【蛋白表达】4对二硫键的蛋白，有什么简单的办法表达呀？ - 未名空间MITBBS历史存档

国际科技财经博客移民网络热点娱乐民生时事公众号

Redian新闻

>未名空间

>Biology - 生物学

【蛋白表达】4对二硫键的蛋白，有什么简单的办法表达呀？

【蛋白表达】4对二硫键的蛋白，有什么简单的办法表达呀？# Biology - 生物学

s*32011-08-03 07:08

1 楼

蛋白本身不长，才50个不到aa，但是有8个cysteine!之前做表达用大肠融合表达，切了
之后就沉淀啦，估计是二硫键氧化后聚集啦，后来先在空气中把溶菌液搅拌加过氧化氢
氧化，再切，发现切不掉啦，没办法，老板让做真菌和植物，觉得不怎么靠谱呀，因为
蛋白本身就是抗真菌的。哪位前辈给点提示吧，这个做包涵体然后复性有戏吗？或者其
他什么比较高效点的表达系统？有人做过类似的东西么？谢谢呀

p*s2011-08-03 07:08

2 楼

我觉得这老板胡出主意，要是真菌植物那么好做大家都还用大肠杆菌干嘛？关键你没说
清楚，蛋白是可溶的还是在包涵体里？如果是可溶的为什么能用包涵体复性？“切”是
什么意思？cysteine这种东西不能用过氧化氢吧，很容易氧化成磺酸。以前没人做过这
个蛋白么？找找类似的文章。

【在 s******3 的大作中提到】

: 蛋白本身不长，才50个不到aa，但是有8个cysteine!之前做表达用大肠融合表达，切了
: 之后就沉淀啦，估计是二硫键氧化后聚集啦，后来先在空气中把溶菌液搅拌加过氧化氢
: 氧化，再切，发现切不掉啦，没办法，老板让做真菌和植物，觉得不怎么靠谱呀，因为
: 蛋白本身就是抗真菌的。哪位前辈给点提示吧，这个做包涵体然后复性有戏吗？或者其
: 他什么比较高效点的表达系统？有人做过类似的东西么？谢谢呀