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紧急求助:请大家推荐 RACE试剂盒
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紧急求助:请大家推荐 RACE试剂盒# Biology - 生物学
f*e
1
如果你的好朋友,跟你关系很不错,人也很考谱,去追求一个有女朋友的男人,而且抢
到了,你会指责
她,和她划清界限,还是支持她这个人(不论你是不是赞同她的价值观)。
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W*n
2
请大家推荐 RACE试剂盒:想扩增获得5‘区及全长基因。
查了几家,感觉大家比较推荐genetech的,但是十个反应的要740$,觉得很贵。希望有
过经验的朋友指点一下,以前没有做过RACE. 谢谢!
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s*3
3
在她下手之前就阻止她
如果她不听就算了
不会跟她划分界线,没准儿那个男的跟她在一起更合适呢!
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C*e
4
没用过RACE kit
但是做过RACE
你要3'不?
基因多长?
我用的RLM-RACE,就是RNA ligase mediated RACE
你搜文献应该能搜到
具体就是利用RNA ligase可以连ssRNA+ssDNA
合成DNA oligomer,上面有一段adaptor sequence(跟你的目的基因/目的基因组没有
同源性就行),5’端和3’端都要-OH吧,然后RNA ligase会催化把这段DNA连到mRNA上
,再做1st strand cDNA synthesis
然后用gene specific reverse primer和adaptor forward primer (可以是你前面用的
adaptor,也可以重新设计引物,往里面来一点,做巢式PCR)来扩你要的基因
这样子好像应该比$740便宜很多

【在 W*********n 的大作中提到】
: 请大家推荐 RACE试剂盒:想扩增获得5‘区及全长基因。
: 查了几家,感觉大家比较推荐genetech的,但是十个反应的要740$,觉得很贵。希望有
: 过经验的朋友指点一下,以前没有做过RACE. 谢谢!

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s*d
5
不会指责她的。会事先提醒她,但如果追到了,说明你情我愿,他们俩个更合适些。会
祝福她。
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W*n
6
谢谢! 我再查查。

【在 C*******e 的大作中提到】
: 没用过RACE kit
: 但是做过RACE
: 你要3'不?
: 基因多长?
: 我用的RLM-RACE,就是RNA ligase mediated RACE
: 你搜文献应该能搜到
: 具体就是利用RNA ligase可以连ssRNA+ssDNA
: 合成DNA oligomer,上面有一段adaptor sequence(跟你的目的基因/目的基因组没有
: 同源性就行),5’端和3’端都要-OH吧,然后RNA ligase会催化把这段DNA连到mRNA上
: ,再做1st strand cDNA synthesis

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a*i
7
会提醒她的。觉得那样不道德,也不一定会有真幸福
但是如果她们真的在一起了,我也不会说什么了。
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w*n
8
First choice RACE kit from ambion
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Z*5
9
Clonetech的据说最好用,我用的是invitrogen的也不错。
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i*g
10
几百年前 我用过clonetech的
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f*n
11
我用下面的这个克隆过2个全长基因哦。不到2千的全长。
CapFishing(seegene, seoul, Korea).
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W*n
12
谢谢各位的信息!

【在 f********n 的大作中提到】
: 我用下面的这个克隆过2个全长基因哦。不到2千的全长。
: CapFishing(seegene, seoul, Korea).

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b*y
13
用Roche
我用过,两端都能扩,不过记住引物设计退火温度高一点
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