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Western 样品煮不煮的问题

Western 样品煮不煮的问题# Biology - 生物学

i*l2010-09-23 07:09

1 楼

让给reference，已经给了。两周了，还没有消息。最近自己的状态也小有改变，两篇
发出来了，一篇新接受，还有个会议talk。要不要趁机更新一下自己情况顺便问问是不是on list？
等的着急。给为前辈、大牛们给点建议吧。

c*t2010-09-23 07:09

2 楼

我的OPT明年1月底到期，单位不支持H1，打算转回F2。需要填写I-539就可以了，是吗？
另外一个问题是，我先生现在也是OPT，由于专业性质，他的可以extention。先生在
OPT期间，那么我转F2的困难大吗？会不会被拒？有哪些需要注意的问题？多谢大家。

d*e2010-09-23 07:09

3 楼

删的随意，你们将就点

c*e2010-09-23 07:09

4 楼

【以下文字转载自 Joke 讨论区】
发信人: renaissance (ole), 信区: Joke
标题: 日本活乌贼料理，啧啧
发信站: BBS 未名空间站 (Wed Mar 13 12:42:50 2013, 美东)
刺身的最高极限叫做“活け造り”，直译大概就是“做活着的料理”～这类海鲜料理包
括很多种，不仅常人的胃口难以接受，常人的钱包也难以接受，很贵！来一个日本活乌
贼料理，啧啧，你敢吃咩？

h*o2010-09-23 07:09

5 楼

以前都是跑胶之前，100度5-7分钟，都没有问题
最近好几次都出现样品一煮胶就跑的乱七八糟的现象
同样一个样品，没煮的时候跑了一次胶，然出来，条带清晰，western blot出来也干干
净净
放冰箱里面过了一个over weekend (冰箱没问题），煮了再跑出来，染完胶胶就看上去和
火箭电泳一样，有comet尾巴，转的膜做western出来的都不是条带，而是一个一个的
dot
各位大侠知道是怎么回事吗？我怀疑是盐浓度的问题，可是没有理由煮一下盐浓度就变
了啊

v*x2010-09-23 07:09

6 楼

当然当然呀，给committee chair发email更新，最好不要问自己的状态。

不是on list？

【在 i*********l 的大作中提到】

: 让给reference，已经给了。两周了，还没有消息。最近自己的状态也小有改变，两篇
: 发出来了，一篇新接受，还有个会议talk。要不要趁机更新一下自己情况顺便问问是不是on list？
: 等的着急。给为前辈、大牛们给点建议吧。

d*e2010-09-23 07:09

7 楼

就填i539可以了吧，不觉得有什么原因会被拒。

吗？

【在 c********t 的大作中提到】

: 我的OPT明年1月底到期，单位不支持H1，打算转回F2。需要填写I-539就可以了，是吗？
: 另外一个问题是，我先生现在也是OPT，由于专业性质，他的可以extention。先生在
: OPT期间，那么我转F2的困难大吗？会不会被拒？有哪些需要注意的问题？多谢大家。

a*h2010-09-23 07:09

8 楼

啧啧

j*k2010-09-23 07:09

9 楼

如果煮得够彻底（95度5min或以上，煮久了记得用cap lock），那就没必要放冰箱，
protein不会被degraded，至于posttranslational modifications，test过的种类不多
，至少phosphorylation是不会因为放在room temperature而起变化的。这样就可以避
免freeze&thaw cycles，操作起来也方便。

上去和

【在 h*******o 的大作中提到】

: 以前都是跑胶之前，100度5-7分钟，都没有问题
: 最近好几次都出现样品一煮胶就跑的乱七八糟的现象
: 同样一个样品，没煮的时候跑了一次胶，然出来，条带清晰，western blot出来也干干
: 净净
: 放冰箱里面过了一个over weekend (冰箱没问题），煮了再跑出来，染完胶胶就看上去和
: 火箭电泳一样，有comet尾巴，转的膜做western出来的都不是条带，而是一个一个的
: dot
: 各位大侠知道是怎么回事吗？我怀疑是盐浓度的问题，可是没有理由煮一下盐浓度就变
: 了啊

c*e2010-09-23 07:09

10 楼

w*a2010-09-23 07:09

11 楼

盐浓度？难道你是开着盖子煮的？
如果关紧了煮然后再spin down 浓度应该不会变化的

N*f2010-09-23 07:09

12 楼

Caution: not for the faint of heart!
http://www.youtube.com/watch?v=dxQmOR_QLfQ
http://www.youtube.com/watch?v=wkAqdh_kLbs
http://www.youtube.com/watch?v=67BkPIc2DJ4
http://www.youtube.com/watch?v=0q3uWG489NU
http://www.youtube.com/watch?v=Frf-1tNcdWg
http://www.youtube.com/watch?v=yPtpPQDZ98E

【在 c********e 的大作中提到】

: 【以下文字转载自 Joke 讨论区】
: 发信人: renaissance (ole), 信区: Joke
: 标题: 日本活乌贼料理，啧啧
: 发信站: BBS 未名空间站 (Wed Mar 13 12:42:50 2013, 美东)
: 刺身的最高极限叫做“活け造り”，直译大概就是“做活着的料理”～这类海鲜料理包
: 括很多种，不仅常人的胃口难以接受，常人的钱包也难以接受，很贵！来一个日本活乌
: 贼料理，啧啧，你敢吃咩？