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RNA extraction help!!

RNA extraction help!!# Biology - 生物学

m*s2012-02-17 08:02

1 楼

随着信息时代的瞬息万变，微信走进了人们的生活，跟上时代的脚步，未名空间
Movie创建了微信群。欢迎大家踊跃加入！期待着您与我们畅所欲聊，如您希望
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i*t2012-02-17 08:02

2 楼

今天提取RNA,方法是先trizol碾磨保存样品（取样品要用很长时间，不能马上提取），
然后解冻加chloroform（200ul/1ml Trizol）离心取上清液,再直接用RNeasy kit提取
（就是先ethanol再...）。得到的RNA，260/280很好，但260/230较低。大家能否给点
建议，能怎样纯化一下，得到的RNA量较低（35ng/ul for 25 ul）？RNA是用来做qPCR
的，担心是不是phenol而影响酶活性。谢谢

y*i2012-02-17 08:02

3 楼

260/230经常是trizol有残留洗column的时候小心一点
用离心机比vacuum要容易弄干净一点
不过你做qpcr而已不管是量还是质量上来说都足够了

qPCR

【在 i****t 的大作中提到】

: 今天提取RNA,方法是先trizol碾磨保存样品（取样品要用很长时间，不能马上提取），
: 然后解冻加chloroform（200ul/1ml Trizol）离心取上清液,再直接用RNeasy kit提取
: （就是先ethanol再...）。得到的RNA，260/280很好，但260/230较低。大家能否给点
: 建议，能怎样纯化一下，得到的RNA量较低（35ng/ul for 25 ul）？RNA是用来做qPCR
: 的，担心是不是phenol而影响酶活性。谢谢