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求助: 怎么溶丙酮沉淀的蛋白?
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求助: 怎么溶丙酮沉淀的蛋白?# Biology - 生物学
f*e
1
我妈说不让我看电脑,那怎么跟lab保持联系?主要是学生啊,毕竟一个多月的时间呢
。或者托其它faculty帮忙管理实验室?
大家月子里怎么做research或者work from home的?
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S*Y
2
一周一下子500多了
说明经济确实好了点
要不怎么可能一下子成几倍了
大家加紧啊.
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a*d
3
新公司提供两个医疗保险的选项,Kaiser Permanente HMO和Aetna EPO,两个的价格都
在两周$45~$48之间,算下来一年至少要$1200。我的情况是单身,经常锻炼,最近几年
都没有看过医生,所以觉得这两个保险都太贵了,但是完全不买医疗保险又觉得风险很
大。
请问大家觉得公司的这两个保险选项是否对我适合?
如果我想自己买其他的保险,有什么high deductible, high copay, low premium的医
疗保险可以推荐吗?非常感谢。
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z*m
4
什么叫做休息?好好休息个周末?好好出去旅游一下?但事实上,往往越休息越感觉累
。为什么呢?也许我们对休息存在误解,这篇文章会帮我们分析究竟该如何休息。
为什么你睡了11个小时仍然觉得疲累?为什么你花了好几万去岛国度假并没有增加生活
的热情?
都说要去KTV,去夜店,去游乐园就能忘掉不快,更带劲地开始新的一天,但是尽兴归
来心里只剩空虚?
睡眠的确是一种有效的休息方式,但它主要对睡眠不足或体力劳动者适用。对体力劳动
者来说,“疲劳”主要是由体内产生大量酸性物质引起,如果十分疲劳,应采取静的休
息方式。
通过睡觉,可以把失去的能量补充回来,把堆积的废物排除出去。如果不是很累,也可
以在床上先躺一躺,闭目静息,让全身肌肉和神经完全放松后,再起来活动活动。
但如果你是坐办公室的,大脑皮层极度兴奋,而身体却处于低兴奋状态,对待这种疲劳
,睡眠能起到的作用不大,(除非你是熬夜加班,连正常睡眠时间都达不到)因为你需
要的不是通过“静止”恢复体能,而是要找个事儿把神经放松下来。这样你可以理解为
什么你周末两天不出门依旧无精打采,而只需下班后游泳半小时就神采奕奕。
既然睡觉不能帮助我们休息大脑,那什么办法才可以?答案是不停止活动,而只是改变
活动的内容。大脑皮质的一百多亿神经细胞,功能都不一样,它们以不同的方式排列组
合成各不相同的联合功能区,这一区域活动,另一区域就休息。
所以,通过改换活动内容,就能使大脑的不同区域得到休息。心理生理学家谢切诺夫做
过一个实验,为了消除右手的疲劳,他采取两种方式——一种是让两只手静止休息,另
一种是在右手静止的同时又让左手适当活动,然后在疲劳测量器上对右手的握力进行测
试。
结果表明,在左手活动的情况下,右手的疲劳消除得更快。这证明变换人的活动内容确
实是积极的休息方式。
我们的疲惫主要来自对现有的一成不变的生活的厌倦。所以最好的休息项目就是那些让
我们重新找到生活和工作热情的活动。如果你干完一件事,能够幸福地感叹“明天又是
新的一天。”那这件事对你来说就是最好的恢复热情,调节情绪的方法。但可惜,我们
缺乏对“休息”的想象力。我们能想出来的休息方法不是痴睡就是傻玩。
也许你可以:
1、用看两小时让你开怀的漫画或小说代替去KTV唱那些一成不变的口水歌。
2、试着放弃在周六晚上去酒吧,10点入睡,然后在7点起床,去没有人的街上走走,或
是看看你从来没有机会看到的早间剧场,你会发现这一天可以和过去的千百个周末都不
相同。
3、不要再去你已经去过无数次的度假村找乐子了。找一条你从没去过的街道,把它走
完。你会发现这个你感到腻味的城市,结果你确并没有完全体会到它的妙处。
4、旅行,而不是换个地方消遣。去一个地方对那个地方本身心存好奇,对自己这趟行
程心存美意,感受自己经验范围以外的人生样貌。而不是坐了5小时飞机,只是换个地
方打麻将,换个地方游泳,换个地方打球……
5、从这个周末起学习一项新的技艺,比如弹电子琴,打鼓……每周末练习1小时以上。
6、去社交。不要以为它总是令人疲惫的。虽然和看书比起来,它稍有点令人紧张,但
也能让你更兴奋,更有认同感。你必须每周有两三天是和工作圈子和亲戚外的人打交道
。它让你在朝九晚五的机械运行中不至失去活泼的天性。女性朋友们尤为需要走出去和
朋友聚会,这些时刻你不再是满脸写着“效率”的中性人,而是一个裙裾飞扬的魅力焦
点。
7、做点困难的事,如果你是精神超级紧张的人。心理学家发现解除神经紧张的方法,
是去处理需要神经紧张才能解决的问题。曾经一位精神即将崩溃的总经理找到一位医师
给出治疗建议,结果他得到的处方是去动物园当驯狮师。一个月以后完全康复。
所以压力特别大的时候你可以为自己再找份工作,但不要是和你职业类似的。比如去孤
儿院做义工,或者去一个复杂的机械工厂从学徒干起,或者做一道超级复杂的数学题。
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j*8
5
在用丙酮沉淀神经突触前蛋白, 然后溶在0.1% Triton 里, 不过发现溶解性很差,
像细沙子一样不溶。 蛋白是用来跑胶做WB的, 但需要测蛋白浓度, 所以不能直接溶
在SAMPLE BUFFER里。 请问有同修能指点一下吗? 多谢了!
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j*w
6
这么乖。。。建议别让别人管理。西方人没有坐月子的习惯,听你说一个月不碰电脑,
会被吓着的。
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h*g
7
什么500多阿

【在 S**Y 的大作中提到】
: 一周一下子500多了
: 说明经济确实好了点
: 要不怎么可能一下子成几倍了
: 大家加紧啊.

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l*u
8
你这两个保险,公司有负担部分premium,算是你的benefit.
你自己去找 估计也不一定能比这个便宜。。。

【在 a*******d 的大作中提到】
: 新公司提供两个医疗保险的选项,Kaiser Permanente HMO和Aetna EPO,两个的价格都
: 在两周$45~$48之间,算下来一年至少要$1200。我的情况是单身,经常锻炼,最近几年
: 都没有看过医生,所以觉得这两个保险都太贵了,但是完全不买医疗保险又觉得风险很
: 大。
: 请问大家觉得公司的这两个保险选项是否对我适合?
: 如果我想自己买其他的保险,有什么high deductible, high copay, low premium的医
: 疗保险可以推荐吗?非常感谢。

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c*a
9
纸上谈兵哦
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j*8
10
come on, guys! give me a hand!
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S*l
11
天天跟学生skype,正好周末生的。一天都没耽误~~

【在 f*******e 的大作中提到】
: 我妈说不让我看电脑,那怎么跟lab保持联系?主要是学生啊,毕竟一个多月的时间呢
: 。或者托其它faculty帮忙管理实验室?
: 大家月子里怎么做research或者work from home的?

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a*l
12
en, I have the same feeling. Companies are starting to spend now.

【在 S**Y 的大作中提到】
: 一周一下子500多了
: 说明经济确实好了点
: 要不怎么可能一下子成几倍了
: 大家加紧啊.

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a*d
13
谢谢,看来只有从了。

【在 l********u 的大作中提到】
: 你这两个保险,公司有负担部分premium,算是你的benefit.
: 你自己去找 估计也不一定能比这个便宜。。。

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N*y
14
好文,写的不错啊。

【在 z**m 的大作中提到】
: 什么叫做休息?好好休息个周末?好好出去旅游一下?但事实上,往往越休息越感觉累
: 。为什么呢?也许我们对休息存在误解,这篇文章会帮我们分析究竟该如何休息。
: 为什么你睡了11个小时仍然觉得疲累?为什么你花了好几万去岛国度假并没有增加生活
: 的热情?
: 都说要去KTV,去夜店,去游乐园就能忘掉不快,更带劲地开始新的一天,但是尽兴归
: 来心里只剩空虚?
: 睡眠的确是一种有效的休息方式,但它主要对睡眠不足或体力劳动者适用。对体力劳动
: 者来说,“疲劳”主要是由体内产生大量酸性物质引起,如果十分疲劳,应采取静的休
: 息方式。
: 通过睡觉,可以把失去的能量补充回来,把堆积的废物排除出去。如果不是很累,也可

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e*s
15
不能在沉淀以前测浓度?
然后沉淀,用SB溶解。

【在 j*******8 的大作中提到】
: 在用丙酮沉淀神经突触前蛋白, 然后溶在0.1% Triton 里, 不过发现溶解性很差,
: 像细沙子一样不溶。 蛋白是用来跑胶做WB的, 但需要测蛋白浓度, 所以不能直接溶
: 在SAMPLE BUFFER里。 请问有同修能指点一下吗? 多谢了!

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v*l
16
我刚想问你生了没有。
你太牛了!!!!

【在 S**********l 的大作中提到】
: 天天跟学生skype,正好周末生的。一天都没耽误~~
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m*8
17
还有多少剩余名额? 是不是只要移民局受到就开始排队等名额?
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b*o
18
公司不提供HSA这个选择吗? 一般单身身体好,最划算的就是存公司提供的HSA(如果
有这个选项)。 HSA就是high deductible, high copay, low premium的医疗保险。
HMO和EPO其实是一回事,EPO只是一个改良版的HMO,不需要主治医生医生推荐。他们的
特点都是受network限制,但是看病几乎不要花钱。 另外,Kaiser HMO只能在Kaiser看
病。所以如果最近的Kaiser离你家还是很远的话,就有些麻烦了。
biweekly 45-48其实不算贵。 你可能是从来没有看过病,所以觉得这个rate贵
。 公司出的部分一般是你出的那部分的10倍以上。所以,自己另买保险是天价,你需
要出“
biweekly 45-48”10倍价格的保费,才可能买到差不多的保险。

【在 a*******d 的大作中提到】
: 新公司提供两个医疗保险的选项,Kaiser Permanente HMO和Aetna EPO,两个的价格都
: 在两周$45~$48之间,算下来一年至少要$1200。我的情况是单身,经常锻炼,最近几年
: 都没有看过医生,所以觉得这两个保险都太贵了,但是完全不买医疗保险又觉得风险很
: 大。
: 请问大家觉得公司的这两个保险选项是否对我适合?
: 如果我想自己买其他的保险,有什么high deductible, high copay, low premium的医
: 疗保险可以推荐吗?非常感谢。

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l*n
19
转移注意力么 对三岁小孩子最有效 :D
别说,写的真有眉有眼的,听起来像是有些科学依据。
请问文章出处?
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j*8
20
沉淀前太稀了。 其实有人用不加秀芬兰的SB溶蛋白, 然后测浓度, 然后再泡脚。 不
过我不喜欢。
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b*d
21
恭喜!

【在 S**********l 的大作中提到】
: 天天跟学生skype,正好周末生的。一天都没耽误~~
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w*y
22
icc开始活跃了
有了offer的同学应该快点决定办H1了

【在 S**Y 的大作中提到】
: 一周一下子500多了
: 说明经济确实好了点
: 要不怎么可能一下子成几倍了
: 大家加紧啊.

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C*d
23
一年1200真的不贵了,随便选一个从了吧。
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j*g
24
Good idea!!
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s*n
25
你可以试试加SDS溶解,但具体的浓度你得参照你的蛋白测定方法所能忍受的SDS浓度范
围。
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f*e
26
这个skype,月子里还得注意形象。。。是不是太麻烦了?看来我得说服我妈让我用电
脑。
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i*m
27
向大牛请教~
我有一offer, 但没身份,特别着急,怎样通过icc拿到h1b?可以这么做吗?

【在 w******y 的大作中提到】
: icc开始活跃了
: 有了offer的同学应该快点决定办H1了

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a*d
28
公司可以存HSA,不过这个每年都要想办法怎么才能把它全用掉才行,所以以前都没有
存 。
谢谢你的建议,只有从了公司的plan

【在 b*****o 的大作中提到】
: 公司不提供HSA这个选择吗? 一般单身身体好,最划算的就是存公司提供的HSA(如果
: 有这个选项)。 HSA就是high deductible, high copay, low premium的医疗保险。
: HMO和EPO其实是一回事,EPO只是一个改良版的HMO,不需要主治医生医生推荐。他们的
: 特点都是受network限制,但是看病几乎不要花钱。 另外,Kaiser HMO只能在Kaiser看
: 病。所以如果最近的Kaiser离你家还是很远的话,就有些麻烦了。
: biweekly 45-48其实不算贵。 你可能是从来没有看过病,所以觉得这个rate贵
: 。 公司出的部分一般是你出的那部分的10倍以上。所以,自己另买保险是天价,你需
: 要出“
: biweekly 45-48”10倍价格的保费,才可能买到差不多的保险。

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m*a
29
Up
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l*s
30
you can stain your gel to get quantification.

【在 j*******8 的大作中提到】
: 在用丙酮沉淀神经突触前蛋白, 然后溶在0.1% Triton 里, 不过发现溶解性很差,
: 像细沙子一样不溶。 蛋白是用来跑胶做WB的, 但需要测蛋白浓度, 所以不能直接溶
: 在SAMPLE BUFFER里。 请问有同修能指点一下吗? 多谢了!

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f*e
31
mm好厉害啊,你一点都没有休息吗?你每天工作多久?
我记得你好几个娃呢,都怎么handle的啊。我光想着带newborn就觉得没法做research/
work,你怎么handle的?娃们一哭一闹我就没法集中精力工作。
一定分享一下经验!我这几天都要焦虑症了,恨不得能在去医院之前把所有的事情做掉。

【在 S**********l 的大作中提到】
: 天天跟学生skype,正好周末生的。一天都没耽误~~
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T*y
32
MM已经拿到offer了,恭喜恭喜啊,BlessMM能尽快搞定H1B。

【在 i********m 的大作中提到】
: 向大牛请教~
: 我有一offer, 但没身份,特别着急,怎样通过icc拿到h1b?可以这么做吗?

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a*d
33
en,决定从了

【在 C*******d 的大作中提到】
: 一年1200真的不贵了,随便选一个从了吧。
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l*s
34
you can stain your gel to get quantification.

【在 j*******8 的大作中提到】
: 在用丙酮沉淀神经突触前蛋白, 然后溶在0.1% Triton 里, 不过发现溶解性很差,
: 像细沙子一样不溶。 蛋白是用来跑胶做WB的, 但需要测蛋白浓度, 所以不能直接溶
: 在SAMPLE BUFFER里。 请问有同修能指点一下吗? 多谢了!

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f*e
35
哈哈,你第一个目标跟我一样。同加油!

【在 v***l 的大作中提到】
: 我刚想问你生了没有。
: 你太牛了!!!!

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c*e
36
请教去哪里查H1B名额?
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e*o
37
HSA不需要每年都用掉的,你说的是FSA吧

【在 a*******d 的大作中提到】
: 公司可以存HSA,不过这个每年都要想办法怎么才能把它全用掉才行,所以以前都没有
: 存 。
: 谢谢你的建议,只有从了公司的plan

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s*y
38
8M urea

【在 j*******8 的大作中提到】
: 在用丙酮沉淀神经突触前蛋白, 然后溶在0.1% Triton 里, 不过发现溶解性很差,
: 像细沙子一样不溶。 蛋白是用来跑胶做WB的, 但需要测蛋白浓度, 所以不能直接溶
: 在SAMPLE BUFFER里。 请问有同修能指点一下吗? 多谢了!

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p*m
39
她三娃,关键是她年纪还小。我在她这年纪的时候刚刚开始念phd。

research/
掉。

【在 f*******e 的大作中提到】
: mm好厉害啊,你一点都没有休息吗?你每天工作多久?
: 我记得你好几个娃呢,都怎么handle的啊。我光想着带newborn就觉得没法做research/
: work,你怎么handle的?娃们一哭一闹我就没法集中精力工作。
: 一定分享一下经验!我这几天都要焦虑症了,恨不得能在去医院之前把所有的事情做掉。

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i*m
40
可是没h1b啊,公司也不管
估计有offer也搞不定了

【在 T**y 的大作中提到】
: MM已经拿到offer了,恭喜恭喜啊,BlessMM能尽快搞定H1B。
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x*o
41

不要选HSA的,虽然可以累计,便宜,但是如果出意外就倒霉了,我选个便宜的HSA,GAP是
3000刀,结果自己出了个意外,进了ER,2000刀帐单

【在 a*******d 的大作中提到】
: 新公司提供两个医疗保险的选项,Kaiser Permanente HMO和Aetna EPO,两个的价格都
: 在两周$45~$48之间,算下来一年至少要$1200。我的情况是单身,经常锻炼,最近几年
: 都没有看过医生,所以觉得这两个保险都太贵了,但是完全不买医疗保险又觉得风险很
: 大。
: 请问大家觉得公司的这两个保险选项是否对我适合?
: 如果我想自己买其他的保险,有什么high deductible, high copay, low premium的医
: 疗保险可以推荐吗?非常感谢。

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j*8
42
谢各位热心回答!
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y*e
43
嗯,人跟人不能比

【在 p**m 的大作中提到】
: 她三娃,关键是她年纪还小。我在她这年纪的时候刚刚开始念phd。
:
: research/
: 掉。

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i*r
44
怎么会不管呢,就算是走ICC的话也没用阿。你必须有你要为它工作的那个雇主的H1才
行。除非他们是可以给你办H1 transfer,只是不肯办新的H1。希望MM可以办好H1。

【在 i********m 的大作中提到】
: 可是没h1b啊,公司也不管
: 估计有offer也搞不定了

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w*0
45
为什么我觉得HSA不好呢?HSA都是公司抠门的选择吧。。。像一般年轻人,生病少,但
是万一要去医院,估计也花不了每年的deductible那么多(一般都好几千),所以基本
上就是自付了。
好的保险自己付的很少啊,我朋友的每次copay10到20块,但是剩下的全包了,唉,真
是羡慕。

【在 b*****o 的大作中提到】
: 公司不提供HSA这个选择吗? 一般单身身体好,最划算的就是存公司提供的HSA(如果
: 有这个选项)。 HSA就是high deductible, high copay, low premium的医疗保险。
: HMO和EPO其实是一回事,EPO只是一个改良版的HMO,不需要主治医生医生推荐。他们的
: 特点都是受network限制,但是看病几乎不要花钱。 另外,Kaiser HMO只能在Kaiser看
: 病。所以如果最近的Kaiser离你家还是很远的话,就有些麻烦了。
: biweekly 45-48其实不算贵。 你可能是从来没有看过病,所以觉得这个rate贵
: 。 公司出的部分一般是你出的那部分的10倍以上。所以,自己另买保险是天价,你需
: 要出“
: biweekly 45-48”10倍价格的保费,才可能买到差不多的保险。

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b*d
46
厉害!

【在 p**m 的大作中提到】
: 她三娃,关键是她年纪还小。我在她这年纪的时候刚刚开始念phd。
:
: research/
: 掉。

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i*m
47
我知道你意思
公司是不知道我需要h1b,到现在还没谈
我眼中怀疑这家公司就是不管h1b的

【在 i*****r 的大作中提到】
: 怎么会不管呢,就算是走ICC的话也没用阿。你必须有你要为它工作的那个雇主的H1才
: 行。除非他们是可以给你办H1 transfer,只是不肯办新的H1。希望MM可以办好H1。

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S*l
48
没办法,都是被逼的。
不过没有什么好抱怨的。总比做学生的条件好,好歹请得起人帮忙!

research/
掉。

【在 f*******e 的大作中提到】
: mm好厉害啊,你一点都没有休息吗?你每天工作多久?
: 我记得你好几个娃呢,都怎么handle的啊。我光想着带newborn就觉得没法做research/
: work,你怎么handle的?娃们一哭一闹我就没法集中精力工作。
: 一定分享一下经验!我这几天都要焦虑症了,恨不得能在去医院之前把所有的事情做掉。

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s*a
49
ICC will not work. if u use ICC, u r trying to covert a permant job to a
contract job.
The only thing you can do is to get documents from them and hire an atternoy
by yourself if the company really does not want to pay for it.

【在 i********m 的大作中提到】
: 我知道你意思
: 公司是不知道我需要h1b,到现在还没谈
: 我眼中怀疑这家公司就是不管h1b的

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i*r
50
牛人啊,事业家庭两不误

【在 p**m 的大作中提到】
: 她三娃,关键是她年纪还小。我在她这年纪的时候刚刚开始念phd。
:
: research/
: 掉。

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b*g
51
跟他们讲你需要h1b sponsorship,如果他们不负责,你可以自己办,只要他们提供相
应的支持就行了。

【在 i********m 的大作中提到】
: 我知道你意思
: 公司是不知道我需要h1b,到现在还没谈
: 我眼中怀疑这家公司就是不管h1b的

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y*r
52
啊,这贴吓着我了。。。
我还琢磨着休一年,哈哈
不是可以stop tenure clock么。。
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r*k
53
不需要client办h1,只需要client的证明表示你有project。

【在 i*****r 的大作中提到】
: 怎么会不管呢,就算是走ICC的话也没用阿。你必须有你要为它工作的那个雇主的H1才
: 行。除非他们是可以给你办H1 transfer,只是不肯办新的H1。希望MM可以办好H1。

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h*t
54
基本不办公,实在需要就电话或者SKYPE。不过我正好赶上寒假,没啥事需要管。
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M*e
55
给学生放羊了,做研究长着呢,不差那几天。
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M*e
56
坐月子看电脑没什么问题。不过作研究跟养娃,都不要焦虑。都是长期的事情,淡定,
hold住。
★ Sent from iPhone App: iReader Mitbbs 7.56 - iPad Lite
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w*e
57
一个月不上电脑。。。不可能吧
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c*n
58
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【在 f*******e 的大作中提到】
: 我妈说不让我看电脑,那怎么跟lab保持联系?主要是学生啊,毕竟一个多月的时间呢
: 。或者托其它faculty帮忙管理实验室?
: 大家月子里怎么做research或者work from home的?

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