《老房有喜》里精灵可爱的“小海燕”的演员潘之琳，视频被网

w*e2010-09-02 07:09

10 楼

common mistake is leaking of reagent to adjacent wells. did you read the
whole plate? any signal in blank wells far away from any sample wells?

【在 m******i 的大作中提到】

: 最近做了两次ELISA，结果都不好，快要崩溃了，blank wells全都有读数，不知道是哪
: 步出问题了？

S*s2010-09-02 07:09

11 楼

对，就是10月1日前回美国的话，对能否以之前未过期的F1 visa回来这一点不是很sure。
对于1的情况，我同意你的看法。在h1b已经approved的情况下，再申请F1 visa（F1-
OPT未过期）是风险相当大，很大可能会造成身份状态混乱。

【在 i***r 的大作中提到】

: 你做的research和我的理解基本一致，个人觉得可以，但是必须注意你回来的时间
: 因为你的sevis会在10月1日自动转成h1b
: 另外我觉得1的情况，就算F1 visa过期,理论上还是可以申请f1 visa的，只是觉得风险
: 很大

p*t2010-09-02 07:09

12 楼

"1.我的专业就业较窄,以后老公如果去更好的学校要换地方, MBA可以拓宽我的就业范
围"
念part time MBA基本上对转行/拓宽就业范围毫无帮助。

g*o2010-09-02 07:09

13 楼

那字读啥？时？英文怎么说的？

【在 l*t 的大作中提到】

: 作案时间: 周四下午至傍晚
: 作案方位: 屯子东北120公里
: 作案天气: 毒阳高照，又闷又热
: 作案方式: 循循善诱，甜言蜜语
: 作案成果: 看下面
: ** 米国鲥鱼 **
: ** 桂花鱼 **
: ** 白鲈鱼 **

m*x2010-09-02 07:09

14 楼

你们射了我，我也要射你们！

f*r2010-09-02 07:09

15 楼

才两次不好，用不着崩溃。
首先要明确，你用的kit是什么样的。白蛋白的ELISA kit有很多。有的是传统三明治，
有的是竞争式。如果你用的是竞争式，那么颜色最深的便是0点或者blank。
其次，（对于常规三明治elisa）blank点永远有读数，除非你用透光特别好的水晶盘。
如果它是0，那是因为你定义它为0。
然后，我不太清楚你说的不好指什么。如果说是标准曲线回归的不好，那么我建议你看
看我写的这篇介绍：
http://www.mitbbs.com/article/Biology/31389691_3.html
如果你能把情况说得更具体一点，最好能贴个图，那就更容易分析问题出在哪里。

c*22010-09-02 07:09

16 楼

if you have valid F1 visa and valid EAD, plus you have proof of employment (
such as pay stubs to prove you were EMPLOYED at the time you left USA), you
should be fine.

s*e2010-09-02 07:09

17 楼

agree. just forget about it, and enjoy your life.

【在 p*****t 的大作中提到】

: "1.我的专业就业较窄,以后老公如果去更好的学校要换地方, MBA可以拓宽我的就业范
: 围"
: 念part time MBA基本上对转行/拓宽就业范围毫无帮助。

c*p2010-09-02 07:09

18 楼

罪过，罪过！
最喜欢鲈鱼，然后桂花鱼。。。

r*y2010-09-02 07:09

19 楼

这种脑残剧怎么通过审查的？广电部静胡搞不该封的封该仔细查的不管这个跟抗日
情绪无关

Military

【在 m*****d 的大作中提到】

: 【以下文字转载自 Joke 讨论区】
: 发信人: authenticsam (愛的刻骨唱的淒美西海情歌刀郎无敌!), 信区: Joke
: 标题: 鬼子轮奸意外打通任督二脉抗日女网上爆红！！ (转载)
: 发信站: BBS 未名空间站 (Wed Mar 13 16:40:13 2013, 美东)
: 发信人: authenticsam (愛的刻骨唱的淒美西海情歌刀郎无敌!), 信区: Military
: 标题: 鬼子轮奸意外打通任督二脉抗日女网上爆红！！
: 发信站: BBS 未名空间站 (Wed Mar 13 16:39:19 2013, 美东)
: 抗日剧再现雷人情节，一部名为《箭在弦上》的抗日剧中，一名抗日女遭鬼子轮奸后突
: 然小宇宙爆发！连发数箭射死一众日本兵和汉奸，被轮奸后裤子还自动穿上了。饰演抗
: 日女的女演员正是当年《老房有喜》里精灵可爱的“小海燕”的演员潘之琳，视频被网

m*i2010-09-02 07:09

20 楼

谢谢，看了一下数据，一个plate有两列blank，一列跟旁边的很接近，另一列是empty
well，但是数据也很接近。另外所有的blank值都很接近。所以不知道是不是washing
solution有问题。

【在 w******e 的大作中提到】

: common mistake is leaking of reagent to adjacent wells. did you read the
: whole plate? any signal in blank wells far away from any sample wells?

i*r2010-09-02 07:09

21 楼

但是不管怎麼說，10月1日前你的status都是F1, 所以用f1 visa回來幷無不妥，而且不
屬於cap gap。
你opt狀態下最好拿上像h1b petition package, pay stubs and employment
verification 應該沒有問題
同時早點回來，比如說9月1日前，避開change of status的日子以免意外。
我只能想到那麼多了，這個時間點硬要回去也是沒辦法的事情

sure。

【在 S*********s 的大作中提到】

: 对，就是10月1日前回美国的话，对能否以之前未过期的F1 visa回来这一点不是很sure。
: 对于1的情况，我同意你的看法。在h1b已经approved的情况下，再申请F1 visa（F1-
: OPT未过期）是风险相当大，很大可能会造成身份状态混乱。

p*a2010-09-02 07:09

22 楼

生活的目标 is not working and working again. Relaxing and enjoying your life
is most perople's 生活的目标. You have two young kids to take care of.
Unless you like to work very hard and overtime, just enjoy your life with
your two kids.

【在 m****w 的大作中提到】

: 年龄:
: 三十出头
: 家庭:
: 俩孩子一岁和三岁,老公在tenure track,没老人帮忙
: 背景:
: 博士毕业五年,还在搞技术,以前在业内最大的公司工作,去年初随老公来到这个中
: 西部小城市,在一个中等大小公司(10,000人不到).
: 在现在这个公司工作轻松,从不需要加班.但个人感觉工作缺乏挑战性,非常苦闷.公
: 司小的好处是能见度较高,公司Ph.D.很少,CTO对我印象也不错,慢慢混年头过两年做个
: 中层管理应该问题不大.

c*w2010-09-02 07:09

23 楼

这么多鱼，吃不完的做肥料？

d*02010-09-02 07:09

24 楼

这可是华妃娘娘啊！

m*i2010-09-02 07:09

25 楼

谢谢，受益匪浅。
数据不好是因为值不是随着浓度降低递减的，偶尔有的值升高

【在 f*********r 的大作中提到】

: 才两次不好，用不着崩溃。
: 首先要明确，你用的kit是什么样的。白蛋白的ELISA kit有很多。有的是传统三明治，
: 有的是竞争式。如果你用的是竞争式，那么颜色最深的便是0点或者blank。
: 其次，（对于常规三明治elisa）blank点永远有读数，除非你用透光特别好的水晶盘。
: 如果它是0，那是因为你定义它为0。
: 然后，我不太清楚你说的不好指什么。如果说是标准曲线回归的不好，那么我建议你看
: 看我写的这篇介绍：
: http://www.mitbbs.com/article/Biology/31389691_3.html
: 如果你能把情况说得更具体一点，最好能贴个图，那就更容易分析问题出在哪里。

J*a2010-09-02 07:09

26 楼

我咨询过律师，她强烈不建议。因为会造成I94混乱。真需要走，就拿着h1b签证9月20
日后回来

★ 发自iPhone App: ChineseWeb 7.8

【在 S*********s 的大作中提到】

: H1b已经拿到approved的receipt，在10月1日生效前回国的话（自然是以F1(OPT)身份回
: 国），下列几种情况（我属于2.2情况）
: 1）之前的F1回美visa过期的话，因为不能去领事馆签F1 visa，会影响
: 已经申请的H1b，只能去领事馆申请H1b visa，且只能在9月20日才能入境。
: 2）之前的F1回美visa在回美国之前未过期，那么
: 2.1）如果回国期间是opt cap-gap，也就是回美的时候opt已经过期，那么必须去领事
: 馆申请H1b visa，且只能在9月20日后才能入境；
: 2.2）回美时候原始OPT未过期，那么问题是：是否可以直接以未过期的F1 visa来回美
: 国？
: 我的opt是明年初才过期，且有明年初才过期的F1 VISA （今年初刚回国拿到的），请

g*e2010-09-02 07:09

27 楼

严重怀疑砖头用了渔网作案。

【在 l*t 的大作中提到】

: 作案时间: 周四下午至傍晚
: 作案方位: 屯子东北120公里
: 作案天气: 毒阳高照，又闷又热
: 作案方式: 循循善诱，甜言蜜语
: 作案成果: 看下面
: ** 米国鲥鱼 **
: ** 桂花鱼 **
: ** 白鲈鱼 **

L*e2010-09-02 07:09

28 楼

不是吧？

【在 d*****0 的大作中提到】

: 这可是华妃娘娘啊！

f*r2010-09-02 07:09

29 楼

说说要做好一个elisa，应该注意哪些小地方。
1，先检查硬件。读盘的分光光度计，盘子等等要说得过去。至少光路当中没有脏东西
。这个肉眼看看就行。或者每个well里加等量的水、pbs或者kit提供的稀释溶剂等去读
一读。它们相差不大，而且都小于标准曲线中最小的一个点的值就可以。
elisa过程中，要冲洗几次。如果有多余的洗液残留在盘底，甚至干了以后有了印，可
能会有稍许影响。擦干净就好。
2，冲洗。说明书说洗几遍就几遍？别那么实诚。至少5遍。每次都用well能盛的最大量
（大约400微升）。每次洗，都把前一次残留的甩干净。用手甩就行。或者在桌上垫纸
巾，扣着使劲拍。放心，特异性结合了的抗原、抗体是洗不掉的。多洗只有好处没坏处
。反正kit里洗液这一瓶永远有富余。
如果忙，不能每次都洗彻底，没关系。最后一步冲洗（加显色剂之前的这次）洗狠一点
就可以（仅限于三明治elisa）。
3，混匀。试剂、样品、标准液等等，用之前一定混匀。有混浊的，争取把它溶化掉，
溶不掉的把它离心掉。费不了几分钟。
4，加样。这个已经在那个链接的文章里介绍过了。如果用排枪或者加样机，原则是一
样的。别忘了检查每个通

n*02010-09-02 07:09

30 楼

那如果是以CPT （F1在校）同H1b approved，在10月1日生效前回国的话，会有问题么
？

P*o2010-09-02 07:09

31 楼

太牛了
有剩下的边角料,给我打电话
哈哈^_^

【在 l*t 的大作中提到】

: 作案时间: 周四下午至傍晚
: 作案方位: 屯子东北120公里
: 作案天气: 毒阳高照，又闷又热
: 作案方式: 循循善诱，甜言蜜语
: 作案成果: 看下面
: ** 米国鲥鱼 **
: ** 桂花鱼 **
: ** 白鲈鱼 **

f*l2010-09-02 07:09

32 楼

化肥是江心扮演的。

【在 d*****0 的大作中提到】

: 这可是华妃娘娘啊！

w*e2010-09-02 07:09

33 楼

赞详细技术贴。相比之下我实在太偷懒了。。。
quick question：用手甩怎么玩？甩到sink里？你有没有遇到过cross contamination的
问题？我老担心antibody跑到隔壁well里

【在 f*********r 的大作中提到】

: 说说要做好一个elisa，应该注意哪些小地方。
: 1，先检查硬件。读盘的分光光度计，盘子等等要说得过去。至少光路当中没有脏东西
: 。这个肉眼看看就行。或者每个well里加等量的水、pbs或者kit提供的稀释溶剂等去读
: 一读。它们相差不大，而且都小于标准曲线中最小的一个点的值就可以。
: elisa过程中，要冲洗几次。如果有多余的洗液残留在盘底，甚至干了以后有了印，可
: 能会有稍许影响。擦干净就好。
: 2，冲洗。说明书说洗几遍就几遍？别那么实诚。至少5遍。每次都用well能盛的最大量
: （大约400微升）。每次洗，都把前一次残留的甩干净。用手甩就行。或者在桌上垫纸
: 巾，扣着使劲拍。放心，特异性结合了的抗原、抗体是洗不掉的。多洗只有好处没坏处
: 。反正kit里洗液这一瓶永远有富余。

s*a2010-09-02 07:09

34 楼

如果说我在9月20日之前h1b approve了，我能9月20日以后回国，十月份以H1身份回美
国吗？想着10月1回国结婚来着~~

c*p2010-09-02 07:09

35 楼

难道不是电的？？？

【在 g***e 的大作中提到】

: 严重怀疑砖头用了渔网作案。

b*e2010-09-02 07:09

36 楼

终于看到了原始视频
是够狗血的！

Military

【在 m*****d 的大作中提到】

: 【以下文字转载自 Joke 讨论区】
: 发信人: authenticsam (愛的刻骨唱的淒美西海情歌刀郎无敌!), 信区: Joke
: 标题: 鬼子轮奸意外打通任督二脉抗日女网上爆红！！ (转载)
: 发信站: BBS 未名空间站 (Wed Mar 13 16:40:13 2013, 美东)
: 发信人: authenticsam (愛的刻骨唱的淒美西海情歌刀郎无敌!), 信区: Military
: 标题: 鬼子轮奸意外打通任督二脉抗日女网上爆红！！
: 发信站: BBS 未名空间站 (Wed Mar 13 16:39:19 2013, 美东)
: 抗日剧再现雷人情节，一部名为《箭在弦上》的抗日剧中，一名抗日女遭鬼子轮奸后突
: 然小宇宙爆发！连发数箭射死一众日本兵和汉奸，被轮奸后裤子还自动穿上了。饰演抗
: 日女的女演员正是当年《老房有喜》里精灵可爱的“小海燕”的演员潘之琳，视频被网

f*r2010-09-02 07:09

37 楼

对于常规elisa，2小时+2小时+半小时孵育，偷懒也就是五六个小时里减去十几分钟。
并不能整体缩短时间。
就是那么甩。就象擤鼻涕沾手上了那么甩（有点恶心）。但要注意，elisa的well都是
一条一条，活动的。握不紧的话，会甩掉。所以有的先人事前都标记好了。
不用担心污染问题。污染只会出现在加样时。加样完毕，就不会再污染了。第一次孵育
，理论上，所有的抗原就完全吸附在coated ab上（除非你的样品没有正确稀释，里面
抗原过量了）。这个时候，well里已经没有游离抗原了，你就是把各个well里的液体随
便混合也不会影响结果。
detecting ab根本不存在污染的问题。因为kit提供的抗体都是过量的。各个well里所
有抗原结合位点都被抗体占据了。就算加额外的抗体，也没有办法再与抗体结合。污染
的抗体，是游离的。一洗就全洗掉了。
以上只适合三明治elisa。

contamination的

【在 w******e 的大作中提到】

: 赞详细技术贴。相比之下我实在太偷懒了。。。
: quick question：用手甩怎么玩？甩到sink里？你有没有遇到过cross contamination的
: 问题？我老担心antibody跑到隔壁well里

l*d2010-09-02 07:09

38 楼

难道不是合伙作案？

i*t2010-09-02 07:09

39 楼

应该是没强奸上吧
应该是实施中女主角小宇宙爆发

m*i2010-09-02 07:09

40 楼

好贴，顶
我有个问题：
冲洗这一步，如果用aspirate 液体，是不是要注意不能碰到底部？

【在 f*********r 的大作中提到】

: 说说要做好一个elisa，应该注意哪些小地方。
: 1，先检查硬件。读盘的分光光度计，盘子等等要说得过去。至少光路当中没有脏东西
: 。这个肉眼看看就行。或者每个well里加等量的水、pbs或者kit提供的稀释溶剂等去读
: 一读。它们相差不大，而且都小于标准曲线中最小的一个点的值就可以。
: elisa过程中，要冲洗几次。如果有多余的洗液残留在盘底，甚至干了以后有了印，可
: 能会有稍许影响。擦干净就好。
: 2，冲洗。说明书说洗几遍就几遍？别那么实诚。至少5遍。每次都用well能盛的最大量
: （大约400微升）。每次洗，都把前一次残留的甩干净。用手甩就行。或者在桌上垫纸
: 巾，扣着使劲拍。放心，特异性结合了的抗原、抗体是洗不掉的。多洗只有好处没坏处
: 。反正kit里洗液这一瓶永远有富余。

c*p2010-09-02 07:09

41 楼

难道不是合伙电的？？

f*g2010-09-02 07:09

42 楼

都不知道轮了几个了，最后被一箭插死的早不是刚开始的小头目了

【在 i******t 的大作中提到】

: 应该是没强奸上吧
: 应该是实施中女主角小宇宙爆发

f*r2010-09-02 07:09

43 楼

碰，接触，没问题。不要划来划去。

【在 m******i 的大作中提到】

: 好贴，顶
: 我有个问题：
: 冲洗这一步，如果用aspirate 液体，是不是要注意不能碰到底部？

l*t2010-09-02 07:09

44 楼

Both lure and bait work.
bait: minnow, shad
lure: small jighead + grub
They like clean water with strong flow.

【在 R****G 的大作中提到】

: 都是好吃的鱼。砖家说说鲥鱼用什么饵，周末我也要甩杆去勒。

L*e2010-09-02 07:09

45 楼

嗯，而且在地上抬腿准备跃起是还露着两条白森森地大腿，飞跃到半空的时候裤子就穿
上了。。。

【在 f****g 的大作中提到】

: 都不知道轮了几个了，最后被一箭插死的早不是刚开始的小头目了

o*e2010-09-02 07:09

46 楼

哪家的“盘”好些？Eppendorf的？
（或者哪里买plate都差不多？）

【在 f*********r 的大作中提到】

: 碰，接触，没问题。不要划来划去。

l*t2010-09-02 07:09

47 楼

与时同音吧
shad的一种，好像叫herring

【在 g*********o 的大作中提到】

: 那字读啥？时？英文怎么说的？

M*p2010-09-02 07:09

48 楼

这个是化肥凉凉在剧中的"妹妹",化肥是这个剧的猪脚,剧里面只有她轮别人的命.
这个剧就是看着一乐,武打设计还可以,男女主角也挺有名,编剧是人称鬼才的九年,比较
喜欢编魔幻片,比如《宝莲灯》、《宝莲灯前传》、《魔幻手机》, 据说都拿下了当年
的收视冠军. 这次是特意编了一部以冷兵器对抗热兵器的"魔幻抗日片",有点凑最近的
钓鱼岛之争. 看着乐乐就好了.

【在 d*****0 的大作中提到】

: 这可是华妃娘娘啊！

b*d2010-09-02 07:09

49 楼

holy cow! my mom caught a huge turtle last night and released..... no any
fish...55555555555555555555555555555

v*a2010-09-02 07:09

50 楼

这种狗屎导演就该送新疆种树去

Military

【在 m*****d 的大作中提到】

: 【以下文字转载自 Joke 讨论区】
: 发信人: authenticsam (愛的刻骨唱的淒美西海情歌刀郎无敌!), 信区: Joke
: 标题: 鬼子轮奸意外打通任督二脉抗日女网上爆红！！ (转载)
: 发信站: BBS 未名空间站 (Wed Mar 13 16:40:13 2013, 美东)
: 发信人: authenticsam (愛的刻骨唱的淒美西海情歌刀郎无敌!), 信区: Military
: 标题: 鬼子轮奸意外打通任督二脉抗日女网上爆红！！
: 发信站: BBS 未名空间站 (Wed Mar 13 16:39:19 2013, 美东)
: 抗日剧再现雷人情节，一部名为《箭在弦上》的抗日剧中，一名抗日女遭鬼子轮奸后突
: 然小宇宙爆发！连发数箭射死一众日本兵和汉奸，被轮奸后裤子还自动穿上了。饰演抗
: 日女的女演员正是当年《老房有喜》里精灵可爱的“小海燕”的演员潘之琳，视频被网

l*t2010-09-02 07:09

51 楼

那是犯法的，瞎猫不敢啊，否则要被关进小黑屋滴

【在 g***e 的大作中提到】

: 严重怀疑砖头用了渔网作案。

v*a2010-09-02 07:09

52 楼

这就是我说的广点，中选部吃屎的，该灌的不管，不该管的瞎管
上面好像还有人暗示我要搞一言堂，切，幼稚

【在 r******y 的大作中提到】

: 这种脑残剧怎么通过审查的？广电部静胡搞不该封的封该仔细查的不管这个跟抗日
: 情绪无关
:
: Military

f*g2010-09-02 07:09

53 楼

老天爷。。。
千万给我留几条桂花儿鱼啊，
或者到时候给我钓新鲜的啦。。。
这里的鲈鱼好吃不？

【在 l*t 的大作中提到】

: 作案时间: 周四下午至傍晚
: 作案方位: 屯子东北120公里
: 作案天气: 毒阳高照，又闷又热
: 作案方式: 循循善诱，甜言蜜语
: 作案成果: 看下面
: ** 米国鲥鱼 **
: ** 桂花鱼 **
: ** 白鲈鱼 **

z*22010-09-02 07:09

54 楼

照片看上去好漂亮啊！！

l*t2010-09-02 07:09

55 楼

竟然木有想象到还可以炸鱼...不是在油锅里炸哈

【在 c***p 的大作中提到】

: 难道不是合伙电的？？

n*t2010-09-02 07:09

56 楼

太雷了，我这种赚钱第一的酱油派也看不下去了。

g*o2010-09-02 07:09

57 楼

鲈鱼好吃!!!!

【在 f******g 的大作中提到】

: 老天爷。。。
: 千万给我留几条桂花儿鱼啊，
: 或者到时候给我钓新鲜的啦。。。
: 这里的鲈鱼好吃不？

m*d2010-09-02 07:09

58 楼

喜剧片嘛

Military

【在 m*****d 的大作中提到】

: 【以下文字转载自 Joke 讨论区】
: 发信人: authenticsam (愛的刻骨唱的淒美西海情歌刀郎无敌!), 信区: Joke
: 标题: 鬼子轮奸意外打通任督二脉抗日女网上爆红！！ (转载)
: 发信站: BBS 未名空间站 (Wed Mar 13 16:40:13 2013, 美东)
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: 标题: 鬼子轮奸意外打通任督二脉抗日女网上爆红！！
: 发信站: BBS 未名空间站 (Wed Mar 13 16:39:19 2013, 美东)
: 抗日剧再现雷人情节，一部名为《箭在弦上》的抗日剧中，一名抗日女遭鬼子轮奸后突
: 然小宇宙爆发！连发数箭射死一众日本兵和汉奸，被轮奸后裤子还自动穿上了。饰演抗
: 日女的女演员正是当年《老房有喜》里精灵可爱的“小海燕”的演员潘之琳，视频被网

f*g2010-09-02 07:09

59 楼

清蒸，我要清蒸。

【在 g*********o 的大作中提到】

: 鲈鱼好吃!!!!

G*82010-09-02 07:09

60 楼

无脑真恶心

g*e2010-09-02 07:09

61 楼

都好吃！

i*42010-09-02 07:09

62 楼

这个也太搞了吧

a*a2010-09-02 07:09

63 楼

太厉害了！

m*g2010-09-02 07:09

64 楼

好像是一帮伪军。

l*t2010-09-02 07:09

65 楼

你可不可以把行程提前啊?
越往后天越热，活鱼就不好抓了。清蒸只能吃新鲜的

【在 f******g 的大作中提到】

: 清蒸，我要清蒸。

o*y2010-09-02 07:09

66 楼

这种片子真是无脑才搞得出来

g*e2010-09-02 07:09

67 楼

哦，帅哥真的要来屯子？

【在 l*t 的大作中提到】

: 你可不可以把行程提前啊?
: 越往后天越热，活鱼就不好抓了。清蒸只能吃新鲜的

b*k2010-09-02 07:09

68 楼

lol.太搞了。

l*t2010-09-02 07:09

69 楼

俺跟他说了请他吃鱼，他就铁了心要下来考察屯子了，哈哈

【在 g*****e 的大作中提到】

: 哦，帅哥真的要来屯子？

i*y2010-09-02 07:09

70 楼

这个片子的主演是华妃娘娘蒋欣，编剧可能是参考了三言二拍，里面说一个大户人家的
小姐由于痴情死去，下葬以后，被一个盗墓贼打开了棺材。由于长得漂亮，盗墓贼奸
尸，大小姐由于得到了阳气的滋润，竟然又活了过来。一个女侠练功遭遇瓶颈，得到众
多男人阳气滋润，可能武功据精进了。

Military

【在 m*****d 的大作中提到】

: 这个《箭在弦上》怎么样？最近的电视剧我都看了几集就看不动了
:
: Military

f*g2010-09-02 07:09

71 楼

早就定了，咋能说改就改？
又不是开车仨钟头，这是要飞仨钟头勒

【在 l*t 的大作中提到】

: 你可不可以把行程提前啊?
: 越往后天越热，活鱼就不好抓了。清蒸只能吃新鲜的

f*g2010-09-02 07:09

72 楼

一个字:靠。

【在 i*****y 的大作中提到】

: 这个片子的主演是华妃娘娘蒋欣，编剧可能是参考了三言二拍，里面说一个大户人家的
: 小姐由于痴情死去，下葬以后，被一个盗墓贼打开了棺材。由于长得漂亮，盗墓贼奸
: 尸，大小姐由于得到了阳气的滋润，竟然又活了过来。一个女侠练功遭遇瓶颈，得到众
: 多男人阳气滋润，可能武功据精进了。
:
: Military

g*e2010-09-02 07:09

73 楼

哈哈，属猫的。

【在 l*t 的大作中提到】

: 俺跟他说了请他吃鱼，他就铁了心要下来考察屯子了，哈哈

M*p2010-09-02 07:09

74 楼

编的太损了。
这个剧估计化肥凉凉在《甄嬛传》里面被甄嬛搞惨了，想到这里面来虐虐日本人。你
如果看上下文，她的这个被轮的妹妹其实一直被化肥骂，就是因为不敢杀人。结果编剧
给搞了这么一出，来个“硬性转折”，把观众也给转晕了。好像编剧的意思是没有轮上
就小宇宙爆发了，结果演过了。
现在抗日剧也不好拍，拍老套了说重覆了，拍新了又被网友吐槽。

【在 i*****y 的大作中提到】

: 这个片子的主演是华妃娘娘蒋欣，编剧可能是参考了三言二拍，里面说一个大户人家的
: 小姐由于痴情死去，下葬以后，被一个盗墓贼打开了棺材。由于长得漂亮，盗墓贼奸
: 尸，大小姐由于得到了阳气的滋润，竟然又活了过来。一个女侠练功遭遇瓶颈，得到众
: 多男人阳气滋润，可能武功据精进了。
:
: Military

j*y2010-09-02 07:09

75 楼

钓得太爽了•••••

f*l2010-09-02 07:09

76 楼

这是老房有喜里的小海燕啊

【在 d*****0 的大作中提到】

: 这可是华妃娘娘啊！

x*82010-09-02 07:09

77 楼

太让人羡慕嫉妒恨了！！！
想不到砖头童靴家全面发展，荤素都可以自给自足。

s*02010-09-02 07:09

78 楼

你开车两钟头到我这里来吧，保证你吃鱼吃好。

【在 f******g 的大作中提到】

: 早就定了，咋能说改就改？
: 又不是开车仨钟头，这是要飞仨钟头勒

s*02010-09-02 07:09

79 楼

米国鲥鱼，我的梦想啊！
锅盖皮皮，也超赞！

【在 l*t 的大作中提到】

: 作案时间: 周四下午至傍晚
: 作案方位: 屯子东北120公里
: 作案天气: 毒阳高照，又闷又热
: 作案方式: 循循善诱，甜言蜜语
: 作案成果: 看下面
: ** 米国鲥鱼 **
: ** 桂花鱼 **
: ** 白鲈鱼 **

m*r2010-09-02 07:09

80 楼

太牛啦！
美洲鲥鱼不知道肥不肥？
国内的鲥鱼自古就是...好东西，差点说溜成贡品。这东西时效性太强，荔枝都跟它比
不得。清蒸之后，鱼肉幼嫩爽滑自不必说，单是大片的鱼鳞也可以一片一片慢慢品。
这才是曾经的舌尖上的中国，李鸿章天天吃的桂鱼都不算啥了。

a*a2010-09-02 07:09

81 楼

瓦赛，这么鲜美？连鱼鳞都能得到如此高的赞誉啊！！！

【在 m******r 的大作中提到】

: 太牛啦！
: 美洲鲥鱼不知道肥不肥？
: 国内的鲥鱼自古就是...好东西，差点说溜成贡品。这东西时效性太强，荔枝都跟它比
: 不得。清蒸之后，鱼肉幼嫩爽滑自不必说，单是大片的鱼鳞也可以一片一片慢慢品。
: 这才是曾经的舌尖上的中国，李鸿章天天吃的桂鱼都不算啥了。

s*32010-09-02 07:09

82 楼

这瞎猫也忒厉害鸟
小时候还吃过鲥鱼，现在据说都天价了

x*u2010-09-02 07:09

83 楼

鲥鱼拿啥叼滴，等偶时差搞好，也去色诱下鲥鱼妹妹。能给个地点木？

t*g2010-09-02 07:09

84 楼

楼主厉害！不但钓这么多鱼，连鱼的名字的知道。这三种鱼我看着都一样呢，同样的颜
色，体形，眼睛和鳞。
我们每次去钓只掉到几只巴掌大的据说叫“SUN FISH",只能放回去。每次买一盒蚯蚓剩
下一半多，全埋在菜地里了，很快我们的菜地就变成蚯蚓养殖中心了。

l*t2010-09-02 07:09

85 楼

你得装成一帅哥才能诱惑鲥鱼妹妹的...lol

【在 x**********u 的大作中提到】

: 鲥鱼拿啥叼滴，等偶时差搞好，也去色诱下鲥鱼妹妹。能给个地点木？

l*t2010-09-02 07:09

86 楼

你估计不常去钓鱼，这些都是很常见的淡水鱼。
其实sun-fish也是很好吃的，它的肉质鲜美没有小刺。经常钓上的个子较小，清理麻烦
些。如果你能钓上4-5条巴掌大的，那可是美味一盘啊

【在 t**********g 的大作中提到】

: 楼主厉害！不但钓这么多鱼，连鱼的名字的知道。这三种鱼我看着都一样呢，同样的颜
: 色，体形，眼睛和鳞。
: 我们每次去钓只掉到几只巴掌大的据说叫“SUN FISH",只能放回去。每次买一盒蚯蚓剩
: 下一半多，全埋在菜地里了，很快我们的菜地就变成蚯蚓养殖中心了。

x*u2010-09-02 07:09

87 楼

求包养吧，鱼的

D*12010-09-02 07:09

88 楼

还是了无新意。。。对砖头而言。呵呵！

【在 l*t 的大作中提到】

: 作案时间: 周四下午至傍晚
: 作案方位: 屯子东北120公里
: 作案天气: 毒阳高照，又闷又热
: 作案方式: 循循善诱，甜言蜜语
: 作案成果: 看下面
: ** 米国鲥鱼 **
: ** 桂花鱼 **
: ** 白鲈鱼 **

y*82010-09-02 07:09

89 楼

两点疑问：
1）作案人肯定不属12生宵里没有的猫？
2）作案人肿么知道钓的都是鱼MM？

【在 l*t 的大作中提到】

: 作案时间: 周四下午至傍晚
: 作案方位: 屯子东北120公里
: 作案天气: 毒阳高照，又闷又热
: 作案方式: 循循善诱，甜言蜜语
: 作案成果: 看下面
: ** 米国鲥鱼 **
: ** 桂花鱼 **
: ** 白鲈鱼 **

t*g2010-09-02 07:09

90 楼

我是没钓过几次淡水鱼，以前在海边钓过，海鱼好认啊，颜色都不一样。认真地看了一
下你钓的几种鱼，我终于发现，它们的尾巴是不同的。
SUNFISH能吃？钓上来的时候那个腥啊！我觉得可能是水库的水不干净的缘故。

【在 l*t 的大作中提到】

: 你估计不常去钓鱼，这些都是很常见的淡水鱼。
: 其实sun-fish也是很好吃的，它的肉质鲜美没有小刺。经常钓上的个子较小，清理麻烦
: 些。如果你能钓上4-5条巴掌大的，那可是美味一盘啊

i*t2010-09-02 07:09

91 楼

这鱼看着真是太鲜了。。。
最重要的，大小都是合适。
不像鱼版有些秀的真是大的，但说实话不是最沟人食欲的。

g*52010-09-02 07:09

92 楼

不XM, 只JD, 加H.

【在 l*t 的大作中提到】

: 作案时间: 周四下午至傍晚
: 作案方位: 屯子东北120公里
: 作案天气: 毒阳高照，又闷又热
: 作案方式: 循循善诱，甜言蜜语
: 作案成果: 看下面
: ** 米国鲥鱼 **
: ** 桂花鱼 **
: ** 白鲈鱼 **

d*22010-09-02 07:09

93 楼

真是人品好啥都好：）））人美，菜好，花香，鱼多多，，，，羡煞