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有没有自己克隆shRNA 到lentivirus vector 里的?
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有没有自己克隆shRNA 到lentivirus vector 里的?# Biology - 生物学
l*o
1
问一下在公司上班的朋友们,你们能在公司上web of science查找文献吗?
就像在大学里一样,想要查什么文章,这个大学必须购买了一些数据
库一样(例如elsevier、EI village、science diredct等等)。
公司通常都可以方便的查找各种文章以及专利信息吗?
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s*o
2
公司的benefits之一,$21/m,不知道有没有实际用处,大家上班的都有/买不?
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m*t
3
sequence 和酶切点已知。OE 作过,shRNA 真没作过。 多谢
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G*e
4
除非买了数据库才可以把,这种数据库订购可不是小钱呵呵。
如果没有的话,要么找学校里的朋友,要么用学校提供的VPN(如果有的话)

问一下在公司上班的朋友们,你们能在公司上web of science查找文献吗?
就像在大学里一样,想要查什么文章,这个大学必须购买了一些数据
库一样(例如elsevier、EI village、science diredct等等)。
公司通常都可以方便的查找各种文章以及专利信息吗?

【在 l******o 的大作中提到】
: 问一下在公司上班的朋友们,你们能在公司上web of science查找文献吗?
: 就像在大学里一样,想要查什么文章,这个大学必须购买了一些数据
: 库一样(例如elsevier、EI village、science diredct等等)。
: 公司通常都可以方便的查找各种文章以及专利信息吗?

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i*a
5
I bought it. but it's only 14/month for me : ]
never really used it except couple times used it and called lawyers on
advice

【在 s******o 的大作中提到】
: 公司的benefits之一,$21/m,不知道有没有实际用处,大家上班的都有/买不?
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i*i
6
Just order shRNA from Sigma.
5 clones for $300, much cheaper than order oligos from IDT.
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s*2
7
order two oligos (add overhangs for ligation),
mix at 1:1 molar ratio,
boil,
cool down slowly to anneal,
ligate with your cut vector.

【在 m******t 的大作中提到】
: sequence 和酶切点已知。OE 作过,shRNA 真没作过。 多谢
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a*a
8
re
记得aneal浓度100uM
连接浓度稀释到1-0.1uM

【在 s**2 的大作中提到】
: order two oligos (add overhangs for ligation),
: mix at 1:1 molar ratio,
: boil,
: cool down slowly to anneal,
: ligate with your cut vector.

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s*l
9
这对我来说已经完全是piece of cake. 不过当初学 shRNA 克隆时 吃了很大的苦头。

【在 m******t 的大作中提到】
: sequence 和酶切点已知。OE 作过,shRNA 真没作过。 多谢
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s*l
10
这对我来说已经完全是piece of cake. 不过当初学 shRNA 克隆时 吃了很大的苦头。

【在 m******t 的大作中提到】
: sequence 和酶切点已知。OE 作过,shRNA 真没作过。 多谢
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s*i
11
可以考虑用 Stephen Elledge lab 的 pPRIME system 做,质粒在 addgene上 60块钱
一个,质粒的webpage上有protocol

【在 m******t 的大作中提到】
: sequence 和酶切点已知。OE 作过,shRNA 真没作过。 多谢
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m*t
12
能否帮助一下? strategy ok

【在 s*****l 的大作中提到】
: 这对我来说已经完全是piece of cake. 不过当初学 shRNA 克隆时 吃了很大的苦头。
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s*g
13
够便宜的,QIAGEN一套得800刀以上

【在 i*****i 的大作中提到】
: Just order shRNA from Sigma.
: 5 clones for $300, much cheaper than order oligos from IDT.

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s*l
14
insert 一定要干净,ph值要是中,vector:insert 的比例一定要尽量准确。

【在 m******t 的大作中提到】
: 能否帮助一下? strategy ok
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