为什么IF 的green channel 无一抗的negative control还有较强的SIGNAL - 未名空间MITBBS历史存档

为什么IF 的green channel 无一抗的negative control还有较强的SIGNAL# Biology - 生物学

v*e2012-06-08 07:06

1 楼

我马上要从LA到Durham(北卡)了，和LG都是Ph.D.，想领养或是买只mini poodle(能领
养的poodle很少，上次去Durham的shelter就没赶上...)。希望大家帮忙出些建议，养
宠物是一辈子的事情，也想做负责任的家长：）
1.从breeder买纯种的mini poodle大概需要多少钱呢？每月养狗开销平均多少（包括狗
粮，上培训课等）？钱不是问题，只是想有个概念。
2.有没有可能买已经接受过基本训练的小狗呢？因为我们可以每天遛他两次，周末带他
去上课，但白天只有他在家的时间希望他知道在哪里上厕所...在这里又都是地毯...我
看网上有卖一些高科技的宠物厕所，不知道大家最初都是怎样过来的呢。主要是我们两
个人时间有限又很喜欢小狗。如果可行的话，还是希望可以养。
其他建议大家请补充。如果觉得两个Ph.D.不适合养狗因为时间投入大，也请直说。我
也很希望有只小狗会让他生活幸福。非常感谢！

e*p2012-06-08 07:06

2 楼

刚开始做IF, DABI GFP RFP都染了，结果发现GFP negative control还较强,确定没有
加一抗，加了一抗的更强，请问是否有遇到过这种情况，不知道有什么解决方法。。
。

m*j2012-06-08 07:06

3 楼

PHD和养狗没关系，我家两个也都是脑残，也可以养狗，也是养的没水平那种

W*72012-06-08 07:06

4 楼

细胞自发荧光很正常，我觉得如果你做荧光定量的话可以不用理它，就选几个背景细胞
subtract掉就行了。
最简单的方法就是把你的激发光强度降下来，当然这个只能降低一些自发荧光估计不会
一点都没有。
听说有人用一些filter能降低background，我不知道怎么用。
其他常用的方法有Glycine，CuSO4，NaBH4，ammonium salts和苏丹黑等一些染料，
具体方法自己google一下吧。

v*e2012-06-08 07:06

5 楼

我就是怕没时间陪他啊，倒不是别的...狗尤其是小的时候不是很粘人吗？请问你最开
始是怎么训练小狗上厕所的呢？谢谢

【在 m***j 的大作中提到】

: PHD和养狗没关系，我家两个也都是脑残，也可以养狗，也是养的没水平那种

e*p2012-06-08 07:06

6 楼

多谢！去查查FILTER先

l*o2012-06-08 07:06

7 楼

每月平均大约200，但是不包括vet。其实vet是大头，如果有个啥病的话。。。
如果每天只能遛两次的话别要puppy了，直接要成年狗吧。
可以找找附近有没有专门rescue mini poodle的地方。

【在 v****e 的大作中提到】

: 我马上要从LA到Durham(北卡)了，和LG都是Ph.D.，想领养或是买只mini poodle(能领
: 养的poodle很少，上次去Durham的shelter就没赶上...)。希望大家帮忙出些建议，养
: 宠物是一辈子的事情，也想做负责任的家长：）
: 1.从breeder买纯种的mini poodle大概需要多少钱呢？每月养狗开销平均多少（包括狗
: 粮，上培训课等）？钱不是问题，只是想有个概念。
: 2.有没有可能买已经接受过基本训练的小狗呢？因为我们可以每天遛他两次，周末带他
: 去上课，但白天只有他在家的时间希望他知道在哪里上厕所...在这里又都是地毯...我
: 看网上有卖一些高科技的宠物厕所，不知道大家最初都是怎样过来的呢。主要是我们两
: 个人时间有限又很喜欢小狗。如果可行的话，还是希望可以养。
: 其他建议大家请补充。如果觉得两个Ph.D.不适合养狗因为时间投入大，也请直说。我

i*02012-06-08 07:06

8 楼

GFP有自发荧光，如果做GFP的immunostain，得避开其自发荧光的区域（ex/em：485/
525）
另，你的negative control是什么？不表达GFP的细胞，还是表达GFP的细胞不加一抗
？如果第一次做，最好两个control都上一下，这样便于trouble shooting。如果你
染的是组织切片，只加二抗的control会有荧光，尤其血管区，因为有IgG。比较样本染
色，其有正信号，而control没有信号的区域显示有该蛋白的表达
如果你染的是细胞，只加二抗看到的均匀的荧光背景，则如2楼所言；如果看到点状荧
光，则多为二抗没有洗干净。

q*u2012-06-08 07:06

9 楼

你们比较适合养成年狗

【在 v****e 的大作中提到】

: 我马上要从LA到Durham(北卡)了，和LG都是Ph.D.，想领养或是买只mini poodle(能领
: 养的poodle很少，上次去Durham的shelter就没赶上...)。希望大家帮忙出些建议，养
: 宠物是一辈子的事情，也想做负责任的家长：）
: 1.从breeder买纯种的mini poodle大概需要多少钱呢？每月养狗开销平均多少（包括狗
: 粮，上培训课等）？钱不是问题，只是想有个概念。
: 2.有没有可能买已经接受过基本训练的小狗呢？因为我们可以每天遛他两次，周末带他
: 去上课，但白天只有他在家的时间希望他知道在哪里上厕所...在这里又都是地毯...我
: 看网上有卖一些高科技的宠物厕所，不知道大家最初都是怎样过来的呢。主要是我们两
: 个人时间有限又很喜欢小狗。如果可行的话，还是希望可以养。
: 其他建议大家请补充。如果觉得两个Ph.D.不适合养狗因为时间投入大，也请直说。我

m*j2012-06-08 07:06

10 楼

时间这个东西就真因人而易了
我们一开始是有父母在这里帮忙

l*o2012-06-08 07:06

11 楼

训练小狗上厕所就是死盯，一看有要尿的迹象就抱到pad上或者带出门。

【在 v****e 的大作中提到】

: 我就是怕没时间陪他啊，倒不是别的...狗尤其是小的时候不是很粘人吗？请问你最开
: 始是怎么训练小狗上厕所的呢？谢谢

O*n2012-06-08 07:06

12 楼

和phd有啥关系啊？
我家两人，一人脑残，一人比脑残还脑残，一样把狗养的有声有色，看你想投入的精力
和诚意的多少吧！还有就是，耐心是个大问题！

v*e2012-06-08 07:06

13 楼

恩，谢谢你，我来搜搜看。确实从时间看成年可能更合适，我就很怕失去宠物时难过，
所以想能养多久就养多久...

【在 l*****o 的大作中提到】

: 每月平均大约200，但是不包括vet。其实vet是大头，如果有个啥病的话。。。
: 如果每天只能遛两次的话别要puppy了，直接要成年狗吧。
: 可以找找附近有没有专门rescue mini poodle的地方。

a*t2012-06-08 07:06

14 楼

MM,欢迎来北卡!
这个问题好多人问啦，MM可以考考古，回答都非常详细呢！

要不再等等？看看rescue adoption
每月150-200，没上过课，自学..没成才，玩具和chow啥的比较费钱，因为小东西喜新
厌旧。 BOBO说的是，VET花费大，小puppy的话，可能要多去送几次钱了~ 不过大多数
狗狗是健康的，只是万一有啥的话，花费比较大，这个要有心理准备！
建议直接进大狗，起码8个月以上的puppy。两个人可以值班嘛，把在家陪她的时间最大
化~~：）
狗狗不论大小，发生accident都是在所难免的，很多清洗地毯的东西，买点刷刷就好啦
~狗狗很乖的，一般不在家里NN，BB，除非意外~
我觉得所有事情都是尽力而为，有人天天闲家也未必能照顾好狗狗，有人每天很忙，但
是还会百忙之中抽空陪狗狗玩，他们一样很开心。关键是一颗恒心：）
希望能给MM一些帮助

【在 v****e 的大作中提到】

: 我马上要从LA到Durham(北卡)了，和LG都是Ph.D.，想领养或是买只mini poodle(能领
: 养的poodle很少，上次去Durham的shelter就没赶上...)。希望大家帮忙出些建议，养
: 宠物是一辈子的事情，也想做负责任的家长：）
: 1.从breeder买纯种的mini poodle大概需要多少钱呢？每月养狗开销平均多少（包括狗
: 粮，上培训课等）？钱不是问题，只是想有个概念。
: 2.有没有可能买已经接受过基本训练的小狗呢？因为我们可以每天遛他两次，周末带他
: 去上课，但白天只有他在家的时间希望他知道在哪里上厕所...在这里又都是地毯...我
: 看网上有卖一些高科技的宠物厕所，不知道大家最初都是怎样过来的呢。主要是我们两
: 个人时间有限又很喜欢小狗。如果可行的话，还是希望可以养。
: 其他建议大家请补充。如果觉得两个Ph.D.不适合养狗因为时间投入大，也请直说。我

v*e2012-06-08 07:06

15 楼

哇，太谢谢你的鼓励呢！我正在查mini poodle shelter，能领养就领养。我来查查旧
帖子。

【在 a********t 的大作中提到】

: MM,欢迎来北卡!
: 这个问题好多人问啦，MM可以考考古，回答都非常详细呢！
:
: 要不再等等？看看rescue adoption
: 每月150-200，没上过课，自学..没成才，玩具和chow啥的比较费钱，因为小东西喜新
: 厌旧。 BOBO说的是，VET花费大，小puppy的话，可能要多去送几次钱了~ 不过大多数
: 狗狗是健康的，只是万一有啥的话，花费比较大，这个要有心理准备！
: 建议直接进大狗，起码8个月以上的puppy。两个人可以值班嘛，把在家陪她的时间最大
: 化~~：）
: 狗狗不论大小，发生accident都是在所难免的，很多清洗地毯的东西，买点刷刷就好啦

B*t2012-06-08 07:06

16 楼

怎么样能比脑残还脑残？

【在 O**********n 的大作中提到】

: 和phd有啥关系啊？
: 我家两人，一人脑残，一人比脑残还脑残，一样把狗养的有声有色，看你想投入的精力
: 和诚意的多少吧！还有就是，耐心是个大问题！

a*t2012-06-08 07:06

17 楼

bogart 妈，宝儿拉稀，有啥药推荐呀，明天我们要出去玩，准备去买一个备着~

【在 B****t 的大作中提到】

: 怎么样能比脑残还脑残？

v*e2012-06-08 07:06

18 楼

我猜是post-脑残...

【在 B****t 的大作中提到】

: 怎么样能比脑残还脑残？

t*n2012-06-08 07:06

19 楼

脑残=permanent head damage=PhD
我猜...=.=

B*t2012-06-08 07:06

20 楼

要不你现在到我家来拿吧
petsmart就有，估计你来不及去买了

【在 a********t 的大作中提到】

: bogart 妈，宝儿拉稀，有啥药推荐呀，明天我们要出去玩，准备去买一个备着~

O*n2012-06-08 07:06

21 楼

如果若干年之后，又回到学校去读书，是不是在脑残的基础上又残了一些。

【在 B****t 的大作中提到】

: 怎么样能比脑残还脑残？

B*t2012-06-08 07:06

22 楼

嗯，这个很厉害！

【在 O**********n 的大作中提到】

: 如果若干年之后，又回到学校去读书，是不是在脑残的基础上又残了一些。

O*n2012-06-08 07:06

23 楼

而且读的是和原来完全不同的专业。

【在 B****t 的大作中提到】

: 嗯，这个很厉害！

a*t2012-06-08 07:06

24 楼

没关系,我今天给她吃了南瓜,看看晚上咋样~`因为明天下午出门了~所以先问好你,以备
不时之需 :)
对啦,你说的马用香波,有conditioner 么？给推荐个牌子吧：）

【在 B****t 的大作中提到】

: 要不你现在到我家来拿吧
: petsmart就有，估计你来不及去买了

B*t2012-06-08 07:06

25 楼

马用香波还就是conditioner 比较好用，估计香波成分简单，适合狗和马，对人到没
有特别好的，conditioner有比较明显的volumizing 的效果，据说在黑人中销量第一是
因为让细细卷卷的头发更有质感。所以应该对宝儿很适用。

【在 a********t 的大作中提到】

: 没关系,我今天给她吃了南瓜,看看晚上咋样~`因为明天下午出门了~所以先问好你,以备
: 不时之需 :)
: 对啦,你说的马用香波,有conditioner 么？给推荐个牌子吧：）

B*t2012-06-08 07:06

26 楼

狗狗拉肚子的药
http://www.petsmart.com/product/index.jsp?productId=2755217
这个是白色液体，扮在吃的里面喂的,好就好在petsmart就能买。但一大勺白的黏糊糊
的东西，要让狗都吃干净不容易，得找他们特喜欢的东西，最好也是黏糊糊的一起喂。
http://www.petcarerx.com/pcrx/productpages/product.aspx?pid=10813&k=Diarrhea%20Homeopathic
网上买这个比较好用，直接滴嘴里就行，大狗10滴，小狗5滴，更方便一点。

v*e2012-06-08 07:06

27 楼

宝儿妈，宝儿是啥品种啊？他的毛看起来可真漂亮，而且这个表情好Q啊...

【在 a********t 的大作中提到】

: MM,欢迎来北卡!
: 这个问题好多人问啦，MM可以考考古，回答都非常详细呢！
:
: 要不再等等？看看rescue adoption
: 每月150-200，没上过课，自学..没成才，玩具和chow啥的比较费钱，因为小东西喜新
: 厌旧。 BOBO说的是，VET花费大，小puppy的话，可能要多去送几次钱了~ 不过大多数
: 狗狗是健康的，只是万一有啥的话，花费比较大，这个要有心理准备！
: 建议直接进大狗，起码8个月以上的puppy。两个人可以值班嘛，把在家陪她的时间最大
: 化~~：）
: 狗狗不论大小，发生accident都是在所难免的，很多清洗地毯的东西，买点刷刷就好啦

a*t2012-06-08 07:06

28 楼

谢谢 bogart 妈妈, 周末出去玩，已经回来了，宝儿大小姐也特别给面子，连续吃了两
天南瓜粥和白饭加蛋黄之后，就好啦，不拉稀了，现在又吃嘛嘛香了：）
不过这个拉肚子的药，我觉得还是去买个备着吧，省得以后手忙脚乱

【在 B****t 的大作中提到】

: 狗狗拉肚子的药
: http://www.petsmart.com/product/index.jsp?productId=2755217
: 这个是白色液体，扮在吃的里面喂的,好就好在petsmart就能买。但一大勺白的黏糊糊
: 的东西，要让狗都吃干净不容易，得找他们特喜欢的东西，最好也是黏糊糊的一起喂。
: http://www.petcarerx.com/pcrx/productpages/product.aspx?pid=10813&k=Diarrhea%20Homeopathic
: 网上买这个比较好用，直接滴嘴里就行，大狗10滴，小狗5滴，更方便一点。

a*t2012-06-08 07:06

29 楼

我家的是alaskan malamute 饼脸一张~

【在 v****e 的大作中提到】

: 宝儿妈，宝儿是啥品种啊？他的毛看起来可真漂亮，而且这个表情好Q啊...

l*h2012-06-08 07:06

30 楼

我家就是mini poodle。去年10月底在pet store买的，因为他当时已经5个月大，所以
on sale花了700刀买下。现在已经快10个月了。一天至少带他出去4次，每3，4小时要
上厕所。所以如果白天没人照顾的话，puppy肯定不行的。
平时费用是不大，狗粮也就8刀一带。但是去vet比较贵，每次都要100多刀。下周带他
去fix，也要100多刀，还算是有friends of animals的证明，超级便宜了。
我也是买了狗之后才知道puppy mill，所以强烈建议去领养狗或者到breeder那去买。
宠物店的狗狗太惨了！！！

r*n2012-06-08 07:06

31 楼

go to petfinder.com or mini poodle rescure shelter. Anyway, try to adopt(too
many animal out there without a home)
For potty training, you need to prepard to spend some time in the begining.
I took mine out every 2 or 3 hours, or after they wake up, after they play
and eat. Depend on dogs,the training time vary. Poodle is a very smart breed
, so it shouldn't take much longer. Off course, you can get an adult dog
already trained. Try to feed them good wholesome homemake food(meat, veggie,
fruit),

m*j2012-06-08 07:06

32 楼

什么狗粮8块多？

【在 l**h 的大作中提到】

: 我家就是mini poodle。去年10月底在pet store买的，因为他当时已经5个月大，所以
: on sale花了700刀买下。现在已经快10个月了。一天至少带他出去4次，每3，4小时要
: 上厕所。所以如果白天没人照顾的话，puppy肯定不行的。
: 平时费用是不大，狗粮也就8刀一带。但是去vet比较贵，每次都要100多刀。下周带他
: 去fix，也要100多刀，还算是有friends of animals的证明，超级便宜了。
: 我也是买了狗之后才知道puppy mill，所以强烈建议去领养狗或者到breeder那去买。
: 宠物店的狗狗太惨了！！！