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请问有没有好的immunofluorescence on tissue cultures cells的protocol?

请问有没有好的immunofluorescence on tissue cultures cells的protocol?# Biology - 生物学

p*n2011-02-03 08:02

1 楼

我先申请了H4,后来拿到offer又马上递了H1B。现在两个都approve了，请大家帮忙看看
我现在到底是什么身份。谢谢了。
H4:
receipt date: 10/01/2009
notice date: 11/20/2009
valide from 11/10/2009 to 09/19/2012
H1B:
receipt date: 10/30/2009
notice date: 11/18/2009
validate from 11/17/2009 to 09/27/2012

d*a2011-02-03 08:02

2 楼

已经完本。
我也刚看开始。
写宋初的，比起晚明，临高来还差点。但文笔还算不错

C*n2011-02-03 08:02

3 楼

同样的source,同样的720p, xvid之流出来大量的色斑
真是没法看

r*n2011-02-03 08:02

4 楼

俺养的细胞无论如何过不了Paraformaldehyde处理这一步，处理完了细胞就剩不下几个
，你想后面还有很多步骤呢。
试了好几次了，最后做完一个细胞也没有了，chamber slide预先再涂一遍poly-l-
lysine也没用，郁闷之级啊。
对了，细胞是colon cancer cells
先谢了

p*n2011-02-03 08:02

5 楼

询问了自己的律师.他认为我现在是H-1B身份,high likelihood but not absolute
certainty.
因为USCIS没有明确说明"last action rule"是以notification date 为准还是 start
date of validated period 为准. 我的律师觉得应该以"the day that the new
status comes into effect"为准.
真是复杂啊.

t*t2011-02-03 08:02

6 楼

宋朝的为毛叫夏鼎？还以为是夏朝的呢。
不过应该多写些夏朝，商朝的小说嘛。

g*g2011-02-03 08:02

7 楼

你家播放器有问题

r*n2011-02-03 08:02

8 楼

要不要试一试用ice-cold methanol固定？

m*n2011-02-03 08:02

9 楼

H-1B for sure

l*o2011-02-03 08:02

10 楼

写起来不过瘾，发财也只能存一房子贝壳

【在 t***t 的大作中提到】

: 宋朝的为毛叫夏鼎？还以为是夏朝的呢。
: 不过应该多写些夏朝，商朝的小说嘛。

C*n2011-02-03 08:02

11 楼

不是
是xvid的编码问题
你自己可以把同样的HD内容压缩一下试试看

【在 g*******g 的大作中提到】

: 你家播放器有问题

w*u2011-02-03 08:02

12 楼

warm PBS wash only once, or without PBS wash, suck out the medium and
directly fix cells by PFA.
try 1% PFA, or ice-cold methanol.
try lower cell confluence
try BD poly-D-lysine coated chamber slides

p*n2011-02-03 08:02

13 楼

谢谢满老.
咨询了几个律师了，现在都确定我是H1B。

j*u2011-02-03 08:02

14 楼

太久远以前了

【在 t***t 的大作中提到】

: 宋朝的为毛叫夏鼎？还以为是夏朝的呢。
: 不过应该多写些夏朝，商朝的小说嘛。

p*t2011-02-03 08:02

15 楼

那就是你的压缩软件有问题
h.264在同样码率下效果可能比xvid好些，但是xvid也不应该出现大量马赛克

【在 C********n 的大作中提到】

: 不是
: 是xvid的编码问题
: 你自己可以把同样的HD内容压缩一下试试看

m*n2011-02-03 08:02

16 楼

1. do not wash the plate.
2. add 4% PFA into the well immediately after you withdraw the medium
(one well each time, never let the well dry)
3. or add same volume of 8% PFA directly into the culture
without the withdrawl of the medium.
4. 10 minutes fixation, then wash with PBS.

【在 r*********n 的大作中提到】

: 俺养的细胞无论如何过不了Paraformaldehyde处理这一步，处理完了细胞就剩不下几个
: ，你想后面还有很多步骤呢。
: 试了好几次了，最后做完一个细胞也没有了，chamber slide预先再涂一遍poly-l-
: lysine也没用，郁闷之级啊。
: 对了，细胞是colon cancer cells
: 先谢了

y*r2011-02-03 08:02

17 楼

我的头都大死了,文学城上说要看notice date,网上查一大堆资料又说是看effective
date,公司律师也联系不上,周一就要上班,郁闷死了

start

【在 p*******n 的大作中提到】

: 询问了自己的律师.他认为我现在是H-1B身份,high likelihood but not absolute
: certainty.
: 因为USCIS没有明确说明"last action rule"是以notification date 为准还是 start
: date of validated period 为准. 我的律师觉得应该以"the day that the new
: status comes into effect"为准.
: 真是复杂啊.

X*r2011-02-03 08:02

18 楼

太久了，人物事件什么的一般读者都联系不上，制度风俗之类也较少资料，还不如干脆
架空呢。

【在 t***t 的大作中提到】

: 宋朝的为毛叫夏鼎？还以为是夏朝的呢。
: 不过应该多写些夏朝，商朝的小说嘛。

C*n2011-02-03 08:02

19 楼

马赛克本身不大，但是能看出来
H264 基本没这问题

【在 p****t 的大作中提到】

: 那就是你的压缩软件有问题
: h.264在同样码率下效果可能比xvid好些，但是xvid也不应该出现大量马赛克

p*w2011-02-03 08:02

20 楼

头大

【在 p*******n 的大作中提到】

: 我先申请了H4,后来拿到offer又马上递了H1B。现在两个都approve了，请大家帮忙看看
: 我现在到底是什么身份。谢谢了。
: H4:
: receipt date: 10/01/2009
: notice date: 11/20/2009
: valide from 11/10/2009 to 09/19/2012
: H1B:
: receipt date: 10/30/2009
: notice date: 11/18/2009
: validate from 11/17/2009 to 09/27/2012

b*s2011-02-03 08:02

21 楼

夏好像是指西夏

【在 X****r 的大作中提到】

: 太久了，人物事件什么的一般读者都联系不上，制度风俗之类也较少资料，还不如干脆
: 架空呢。

p*t2011-02-03 08:02

22 楼

h264和xvid的分辨率和bit rate是多少？

【在 C********n 的大作中提到】

: 马赛克本身不大，但是能看出来
: H264 基本没这问题

t*o2011-02-03 08:02

23 楼

临高更新太慢了

【在 d********a 的大作中提到】

: 已经完本。
: 我也刚看开始。
: 写宋初的，比起晚明，临高来还差点。但文笔还算不错

C*n2011-02-03 08:02

24 楼

Video: Xvid 640x272 23.98fps 758kbps [Video 0]

【在 p****t 的大作中提到】

: h264和xvid的分辨率和bit rate是多少？