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谁来答疑一下?# Biology - 生物学
k*s
1
我能理解感情好的夫妻,在朋友圈里秀恩爱的,晒老公或者晒老婆的,但是不能太过了
吧,偶尔晒一次,也就算了,但是每天都在晒,一天晒好几次,这算是什么毛病啊。
我一个老同学,现在就是这样的,我以前是跟她都在群里,没有加她的微信,现在加了
她的微信了,才发现她还有这样的习惯,超级的腻人啊。
从早上开始,晒跟老公吃饭,并且附上一些肉麻的话语,比如“跟老公吃早餐真开心呀
,又是元气满满的一天”。
中午也晒,晚上也晒,一起散步也晒,一起逛街也晒,就算她老公出差了,也晒一张她
老公的照片,表示一下思念之情,附上更加肉麻的话语,比如“老公不在身边,好想念
哦,一天看不到老公,都觉得受不了”。
我实在是烦透了,恩爱是好事,但是不用非得一直晒在朋友圈里啊,别的夫妻有的感情
正在经历危机,或者是今天跟老公吵架了的,看到你这样秀恩爱,让人家有点难过吧,
触景伤情啊,一点基本的到里都不明白。
后来我一个姐们说,缺什么晒什么,可能是她跟老公并非那么甜蜜,所以才在朋友圈里
伪装,不知道真假,反正是甜到齁人的晒。
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m*d
2
这个应该不难实现吧
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e*8
3
正在做RT-PCR比较某个基因的表达,设计了2对引物,结果不一样,这怎么解释? 谢谢
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s*o
4
这种我也很烦
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m*s
5
没懂
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h*y
6
结果到底怎么不一样,引物是怎样的?你得多提供一些信息,别人才好帮你。

【在 e********8 的大作中提到】
: 正在做RT-PCR比较某个基因的表达,设计了2对引物,结果不一样,这怎么解释? 谢谢
: !

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s*o
7
一点都不顾及别人感受
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l*e
8
支持插耳塞
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a*x
9
是qPCR还是跑胶的?有没有splicing?

【在 e********8 的大作中提到】
: 正在做RT-PCR比较某个基因的表达,设计了2对引物,结果不一样,这怎么解释? 谢谢
: !

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w*7
10
如果你不爱看某个好友的朋友圈,可以在微信屏蔽的,这样眼不见心不烦了
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m*d
11
插外接耳塞后,耳塞不响,喇叭也不响。

【在 l*****e 的大作中提到】
: 支持插耳塞
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e*8
12
结果不一样就是:一对引物可以看出2个样本的区别,另外一对看不出来。我做的是普
通的pcr,跑胶的。基因组编码序列也拿去测序了,没有区别。
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m*7
13
比晒饭的好。不在微信朋友圈,而是在群里晒。吃得狗屎一样。大家聊着天,突然蹦出
来一张狗屎一样的图,你想想那感觉。
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m*s
14
检查耳塞

【在 m*d 的大作中提到】
: 插外接耳塞后,耳塞不响,喇叭也不响。
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b*s
15
引物要是靠近5端或靠近3端结果很有可能不一样。很多时候反转录不一定能扩出完整全
长的cDNA.

【在 e********8 的大作中提到】
: 正在做RT-PCR比较某个基因的表达,设计了2对引物,结果不一样,这怎么解释? 谢谢
: !

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o*y
16
还有一天到晚刷屏的晒娃狂魔和微商达人
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S*r
17
多插拔几下就好了。
试一试先插再放音视频。
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C*e
18
两对引物的PCR efficiency不一样
理论值是2(每个cycle翻番)
不过实际值可以差很多
一个1.8的一个1.9的,30轮PCR下来最终可以差很多
很多RT-PCR的试验根本不考虑这些问题
得出来的结论也就站不住脚
用RT-PCR做定量其实有很多很多tricky的地方
不过普遍被无视了

【在 e********8 的大作中提到】
: 正在做RT-PCR比较某个基因的表达,设计了2对引物,结果不一样,这怎么解释? 谢谢
: !

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d*m
19
我倒希望我老婆多晒我
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j*6
20
用DSM乱七八糟调几下就响了
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e*8
21
那是不是应该相信短片段的那个结果?

【在 b******s 的大作中提到】
: 引物要是靠近5端或靠近3端结果很有可能不一样。很多时候反转录不一定能扩出完整全
: 长的cDNA.

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d*m
22
可是,有必要么?
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i*e
23
I saw this trick somewhere:
1. Unplug the headphone.
2. Turn down the volume to minimum.
3. Plug in the headphone.
4. Turn up the volume.
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e*8
24
我比较的2个样本之间的区别,不是2个pcr 引物的区别。 或者你的意思是同样的引物
在2个样本间的亲和性不一致?

【在 C*******e 的大作中提到】
: 两对引物的PCR efficiency不一样
: 理论值是2(每个cycle翻番)
: 不过实际值可以差很多
: 一个1.8的一个1.9的,30轮PCR下来最终可以差很多
: 很多RT-PCR的试验根本不考虑这些问题
: 得出来的结论也就站不住脚
: 用RT-PCR做定量其实有很多很多tricky的地方
: 不过普遍被无视了

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l*g
25
能用Bluetooth耳塞么?
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C*e
26
你的问题是“一对引物可以看出2个样本的区别,另外一对看不出来”
对吧
假设我没有理解错的话对于同一个基因你设计了两对引物
但做出来结果不同
除了楼上有人提到的cDNA未必都是全长以外
(这个你的信息更全面,应该可以判断或者排除)
那么还有一个可能原因是
引物对A和引物对B的在当前实验条件下的PCR efficiency不一样(不一定是亲和性)
更何况你还是用的跑胶的方法,而不是real-time
假设引物对A可以看出两个样本有差别
引物对B效率远高于A,用两个样本PCR以后都达到饱和(平台),跑胶就看不出区别
或者引物对B效率很低,产物都不高,跑胶也都是两个淡淡的条带,也看不出区别
当然具体什么情况谁都没有你熟悉自己的实验设计
大家也就是给个建议
提供一个trouble shooting的方向而已

【在 e********8 的大作中提到】
: 我比较的2个样本之间的区别,不是2个pcr 引物的区别。 或者你的意思是同样的引物
: 在2个样本间的亲和性不一致?

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i*e
27
yes

【在 l*****g 的大作中提到】
: 能用Bluetooth耳塞么?
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l*e
28
必然需要real-time
就跟楼上说的一样 比如你两对引物A B A效率高 B效率差
肯定可以在某个cycle
看到
A产物已经接近饱和(ct曲线上面 看不出差别)
B产物还没有饱和(ct曲线中间 容易看出差别)
另外 更严谨一点 你sequence了PCR product么 ... 怎么知道产物不是dimer或者其他
什么乱七八糟的东西

【在 e********8 的大作中提到】
: 正在做RT-PCR比较某个基因的表达,设计了2对引物,结果不一样,这怎么解释? 谢谢
: !

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m*d
29
这应该是bug啊

【在 i***e 的大作中提到】
: I saw this trick somewhere:
: 1. Unplug the headphone.
: 2. Turn down the volume to minimum.
: 3. Plug in the headphone.
: 4. Turn up the volume.

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