b*r
3 楼
看你如何定义PCR鉴定
如果是KOMP那样先用loxp引物和arm外的引物扩长片段PCR,然后用loxp引物测序,5,3
端都对,我很难想象会有几个假阳性
如果就是用vector内部引物扩个带,假阳性太多了
如果是KOMP那样先用loxp引物和arm外的引物扩长片段PCR,然后用loxp引物测序,5,3
端都对,我很难想象会有几个假阳性
如果就是用vector内部引物扩个带,假阳性太多了
m*5
4 楼
我是用我引入的Neo resistant片断作正向 ,short arm 外找反向
s*r
5 楼
肯定有这个情况,撇开PCR设计策略不说,有可能你的colony不纯,只有一部分是
targeted,PCR是阳性,southern就不一定了。因为你最后打进去的只是很少的细胞,
colony不纯就增大失败的概率了
targeted,PCR是阳性,southern就不一定了。因为你最后打进去的只是很少的细胞,
colony不纯就增大失败的概率了
m*o
6 楼
实验室以前有个博后用PCR 得到大概6个阳性,用southern做发现全是假阳性。
m*o
8 楼
听实验室的一个老技术员说的,不清楚怎么设计的PCR.
我现在也在做southern,不想用同位素,所以也想用PCR,但是前面做这个课题的说好
像PCR不工作。我现在也没有想通怎么回事。
我现在也在做southern,不想用同位素,所以也想用PCR,但是前面做这个课题的说好
像PCR不工作。我现在也没有想通怎么回事。
s*r
10 楼
southern可以用roche的digoxigenin-label kit做,效果还行
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