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请教组蛋白Chromatin IP的问题
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s*e
2
【 以下文字转载自 LosAngeles 讨论区 】
发信人: scubalele (scubalele), 信区: LosAngeles
标 题: 请问有人用过LA地区的恒益门窗吗?请大家还有张老三帮忙!!!
发信站: BBS 未名空间站 (Tue Apr 13 01:56:45 2010, 美东)
最近在考虑换门窗。 请问有没有人用过恒益门窗的? 从他们的网站和介绍看起来还不
错, 比home depot 便宜很多。就是想听听用过的人的评价是怎样的。。 小女子多谢
了先 ! :)
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x*2
3
3个月前,种的光脚梅/李树,现在还都光秃秃的,梅的主杆和枝条还都是绿的,掰它们
还有弹性,,李的主杆有点绿,但枝条都干了,,等了这么久,一点要萌芽的迹象都没
有,,树神们告诉我,还需要再等吗?还要等多久??
还有3棵光脚玫瑰,同期的都发芽长花苞了,一棵干脆黑了,就它们杆还绿着,但纹丝
不动如初,,这还要等多久?玫瑰党的筒子们来说说。
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g*a
4
最近在做Chromatin IP, 以前都做转录因子结合DNA,一般先做个预测,然后蛋白拉
下来做pcr。老板说想看下转录因子结合后,组蛋白在该基因启动子区域结合的变化。
我想请教一下组蛋白结合在DNA启动子上的什么区域,好方便设计引物?是ATG
start codon附近还是TATA box之类的呢?
另外,如果我选一个促进的,一个抑制的组蛋白,可以选H3K9Ac和H3K9Me2/
H3K27Me2的antibody吗?
以前没有做过组蛋白的问题,请熟手不吝赐教,感激不尽。
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g*i
5
Is this a really good offer?
I don't travel much, what is the value of 75k points of that plz?
Thank you.
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H*7
6
老三,有人找!
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l*d
7
等地用?
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s*s
8
我瞎说两句,可能没理解你的问题。
你是打算做seq还是pcr? seq的话所有基因都看到,pcr的话你怎么做
定量?realtime? 另外,组蛋白是everywhere,除了start site低一点,
你怎么设计引物?还是你打算看特定位置的组蛋白,比如-1?

【在 g******a 的大作中提到】
: 最近在做Chromatin IP, 以前都做转录因子结合DNA,一般先做个预测,然后蛋白拉
: 下来做pcr。老板说想看下转录因子结合后,组蛋白在该基因启动子区域结合的变化。
: 我想请教一下组蛋白结合在DNA启动子上的什么区域,好方便设计引物?是ATG
: start codon附近还是TATA box之类的呢?
: 另外,如果我选一个促进的,一个抑制的组蛋白,可以选H3K9Ac和H3K9Me2/
: H3K27Me2的antibody吗?
: 以前没有做过组蛋白的问题,请熟手不吝赐教,感激不尽。

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s*c
9
you can sell them in the flea-market, 1.5c for 1point
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f*i
10
是有MM找

【在 H******7 的大作中提到】
: 老三,有人找!
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g*e
11
希望是可以退货的。
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g*a
12
谢谢ls回帖,我就是做传统的chromatin ip,最后用realtime或者用普通pcr跑胶看条
带。原来组蛋白everywhere?那一般怎么看DNA上的组蛋白数量,种类和状态?用组蛋
白抗体拉下dna后,用引物扩什么特别的序列,可以得到阳性结果?我对组蛋白实在是
不了解,见笑了!

【在 s******s 的大作中提到】
: 我瞎说两句,可能没理解你的问题。
: 你是打算做seq还是pcr? seq的话所有基因都看到,pcr的话你怎么做
: 定量?realtime? 另外,组蛋白是everywhere,除了start site低一点,
: 你怎么设计引物?还是你打算看特定位置的组蛋白,比如-1?

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y*n
13
Why is it worth more than Chase URtimate points?
Is it able to be converted to miles as well?

【在 s**c 的大作中提到】
: you can sell them in the flea-market, 1.5c for 1point
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k*z
14
Pretty nice people. Very good price for Vinyl windows. But I did not choose
them as they do not do Aluminum windows.
I pick American Vision + Milgard window....it is really hard to get a good
price from American Vision, but they have skilled workers and good attitude
in all the process...good customer services too. I recommend AV, but you
have to be patient to negociate a good price with them...the first quote
they gave me was $7800 for 11 windows. My final deal is $3800. The first and
final quo
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x*2
15
它们的专地,不别用。但这么雕塑着,真考验耐心。

【在 l*********d 的大作中提到】
: 等地用?
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O*C
16
你要看组蛋白上面什么样的变化?methylation, Ub, Ac?还是和dna bind的dynamic?
每个nucleosome里面组蛋白是个octamer,h2a, h2b, h3, h4 X2,外面饶130左右个bp
,你要看那个?

【在 g******a 的大作中提到】
: 谢谢ls回帖,我就是做传统的chromatin ip,最后用realtime或者用普通pcr跑胶看条
: 带。原来组蛋白everywhere?那一般怎么看DNA上的组蛋白数量,种类和状态?用组蛋
: 白抗体拉下dna后,用引物扩什么特别的序列,可以得到阳性结果?我对组蛋白实在是
: 不了解,见笑了!

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c*y
17
每月2000难
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d*s
18
够狠,说说怎样砍了一半还多

choose
attitude
and

【在 k*******z 的大作中提到】
: Pretty nice people. Very good price for Vinyl windows. But I did not choose
: them as they do not do Aluminum windows.
: I pick American Vision + Milgard window....it is really hard to get a good
: price from American Vision, but they have skilled workers and good attitude
: in all the process...good customer services too. I recommend AV, but you
: have to be patient to negociate a good price with them...the first quote
: they gave me was $7800 for 11 windows. My final deal is $3800. The first and
: final quo

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l*d
19
出去游玩几个月,回家就有惊喜了。
帮我看看海棠!

【在 x******2 的大作中提到】
: 它们的专地,不别用。但这么雕塑着,真考验耐心。
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g*a
20
我想以H3K9Me2和H3K9Ac两个组蛋白为例,看他们在DNA上的结合多少,来表明该基因是
被抑制还是被激活。

bp

【在 O*C 的大作中提到】
: 你要看组蛋白上面什么样的变化?methylation, Ub, Ac?还是和dna bind的dynamic?
: 每个nucleosome里面组蛋白是个octamer,h2a, h2b, h3, h4 X2,外面饶130左右个bp
: ,你要看那个?

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g*i
21
AP 1000 each month, in Dec, help others pay the tuition and get cash, not
that difficult ah?
Just noticed somebody got the 100K bonus. Is that offer normal or just
targeted?

【在 c****y 的大作中提到】
: 每月2000难
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s*e
22
多谢, 你在american vision 用的是 Milgard 铝窗还是Vinyl的呀?
要是$3800 for Milgard Vinyl真是很好的deal啊
我们在HD quote的Simongton 不免税的那种都要快15K

choose
attitude

【在 k*******z 的大作中提到】
: Pretty nice people. Very good price for Vinyl windows. But I did not choose
: them as they do not do Aluminum windows.
: I pick American Vision + Milgard window....it is really hard to get a good
: price from American Vision, but they have skilled workers and good attitude
: in all the process...good customer services too. I recommend AV, but you
: have to be patient to negociate a good price with them...the first quote
: they gave me was $7800 for 11 windows. My final deal is $3800. The first and
: final quo

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x*2
23
发票全扔了---以为自己是绿手指!!
这么说,做最坏的打算了? 几乎都是快20刀一棵的,这不损失很大!!

【在 g***e 的大作中提到】
: 希望是可以退货的。
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g*a
24
我也不知道是不是我问题问得不好,还是我了解太少,为什么回贴的各位大哥都很
confuse似的,把基础知识说一遍,反过来问我一堆问题,如果组蛋白结合的情况各异
,很难一两句讲明白,不如能发我个有代表性的文章或综述最好了
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C*n
25
To be eligible to receive the bonus points, you must (1) apply for the new
Business Gold Rewards Card from American Express OPEN using Bonus ID 7616
prior to termination of this offer, but in no event later than November 3rd,
2011
今天最后一天。。。
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k*z
26
铝窗Aluminum.
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l*d
27
啊?
我买植物的发票都留着。

【在 x******2 的大作中提到】
: 发票全扔了---以为自己是绿手指!!
: 这么说,做最坏的打算了? 几乎都是快20刀一棵的,这不损失很大!!

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g*a
28
我只是准备用组蛋白抗体做常规的chromatin ip来看基因启动子区域是活化的还是抑制
的,教我用哪个抗体做哪段dna的pcr就好了嘛
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d*t
29
要花1w大洋,难啊
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k*z
30
7800是第一次的报价,然后他自己说可以打个85折。因为我是朋友介绍的,朋友也是砍
了他们差不多一半的价格。所以我大约就想4000左右可以成交。一直是谈vinyl的窗户
,价格在5000块的地方停止了,他死活不松口。我说预算就是3500.他说政府退税有30%
,刚刚好。我说我等不了。现在只有3500。
最后,他说,除非用milgard的铝窗,不用Aulin的。可以降到4000.后来我又找了其他
milgard的dealer来评估,都是4000左右。几天后AV打电话来followup,Sale又上门来
拜访,我就说,咱们老中的店就2800,你们服务好,我多付一点钱,3600.而且其他
milgard的dealer都可以做的到,你们一定可以做得到。最后3800.

【在 d*s 的大作中提到】
: 够狠,说说怎样砍了一半还多
:
: choose
: attitude
: and

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x*2
31
这段时间花钱如流水,ld发话了,好好家里蹲着。
我出门最爱逛的除了植物店还是植物店,会留意它的。

【在 l*********d 的大作中提到】
: 出去游玩几个月,回家就有惊喜了。
: 帮我看看海棠!

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O*C
32
这回知道你要干什么了。不过我不是做分子生物学的,只知道怎么合成各种组蛋白。不
知道你能找到好的抗体不?印象中Me2,Me同一个抗体都识别。还有你怎么确定这个H3
的PTM只有你要的K9 Me2 or Ac?

【在 g******a 的大作中提到】
: 我想以H3K9Me2和H3K9Ac两个组蛋白为例,看他们在DNA上的结合多少,来表明该基因是
: 被抑制还是被激活。
:
: bp

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b*i
33


【在 c****y 的大作中提到】
: 每月2000难
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s*e
34
佩服。。 看来要多quote几家。。 价比价才能有个好deal.. thanks for sharing.

30%

【在 k*******z 的大作中提到】
: 7800是第一次的报价,然后他自己说可以打个85折。因为我是朋友介绍的,朋友也是砍
: 了他们差不多一半的价格。所以我大约就想4000左右可以成交。一直是谈vinyl的窗户
: ,价格在5000块的地方停止了,他死活不松口。我说预算就是3500.他说政府退税有30%
: ,刚刚好。我说我等不了。现在只有3500。
: 最后,他说,除非用milgard的铝窗,不用Aulin的。可以降到4000.后来我又找了其他
: milgard的dealer来评估,都是4000左右。几天后AV打电话来followup,Sale又上门来
: 拜访,我就说,咱们老中的店就2800,你们服务好,我多付一点钱,3600.而且其他
: milgard的dealer都可以做的到,你们一定可以做得到。最后3800.

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l*d
35
不是,到我的帖子里看海棠。
大家都有这癖好,我要不是搬家,也是一有空就出去烧银子。

【在 x******2 的大作中提到】
: 这段时间花钱如流水,ld发话了,好好家里蹲着。
: 我出门最爱逛的除了植物店还是植物店,会留意它的。

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g*a
36
Thanks. In fact, i have no idea, otherwise, i won't be so desperate to ask
questions on mitbbs.

H3

【在 O*C 的大作中提到】
: 这回知道你要干什么了。不过我不是做分子生物学的,只知道怎么合成各种组蛋白。不
: 知道你能找到好的抗体不?印象中Me2,Me同一个抗体都识别。还有你怎么确定这个H3
: 的PTM只有你要的K9 Me2 or Ac?

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d*s
38


30%

【在 k*******z 的大作中提到】
: 7800是第一次的报价,然后他自己说可以打个85折。因为我是朋友介绍的,朋友也是砍
: 了他们差不多一半的价格。所以我大约就想4000左右可以成交。一直是谈vinyl的窗户
: ,价格在5000块的地方停止了,他死活不松口。我说预算就是3500.他说政府退税有30%
: ,刚刚好。我说我等不了。现在只有3500。
: 最后,他说,除非用milgard的铝窗,不用Aulin的。可以降到4000.后来我又找了其他
: milgard的dealer来评估,都是4000左右。几天后AV打电话来followup,Sale又上门来
: 拜访,我就说,咱们老中的店就2800,你们服务好,我多付一点钱,3600.而且其他
: milgard的dealer都可以做的到,你们一定可以做得到。最后3800.

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c*p
39
黑杆了就比较危险
没黑就等着,温度到了很快就发芽
avatar
s*t
40
跟转录抑制有关,H3K27me1 K9me3,激活的选K4me3
在TSS前选几段 做Q PCR试试

【在 g******a 的大作中提到】
: Thanks. In fact, i have no idea, otherwise, i won't be so desperate to ask
: questions on mitbbs.
:
: H3

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s*c
41
不知道,我没打算申这个。。。
版上不是有人刚发了包子么,拿到了100K的businees bonus,你可以问问他

【在 Z****e 的大作中提到】
: 只是businees卡 个人能申吗? 怎么填business name什么的啊
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x*2
42
额滴娘啊,都80 90度了,再等温度要焦了。
最可惜的是'天使玫瑰树'。

【在 c***p 的大作中提到】
: 黑杆了就比较危险
: 没黑就等着,温度到了很快就发芽

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g*a
43
thanks。TSS是什么的缩写?

【在 s*********t 的大作中提到】
: 跟转录抑制有关,H3K27me1 K9me3,激活的选K4me3
: 在TSS前选几段 做Q PCR试试

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g*i
44
There is a type of business called sole partnership. No worry about this,
just use ur own name as ur biz name, and ur ssn as the tax id, u will b fine.

【在 Z****e 的大作中提到】
: 只是businees卡 个人能申吗? 怎么填business name什么的啊
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x*2
45
那个白菜帖?都找不着了。

【在 l*********d 的大作中提到】
: 不是,到我的帖子里看海棠。
: 大家都有这癖好,我要不是搬家,也是一有空就出去烧银子。

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s*t
46
transcription start site

【在 g******a 的大作中提到】
: thanks。TSS是什么的缩写?
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Z*e
47
谢谢 明白了

fine.

【在 g*****i 的大作中提到】
: There is a type of business called sole partnership. No worry about this,
: just use ur own name as ur biz name, and ur ssn as the tax id, u will b fine.

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c*p
48
哦,温度那么高了还没发芽,不妙哦
angel face是不错,老四的最爱阿

【在 x******2 的大作中提到】
: 额滴娘啊,都80 90度了,再等温度要焦了。
: 最可惜的是'天使玫瑰树'。

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s*t
49
H3K9Me2和H3K9Ac不是组蛋白,只是组蛋白H3尾巴上的某个氨基酸的修饰。针对这些修
饰有特异的抗体(当然有的不像自己声称的那么特异)
选K27me3/2 K9me3/2/1 K4me3/2 K9ac看看,再用针对H3的抗体做control,normalize
在TSS前边选几段 做Q PCR
还可以看H2Bub,pol II的磷酸化吧,根据你的实验和对细胞的处理

【在 g******a 的大作中提到】
: 我想以H3K9Me2和H3K9Ac两个组蛋白为例,看他们在DNA上的结合多少,来表明该基因是
: 被抑制还是被激活。
:
: bp

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y*i
50
http://en.wikipedia.org/wiki/Sole_proprietorship

fine.

【在 g*****i 的大作中提到】
: There is a type of business called sole partnership. No worry about this,
: just use ur own name as ur biz name, and ur ssn as the tax id, u will b fine.

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x*2
51
曾经也是我的最爱,但俺现在变异思迁了---博爱啦。

【在 c***p 的大作中提到】
: 哦,温度那么高了还没发芽,不妙哦
: angel face是不错,老四的最爱阿

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l*1
52
You can try by this novel Nucleic acid/s binding Protein/s intrinsic
fluorescence analyzer for your experiment:
References:
//www.auc2012.uthscsa.edu/Duhr/Nature_Communications_Wienken_etal.pdf
//www.auc2012.uthscsa.edu/Duhr/MST_Publications.pdf
plus link:
//www.auc2012.uthscsa.edu/Duhr/Technology_Summary.pdf
NT.LabelFree: Measuring with intrinsic fluorescence:
Since no label is needed, also samples that might be sensitive to a labeling
procedure (e.g. some membrane receptors) can be measured.
The system is very sensitive, even for slightest modification of your
molecule of interest.
The system works perfectly for all systems where the titrated binding
partner shows no or only a weak intrinsic fluorescence. That includes
Nucleic acids, Peptides, Sugars most Small Molecules and many Proteins.
more relative files:
//www.auc2012.uthscsa.edu/Duhr/index.html
all were shown at below 2012 20th International Analytical Ultracentrifugation Conference now:
//auc2012.uthscsa.edu/speakers.php

【在 g******a 的大作中提到】
: Thanks. In fact, i have no idea, otherwise, i won't be so desperate to ask
: questions on mitbbs.
:
: H3

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F*1
53
Existing American Express OPEN Gold Card members are not eligible for this
offer. This is a limited time offer, which may be terminated by American
Express at any time.
I have the gold card, can't apply? Amex 太恶心了。
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g*a
54
感谢ls两位,抗体引物已订,做了看看怎么样
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C*n
55
可以。
你个人卡是OPEN吗?(这不是问句)

【在 F******1 的大作中提到】
: Existing American Express OPEN Gold Card members are not eligible for this
: offer. This is a limited time offer, which may be terminated by American
: Express at any time.
: I have the gold card, can't apply? Amex 太恶心了。

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l*y
56
我有一个gold premier,一个SPG,算不算“existing American Express OPEN Gold
Card member”?老大别扁我,就是想确认一下免得瞎折腾了。

【在 C******n 的大作中提到】
: 可以。
: 你个人卡是OPEN吗?(这不是问句)

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s*c
57
不算,除非你已经有了amex premier rewards business 卡

【在 l**y 的大作中提到】
: 我有一个gold premier,一个SPG,算不算“existing American Express OPEN Gold
: Card member”?老大别扁我,就是想确认一下免得瞎折腾了。

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g*n
58
同不打算申。。

【在 s**c 的大作中提到】
: 不知道,我没打算申这个。。。
: 版上不是有人刚发了包子么,拿到了100K的businees bonus,你可以问问他

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l*y
61
多谢老大,刚刚approve了。
我爱吃馃箅儿的。

【在 s**c 的大作中提到】
: 不算,除非你已经有了amex premier rewards business 卡
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a*e
62
现在没CO了,点还能做什么?还值这个钱吗
avatar
l*e
63
con baozi

【在 l**y 的大作中提到】
: 多谢老大,刚刚approve了。
: 我爱吃馃箅儿的。

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s*c
64
我上周1.52c/point卖了60K

【在 a***e 的大作中提到】
: 现在没CO了,点还能做什么?还值这个钱吗
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s*c
65
恭喜,谢包子,我爱吃果子的。。。

【在 l**y 的大作中提到】
: 多谢老大,刚刚approve了。
: 我爱吃馃箅儿的。

avatar
l*e
66
con
baozi

【在 s**c 的大作中提到】
: 我上周1.52c/point卖了60K
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d*a
67
pending. 不知道结果如何。
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k*2
68
应该可以. 但是你愿意花1W吗?

【在 m***6 的大作中提到】
: 可以要求match么,一个多月前申请了一个
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A*8
69
打什么电话要求match,我也是刚申请的,已经花了一万了

【在 k****2 的大作中提到】
: 应该可以. 但是你愿意花1W吗?
avatar
m*6
70
为了bonus豁出去啊

【在 k****2 的大作中提到】
: 应该可以. 但是你愿意花1W吗?
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d*g
71
比没有,好多了。。
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A*8
72
打了电话,说不行,yesterday only

【在 m***6 的大作中提到】
: 为了bonus豁出去啊
avatar
g*i
73
Plz always read the fine print, the fine print says no later than Nov 3rd,
2011. Offerexpires already. Easy all...
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