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confocal laser bleach的depth如何计算
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confocal laser bleach的depth如何计算# Biology - 生物学
G*J
1
母亲入关I-97给的是超过180天,也就是说7月30号入境,I-94的最后截止是明年1月29
号。那么如果给母亲改成明年1月27号回国的机票,是否可以?虽然没有超过I-94上的
日期,但是具体算出来是超过180天的。不知道大家是怎么算这个日期的?还是说必须
要一天一天的算那个180天?谢谢。
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A*r
2
一直在潜水,这次忍不住冒个泡。
谢谢刚刚大师。
还得说一句,这个版是整个买买提上最和谐的版了。
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r*l
3
各位有$114 Kindle的注意查收了。
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b*s
4
2D bleach size 可以直观看见,但是怎么知道z轴方向被bleach多少厚度?
confocal is Leica SP2
谢谢.
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t*g
5
他们是作为6个月给的,没有问题
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L*1
6
刚刚 那是没的说的。
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a*8
7
Thanks for the heads-up. Just checked, got it too :)
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s*y
8
一般来说,就是那个理论上的光深度(optical section thickness),在你所用的显微镜
软件里应该有根据镜头参数换算出来的估计值

【在 b******s 的大作中提到】
: 2D bleach size 可以直观看见,但是怎么知道z轴方向被bleach多少厚度?
: confocal is Leica SP2
: 谢谢.

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t*s
9
看置顶的常见问题,从来没180天这个说法。
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g*o
10
索滴俺一阵脸红心跳,哈哈

【在 A********r 的大作中提到】
: 一直在潜水,这次忍不住冒个泡。
: 谢谢刚刚大师。
: 还得说一句,这个版是整个买买提上最和谐的版了。

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b*s
11
多谢sunny。
confocal有俩pinholes。bleach在axis上的厚度应该只与入射光的pinhole有关。而且
一般软件里给的估计值是基于point spread function,入射光波长488nm的时候,axis
上估算值大概是500nm。但是在一个给定的ROI内,scanned的points很多,这样最后在
axis上被漂白的区域远远不止500nm。不知道这样理解对不对?
微镜
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G*J
12
谢谢各位。
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i*t
13
嘿嘿!

【在 g*********o 的大作中提到】
: 索滴俺一阵脸红心跳,哈哈
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h*v
14
To my understanding, pinhole is just before PMT detector, and can't
exclude anything from the laser. The laser beam will penetrate the whole
sample...Hope someone can clarify that.

【在 b******s 的大作中提到】
: 2D bleach size 可以直观看见,但是怎么知道z轴方向被bleach多少厚度?
: confocal is Leica SP2
: 谢谢.

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A*r
15
刚刚大师的马甲?

【在 g*********o 的大作中提到】
: 索滴俺一阵脸红心跳,哈哈
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b*s
16
扫描confocal有两个pinhole
入射光的pinhole可以使得入射光成为一个point light source,这样即使penetrate进
入tissue,根据airy disc图,focal plane之外的illumination越远越可以忽略不计。
optical section跟俩个pinhole都有关系,但是我觉得bleaching effect和
detector前的pinhole没有关系。

【在 h*******v 的大作中提到】
: To my understanding, pinhole is just before PMT detector, and can't
: exclude anything from the laser. The laser beam will penetrate the whole
: sample...Hope someone can clarify that.

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w*r
17
粉丝吧,应该叫刚丝,赫赫

【在 A********r 的大作中提到】
: 刚刚大师的马甲?
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s*j
18
就一个pinhole. 激光直接fiber couple进入scanhead.
这个不能看airy disk的图, 得看公司提供的scan-head的光路图.

【在 b******s 的大作中提到】
: 扫描confocal有两个pinhole
: 入射光的pinhole可以使得入射光成为一个point light source,这样即使penetrate进
: 入tissue,根据airy disc图,focal plane之外的illumination越远越可以忽略不计。
: optical section跟俩个pinhole都有关系,但是我觉得bleaching effect和
: detector前的pinhole没有关系。

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c*p
19
没错,著名钢丝

【在 w********r 的大作中提到】
: 粉丝吧,应该叫刚丝,赫赫
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s*j
20
扫个3D的stack来算.
bleach的时候发生什么事鬼才知道. 不能靠猜.

【在 b******s 的大作中提到】
: 2D bleach size 可以直观看见,但是怎么知道z轴方向被bleach多少厚度?
: confocal is Leica SP2
: 谢谢.

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g*o
21
错了,曾经的首席刚丝,让位给浮云了,现在浮云闭关了,我又可以坐回去了,哈哈

【在 c***p 的大作中提到】
: 没错,著名钢丝
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b*s
22
能具体讲讲是怎么做的吗?

【在 s*****j 的大作中提到】
: 扫个3D的stack来算.
: bleach的时候发生什么事鬼才知道. 不能靠猜.

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A*r
23
Mark 了
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s*j
24
confocal 不就是那来扫三维的吗? bleach完以后, 扫一个, 你就知道在z方向bleach
了多少了.

【在 b******s 的大作中提到】
: 能具体讲讲是怎么做的吗?
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b*s
25
明白,xzy scan是不是也可以?
除了empirically测量,有没有理论模型可以比较准确估算厚度?

bleach

【在 s*****j 的大作中提到】
: confocal 不就是那来扫三维的吗? bleach完以后, 扫一个, 你就知道在z方向bleach
: 了多少了.

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b*l
26
会不会 z 方向上的 resolution 太低?

【在 s*****j 的大作中提到】
: confocal 不就是那来扫三维的吗? bleach完以后, 扫一个, 你就知道在z方向bleach
: 了多少了.

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Z*9
27
pinhole是PMT前面的一个小孔,用来屏蔽样本上out focus的光,与laser对样本的
bleach没有任何关系
laser在不同的位置的强度可以通过公式计算出来,bleach的速度与laser的强度相关,
理论上是可以计算的
但是由于不同的样本对光的穿透性不同,以及样本对光的散射,导致无法精确计算在样
本上不同位置的光强度
如果你的东西bleach特别快,用3d扫描不是一个很可行的方法
当你在扫描某一个layer的过程中,你同时bleach所有layer的样本

【在 b******s 的大作中提到】
: 明白,xzy scan是不是也可以?
: 除了empirically测量,有没有理论模型可以比较准确估算厚度?
:
: bleach

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s*j
28
不存在什么模型的问题. point scan confocal的光路是个cone structure. 焦点处光
强最大, 嚗光时间短. 其他地方光强小, 嚗光时间长. 那些地方会bleach点是算不出来
的.
bleach的原理是什么现在也是糊里糊涂的. invitrogen的所谓anti-bleach agent有没
有用全靠运气了.
leica SP2 如果你有piezo z-stage, 就扫一个xyz/xzy很快的.

【在 b******s 的大作中提到】
: 明白,xzy scan是不是也可以?
: 除了empirically测量,有没有理论模型可以比较准确估算厚度?
:
: bleach

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